胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：

(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于__________，细胞B的名称是___________。

(2)应用2中牛完成体内受精的场所是_________，此时卵子需要达到________期，才具备与精子受精的能力。

(3)获得更多基因型完全相同的牛，可采用图中的应用______（填数字）的培养技术。

(4)胚胎干细胞可以从细胞C__________或细胞D__________中分离出来。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是____________的结果。

下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程，请据图回答问题:

【加试题】回答下列（一）（二）小题

（一）随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：

（1）获取土壤样品的取样地点最好选在  。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源,其原因是  。

（2）根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是  ，若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液    。

（3）纯化菌株时,通常使用的划线工具是  。采用  方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是  （写出一点即可）。

（二）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（2）在过程②中，用  酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫细胞克隆。未经克隆化的细胞系具有  性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的  ，在培养过程中应将培养瓶置于  培养。

（3）若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行  后进行胚胎移植。

（4）下列有关转基因山羊培育过程的叙述，错误的是  。

A.图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞

B.重组细胞最初分裂时开始进行DNA复制和基因的转录

C.将早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位

D.如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链式反应扩增该基因

【生物——选修3 现代生物科技专题】

人们利用转基因、核移植等技术获得动物胚胎，移植给受体获得后代。请回答：

（1）在转基因过程中，构建基因表达载体常用的工具酶是           ；将目的基因导入动物细胞的技术是                    。

（2）在核移植过程中，从供体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为             ，其细胞数量达到一定程度后出现             现象而使细胞停止分裂，需用酶处理使其分散成单个细胞继续培养。

（3）用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是                   ；所用的去核卵母细胞一般处于 期；用于培养供体细胞的培养基中通常含有                      等天然成分。

（4）胚胎移植时，胚胎在受体内存活的生理学基础是受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生     反应；欲获得遗传物质完全相同的两个后代，可选择发育良好、形态正常的          进行胚胎分割，因为该时期的细胞具有                               。

蜘蛛丝纤维在国防、军事（防弹衣）、建筑等领域具有广阔应用前景。科学家利用基因工程培育出了乳汁内含有蜘蛛丝蛋白的羊，简称“蜘蛛羊”。请回答以下问题：

⑴从蜘蛛体内获得的蛛丝蛋白基因，可利用               技术进行体外扩增，进而为实验获得足够的目的基因。得到的目的基因应                       等调控组件组在一起，然后与载体构建成基因表达载体，再通过显微注射法，将表达载体导入羊的                ，获得重组细胞。

⑵将获得的重组细胞在添加               这种天然成分的培养基中培养至早期胚胎，移植到经过                    处理的受体母羊的子宫内。若一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可将早期胚胎进行                   处理。

⑶若所得的“蜘蛛羊”（已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白。科学家为判断问题所在，应该用                      技术，先检测蛛丝蛋白基因是否整合到染色体上，若已确定此步成功，则应该继续检测                                  。

【生物——选修3：现代生物科技专题】

   目前我国的第三代试管婴儿技术已获得突破，不但能解决部分不孕不育问题，还能在胚胎移植前对部分遗传性疾病进行筛查，从而实现优生优育。请回答下列问题：

（1）第三代试管婴儿利用了下列________（填字母）手段。

A．体外受精技术   B．胚胎移植技术

C．植入前胚胎遗传学诊断技术   D．克隆技术

（2）胚胎发育的卵裂期在________（填“透明带”或“放射冠”）内进行。受精卵经72小时体外培养发育成有32个细胞左右的________胚，可用于胚胎移植。要得到“同卵双胞胎”，理论上需要采用________技术。

（3）为了避免某些遗传病的发生，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最准确的方法是从被测的囊胚中取出几个________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作________，以________________为模板进行PCR扩增；最后与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为________________性。

[生物——选修3现代生物技术专题]

   基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。请回答下列问题：

（1）基因工程的核心步骤是________________________，这一过程需要的酶是___________________________________________。

（2）一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，________，________，标记基因等。通常用________________________技术将目的基因导入动物细胞。

（3）欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取________________，用________________________杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，反之，表明奶牛中未出现抗原蛋白。

（4）胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是_________________________________。

（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用___________________分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将____________________均等分割。

(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是________。该过程所用的生物技术有_______________。

(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和________的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的__________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在__________(填“体内”或“体外”)完成的。

(3)图3中过程①是植物细胞形成_______的阶段，该阶段所用的酶是_______。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是__________。

请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题：

（1）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于初级卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂_______期时，才具备受精能力。若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体，则表明_________过程已完成。 

（2）动物的早期胚胎移植到同种且_______与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个 体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎，常用________激素对供体进行处理，其目的是获得更多的卵母细胞，经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜_____________。

（3）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑葚期或囊胚 期阶段的早期胚胎进行____________处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于________________条件下。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

α-抗胰蛋白酶是一种重要的药用蛋白，可在转基因母羊的乳汁中获得。流程如图：

（1）目的基因与表达载体用________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要经过________，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。

（4）检测目的基因是否已转录出了mRNA，可采用________技术。若要检测羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用________法，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。