【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

（1）酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是___________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_____________。

（2）实验室可采用__________法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，还需要额外在培养基中添加_________________。

（3）为了保持所获得的菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，需将菌种接种在___________上。放入4℃冰箱中可保藏3-6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的_______ ___混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

（4）在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学认为是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持_______的观点，理由是______________。

酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答： 

（1）酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物                      。 

（2）实验室可采用                           法进行菌种纯化，所用培养基需经_________________法进行灭菌。 

（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏，也可以利用____________的方法长期保存。

（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持            ，(1分)理由是                     。 

（1）像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有                     等。(要求回答4种营养物质)

（2）当酵母繁殖时，没有糖转化为酒精，此时酵母菌为                 呼吸．

（3）从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌，最简单的培养方法是：在              并且                条件下进行培养．

（4）葡萄酒制作是否成功，发酵后需用             来鉴定，在             条件下，该物质与酒精反应呈现            色。

（5）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用                   培养基，常用的接种方法                和                 ．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为               个/mL．该统计结果             （低于、高于）实际值。

（1）与酵母菌相比，乳酸菌结构上的主要特点是   ▲   。

（2）目前已知的乳酸菌大约有200多种，如果要对其纯化并计数可采取的方法是   ▲   。

（3）与鲜奶相比，等量酸奶中的有机物种类   ▲   （增加，减少），营养价值提高。

（4）蜂蜜的pH为4.6，乳酸菌的最适pH接近中性。工业制作蜂蜜酸奶时，需向蜂蜜中加入过量的CaCO₃，进行该处理的目的是   ▲   。

（5）据表中数据，A组比B组转化率低的原因最可能是培养基中缺少乳酸菌所需的   ▲   （类）营养物质。D组比C组转化率高表明蜂蜜中含有乳酸菌生物所需的   ▲   （类）营养物质。

（6）近年来，少数不法奶农长期向奶牛的饲料中添加过量的抗生素。这些奶牛所产的鲜奶制作酸奶时很难成功，原因是   ▲   。

（2）制作食醋所用的菌种是        ，根据其对氧气的需求判定，其属于         。

（3）在制作葡萄酒的过程中，应将温度控制在18-25℃，在制作葡萄醋时应严格控制温度在30-35℃，这样做的原因是                                        。

（4）果汁发酵是否产生酒精，可用               检测。

（5）要想在实验室对酵母菌和醋酸菌进行纯化，接种的方法最常用的是            和           。

&;   我国为苹果生产大国，为解决鲜果积压、卖果难的问题，发展苹果深加工，利用苹果来酿果酒、果醋和加工成果汁等是解决这一问题的良好途径。请回答下列问题：

（1）苹果酒具有预防血管硬化等疾病、促进新陈代谢、抗衰老、美容养颜等保健作用，下图是为适合青少年和酒精耐受力的人群而设计的苹果酒的酿制流程：

       发酵菌种活化的过程需加入            并进行搅拌。活化后发酵前 应进行酵母菌的纯化培养，常用方法是             和           。所用培养基从功能上属于               。

（2）苹果醋具有护肤、减肥、营养、解酒和消除疲劳等功效，参与果醋发酵的菌种是           。在果酒发酵后期，如果提供           等环境，即可生产果醋。

    （3）苹果的全身都是宝。苹果的果皮可提取香精油，这种香精油具有天然的香味，是制酒、糕点等的天然保健食用油，一般采用       法。果肉除酿制果酒和果醋外，还可加工成罐头、果汁等。             酶可使果酒、果汁的澄清度高，颜色鲜亮，提高品质。

   （4）某果农发现一苹果树的结实率高、品质好，欲在较短时间内大量繁殖该品种，可采用             方法，该技术所用到的最关键激素是               。

发酵法生产酒精后的废液含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图：

请据图回答：

（1） 发酵生产酒精的过程中，发酵液会变成酸性，变酸的原因是       。

（2）废液上清液定量分装前，先调节       ，分装后进行高压灭菌处理，请指出下述高压灭菌的不正确的操作，并说明理由       ：

锥形瓶加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压灭菌锅，锥形瓶应尽量靠紧桶壁，防止滑动；加盖时要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致；加热时，打开排气阀，等冷空气完全排尽后，关上排气阀；到灭菌时间后，打开排气阀排气，让灭菌锅内压力、温度快速下降，当压力表的压力降到零时，旋松螺旋，打开盖子，取出锥形瓶。

（3）图中①过程称为       ，从甲到丁的培养过程是为了       。

（4）为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量滤纸的质量。过滤后需反复烘干称量，直至         。所获菌体干重等于         。

生物技术实践在生产实践中解决了很多实际问题。回答下列相关问题：

(1)传统发酵技术的应用包括果酒果醋的制作、________的制作以及________。

(2)用________法筛选纤维素分解菌，原理是不能形成________，在培养基中出现标志性的透明圈。

(3)若要测定培养液中某菌的活菌数量，可用________法进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目________。

(4)蛋白质的提取和分离一般分四步：________、________、纯化和纯度鉴定。

生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：

土壤取样—→选择培养—→梯度稀释—→鉴别培养。

请回答下列有关问题：

(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来，

获得纯种酵母菌，这一过程叫做          。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是                     。

(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有          ，常使用          的方法从发酵液中提取纯酒精。

(3)从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在          环境中采集土样，所选择的培养基应以          作为唯一碳源。