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            • 1. 番茄营养丰富,是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因(PG),控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要,科学家们通过基因工程技术,给普通番茄细胞中导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因(抗PG),培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如如图所示,请据图回答:

              (1)过程①通常会用两种限制酶切割目的基因的原因是_______________________ 。
              (2)经过程②可获得三种土壤农杆菌,除依据质粒上的___________筛选出的含重组DNA的土壤农杆菌外,还有___________、___________的两种土壤农杆菌。
              (3)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接导致了___________无法合成,最终使番茄获得抗软化的性状。
              (4)目的基因能否在番茄细胞内稳定存在的关键是___________。

              (5)如果利用上述方法培育出的蕃茄不具抗软化性状,经分子杂交技术检测,发现细胞内有抗PG存在,但检测不到mRNA2分子,可能原因是目的基因(抗PG)上游缺少___________。

            • 2.

              假设A、b代表玉米的优良基因,这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种,为培育出优良品种AAbb,可采用的方法如图所示。请根据图回答问题:



              (1)由品种AABB、aabb经过①、②、③过程培育出新品种的育种方式称为________,这种育种方式的不足之处是________________________。

              (2)过程⑤常采用________技术得到Ab个体。

              (3)过程⑦的育种方式是________,与过程⑦比较,过程④的明显优势是________。

            • 3.

              人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

              (1)为获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取mRNA合成_________,然后以此为模板,采用___________________扩增HSA基因。

              (2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是______________________。

              (3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是________________________________________________________________________。

              (4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径Ⅱ相比,选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是___________________________________。

              (5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与________的生物学功能一致。

            • 4. 下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答:
               
              (1)②所示的生物技术名称是____________ ,该项技术的供体细胞一般都选用____________代以内的细胞,这是因为____________ 。重组细胞A培养过程中所用培养液除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等成分以及____________ 等物质,并且用一定的方法激活其完成细胞分裂和发育进程。该过程通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外,还因为它含有____________ 的物质。
              (2)④所示的生物技术名称是____________ ,若想得到大量健康的胰岛B细胞基因,可利用__________ 技术,该技术利用的工具酶是____________。
              (3)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是____________ 。该种基因治疗所属类型为____________ 。
            • 5. 野生猕猴桃是一种多年生的富含VC的二倍体(2N=58)小野果。下图是某科研小组以野生猕猴桃种子(aa)为实验材料培育抗虫猕猴桃无子新品种的过程,据图回答:


              (1)各代号表示的育种类型中:①表示________,③表示________。

              (2)③⑦过程用到的药剂是________,原理是______________________________。

              (3)若⑤过程是杂交,产生的AAA植株,其体细胞含染色体数目是________,该植株所结果实无子的原因是____________________。

              (4)⑥过程中用到的工具酶是____________________________。AAA的细胞成功接受抗虫基因B后,经植物组织培养产生幼苗,移栽后长成AAAB的抗虫新品种植株,这种变异属于________。

            • 6.

              科学家将鼠体内的能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组,并且在大肠杆菌中发现了胰岛素。如下图所示,请据图回答下列问题。

              (1)图中②⑤③⑦表示通过_____________________________________________的途径,获得__________________的过程。

              (2)图中③代表__________________,在它的作用下将_____________和___________切成______________________________末端。

              (3)经⑨__________________的作用将⑦和⑥“缝合”形成⑧_________DNA分子。⑧往往含有_________基因,以便将来检测。

              (4)⑪表示⑧随大肠杆菌的繁殖而进行_________。

              (5)如在大肠杆菌细胞内发现了胰岛素,说明___________________________________。

            • 7.

              以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程,a~h为操作过程,请据图回答有关问题:

              (1)试管牛技术的操作流程是________________(填字母)。

              (2)图中用激素处理良种奶牛过程用到的激素是_________________,其目的是获得更多的卵母细胞。对供体母牛和受体母牛需要做___________处理,从而处于相同的生理状态。

              (3)若a表示体内受精,则在此过程中防止多精入卵受精的两道屏障分别为               和____________。

              (4)d操作的名称是____________,受体母牛必须和供体牛属于同一物种。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________________________________________________。

              (5)若要获得遗传物质完全相同的两个新个体,可对发育到           阶段的早期胚胎进行________________处理,再植入到受体内。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意__________________________________。

            • 8.

              下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯徳毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资枓:

              资料1:巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源,此时AOX1基因受到诱导而表达(5′AOX1和3′AOXl(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子)。

              资料2:巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体,其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中已实现表达。

              资料3:限制酶酶切位点


              (1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,应在图2中HBsAg基因两侧的A和B位置接上_______限制酶识别序列,这样可避免质粒和目的基因自身环化。

              (2)为确认巴斯德毕赤酵母茵转化是否成功,在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选,转化后的细胞中是否含有HBsAg基因,可以用___________方法进行检测。

              (3)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后,需要向其中加入___________以维持其生活,同时诱导HBsAg基因表达。   

              (4)与大肠杆菌等细菌相比,用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞,其优点是在蛋白质合成后,细胞可以对其进行___________并分泌到细胞外,便于提取。

              (5)下图为HBsAg某DNA片段一条链的碱基排列顺序。其中图1的碱基排列顺序已经解读,其顺序是:GGTTATGCGT,请解读图2显示的碱基排列顺序:______________________。

            • 9.

              绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV,蛋白,叶片对TMV具有抗感染性。烟草是具有重要经济价值的双子叶植物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示。

              (1)理论上,基因组文库含有生物的________________基因;而cDNA文库中含有生物的________________基因。

              (2)科学家从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中①过程表示____________。

              (3)基因工程最核心的步骤是____________,④过程将重组Ti质粒导入烟草体细胞的常用方法____________。

              (4)由图分析,在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是____________基因,它的作用是____________。

              (5)过程⑥可采取____________的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过____________的方法来确定植株是否具有抗性。

            • 10.

              假设A、b代表玉米的优良基因,这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种,为培育出优良品种AAbb,可采用的方法如图所示:

              (1)由①→⑤→⑥的育种方法的原理是_________,该育种方法的优点是_________。

              (2)由①→②→③的育种方法虽然育种时间长,但是可以将多种优良性状集中在一个生物体身上,③步骤具体的操作方法是__________________。

              (3)⑦育种方法往往不一定能达到目标,原因是__________________________。

              (4)④过程必需要用到的一种特异性的工具酶是_____________________。

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