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            • 1. 某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性.供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞.请回答下列有关动物细胞培养的问题:
              (1)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量    .细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是    
              (2)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长    .若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用    消化处理.
              (3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的    
              (4)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入    ,B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的    合成水平的差异,确定Y的药效.
            • 2. 下列关于细胞工程的叙述,错误的是(  )
              A.电激可诱导植物细胞融合或动物细胞融合
              B.动物组织消化后的初次培养称为原代培养
              C.制作动物细胞悬液可用纤维蛋白酶
              D.动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植
            • 3. 血管内皮生长因子(VEGF)是目前发现的诱导肿瘤血管生成的最强烈的血锌生成因子,针对VEGF生产的抗肿瘤药物,是治疗癌症的一个方向;芝加哥大学的Katherine Knight博士成功地在转基因兔中获得骨髄瘤样肿瘤,经技术改进,能高产量地生产兔单克隆抗体:我国江苏省某公司首次在全球成功开发出人源化兔单抗药物“注射用人源化抗VEGF单克隆抗体”(SIM63),有效打破了跨国公司的技术垄断.人源化抗体可以大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应.请回答下列相关问题:
              (1)动物细胞在体外培养的技术属于    工程,由于人们对动物细胞所需的营养物质没有完全搞淸楚,在使用合成培养基时,通常需要加入    等一些天然成分:在培养时除提供细胞所需的O2外,还需要CO2,其作用是    
              (2)在基因工程中,将目的基因导入动物细胞现今极常用、极有效的方法是    ,要在短时间内扩增大量的目的基因采用    技术,这个技术中的关键酶是    
              (3)当VEGF作为抗原进入动物体内时,动物体内的某些B细胞分化为浆细胞,这种浆细胞只分泌针对VEGF的一种抗体,但B细胞在体外培养不会无限增殖,解决这一问题的方法是通过动物细胞融合技术得到杂交瘤细胞,常用的化学诱导融合试剂为    ,要分离出杂交瘤细胞,应该用    培养基进行筛选,单克隆抗体最主要的优点是它的    ,并可大量制备.
            • 4. 下列有关细胞工程的叙述,不正确的是(  )
              A.“生物导弹”是指单克隆抗体
              B.动物细胞培养时通常在培养液中添加一定量的抗生素
              C.选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可以提高克隆动物的成功率
              D.动物细胞培养技术可以应用于检测有毒物质,判断物质毒性
            • 5. 下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是(  )
              A.组织细胞培养出现接触抑制时,在培养瓶壁上可形成多层细胞
              B.培养瓶或培养皿的内表面光滑细胞不易贴附
              C.进行二倍体细胞的传代培养时,细胞的核型不会改变
              D.细胞要能够贴附于底物上才能生长增值
            • 6. 图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图,图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图.

              (1)图一所示,制备细胞悬液时,常用    酶来消化剪碎的组织块.配制培养液时,通常需要在合成培养基的基础上添加    等一些天然成分.当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂,这种现象称为细胞的    
              (2)ES细胞是由    中分离出来的一类细胞,ES细胞在功能上具有发育的    
              (3)MEF细胞能够分泌某些蛋白质,其合成到分泌至细胞外的过程是:核糖体→    →囊泡→    →囊泡,再通过    方式分泌到细胞外.在培养液中单独培养ES细胞时,ES细胞容易发生分化,结合图二可推知MEF细胞的作用是    
              (4)在治疗性克隆过程中,细胞核取自患者细胞,这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生    反应.
            • 7. 美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛,年产奶量达30.8t,我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t.某人用该高产奶牛的耳朵细胞,采用核移植技术获得高产奶牛(如下图).

              (1)动物细胞培养的原理是    ,在此过程中为了防止培养液被污染,还需在培养液中添加一定量的    ,此外还应定期    ,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害.
              (2)用于核移植的供体细胞,一般都选用    代以内的细胞,采集的卵母细胞也需在体外培养至    期后,再去核.
              (3)核移植中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是    
              (4)将重组胚胎移入代孕母牛子宫内的最佳时期是    .胚胎移植实质上是    
            • 8. 现代生物工程技术推动了免疫学和畜牧业的发展.
              (1)制备单克隆抗体需要借助动物细胞融合技术,其过程中与植物不同的方法是使用    诱导,融合细胞首先需要经过    培养获得杂交瘤细胞;还需进行    化培养和抗体检测,经多次筛选,用专一抗体检验呈阳性才可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞,再进行体内或体外培养,大量制备单克隆抗体.
              (2)对大面积烧伤病人,借助    技术可获取大量自身健康皮肤用于移植.培养的条件需要    、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO2混合气体(维持培养液的pH).
              (3)用细胞核移植技术繁育良种牛的培育过程需要进行胚胎移植,移植前需要对受体牛进行    技术处理,对外来胚胎基本不发生    ,为胚胎在受体内的存活提供了可能.
            • 9. 人的内皮抑素(一种蛋白质)能诱导血管内皮细胞凋亡,进而抑制新血管的产生.临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞,使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素,抑制新生血管的形成,使肿瘤细胞进入休眠状态并诱导其凋亡.
              回答下列问题:
              (1)从肝细胞中提取总mRNA,利用逆转录酶合成    ,根据内皮抑素基因的    设计并合成引物,利用PCR技术得到大量内皮抑素基因.
              (2)在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导人受体细胞的过程中,以    作为工具酶,以    作为载体.
              (3)在进入临床使用前,需用体外培养的血管内皮细胞进行生理、病理检测.为获得大量的血管内皮细胞,首先用    酶处理血管内皮组织,使其分散成单个细胞,制成细胞悬液,然后将其放人含    等一些天然成分的合成培养基中培养.
              (4)血管内皮细胞被重组腺病毒感染后,若通过    方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡,则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性.
              (5)临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞,使肿瘤生长受到抑制,这种治疗方法属于    (填“体内”或“体外”)基因治疗.
            • 10. 下列关于现代生物技术应用的叙述,正确的是(  )
              A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质
              B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体
              C.植物组织培养技术可用于抗毒作物的培育
              D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育
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