为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA,科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞,并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA,使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果,主要实验步骤和相关检测结果如下,其中氯仿—异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿—异戊醇,蛋白质等溶于氯仿—异戊醇。分析回答:

⑥将沉淀室温干燥后,溶于超纯水中,-20 ℃保存备用

结果检测

注: ①纯净的DNA样品OD₂₆₀/OD₂₃₀值约为2.0,过低表明小分子物质残留较多;②纯净的DNA样品OD₂₆₀/OD₂₈₀值约为1.8,若比值大于1.8表示存在RNA残留,若小于1.8表示存在蛋白质残留。③得率是指每毫克组织所提取的DNA量。

(1) 步骤③将DNA粗提液在65 ℃水浴保温60 min的目的是           。步骤④“?”表示       。步骤⑤中加RNA酶的作用是                　。 

(2) 影响DNA纯度的物质主要有       。提取的DNA中RNA残留较多的方法是       。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高,原因是            。 

(3) 电泳可以直观对比DNA的完整性,分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同,从而产生不同的条带。下图是上述实验中提取到的总DNA凝胶电泳结果,其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带,而C方法有明显的“拖尾”现象。

①只出现一条带的原因是                        。 

②出现“拖尾”现象的原因是                    。 

【生物一选修3现代生物科技专题】
    请结合所学知识及相关信息回答下列问题：
（1）基因工程常用限制性核酸内切酶切割DNA分子，切割后产生的DNA片段的末端类型有             和平末端。
（2）面对转基因技术的利弊，我们应持有的正确做法                           。
下列关于现代生物工程技术的安全性和伦理问题的分析，不合理的观点是：            。
A．转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒
B．运用DNA重组技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器
C．我国的政策是禁止进行生殖性克隆人
D．转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存
（3)设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行                   。
（4）PCR技术是一种DNA的扩增技术。该过程除需目的基因和原料（包括 dATP、 dGTP、           、         ）之外还需提供   种引物和热稳定DNA聚合酶。进行PCR时需加热至90～95℃然后冷却至55～60℃，此操作的目的                                 。
（5）DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度不同。在2mol/LNaCl溶液中，DNA溶解，部分蛋白质盐析生成沉淀；在           mol/LNaCl溶液中时，DNA析出。在沸水浴的条件下，DNA溶液遇             试剂会被变成蓝色的特性，可以鉴定提取的DNA。

某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：

材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。

DNA粗提取：

步骤一：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液（含洗涤剂和食盐），充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。

步骤二：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。

步骤三：取6支试管，分别加入等量的            （填溶液名称及浓度）溶液溶解上述絮状物。

步骤四：：在上述试管中各加入4mL             试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：

分析上述实验过程，回答下列问题：

（1）该探究性实验课题名称是          。

（2）步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是           ，食盐的作用是          。

（3）步骤二中“缓缓地”搅拌，这是为了           ，所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制          的活性，可以防止DNA降解。

（4）上述实验中步骤三，步骤四的空缺依次分别为            、           。

（5）实验表明，         获取的DNA量最多。