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            • 1. 请回答下列与生物工程相关的问题:
              (1)将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是 ______ .通过农杆菌的转化作用,使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上,从而使抗盐基因的遗传特性得以 ______
              (2)用DNA连接酶把被限制酶I(识别序列和切点是-↓GATC-)切割得到的运载体和被限制酶II(识别序列和切点是-G↓GATCC-)切割得到的目的基因连接起来后,该重组DNA分子的新连接处能够再被限制酶II切割开的概率是 ______
              (3)胚胎分割操作过程需要特别注意的问题是:将囊胚的内细胞团进行均等分割,否则会影响分割后 ______
              (4)体外培养动物细胞需要满足以下条件: ______ 、添加了血浆(或“血清”)的培养基、适宜温度与pH、 ______ 的气体环境等.
              (5)对于转基因生物,公众在 ______ ______ ______ 方面产生了争议.
              (6)湿地具有蓄洪防旱、调节区域气候等功能,这体现了生物多样性的 ______ 价值.依据生态工程的 ______ 原理,鄱阳湖自然保护区的建立需考虑周边的经济发展等相关问题.
            • 2.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱,是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上,有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液,研究细菌的种类和数量。请回答下列问题:

              (1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基,配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

              (2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板________(填“正置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用________法接种。接种时,为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在________附近进行。

              (3)在培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,说明西瓜的浸出液中有________(填“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多,说明西瓜被细菌污染的程度越________(填“高”或“低”)。


              [生物——选修3:现代生物科技专题]

              多不饱和脂肪酸需要从膳食中摄取,人体不能直接合成。科学家通过转基因手段将ω-6脂肪酸脱氢酶基因(FAT1)整合到肉牛基因组,以期提高肉牛体内的多不饱和脂肪酸含量,促进人体健康。请回答下列问题:

              (1)将ω-6脂肪酸脱氧酶基因导入肉牛细胞中常用的方法是________,在用PCR技术扩增目的基因时,需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、4种原料、________和________。

              (2)体外受精获得受精卵时,将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养,其目的是________。

              (3)胚胎移植前可选择发育良好、形态正常的________(填胚胎发育时期)进行________,以实现同卵多胎。

              (4)该转基因牛还可以用核移植的方法繁殖,用核移植的方法得到的动物称为________,用于核移植的供体细胞一般选择10代以内的细胞,目的是保持细胞正常的________。

            • 3.

              A.[生物——选修1:生物技术实践]

              请回答下列有关传统发酵技术在食品工业上应用的问题:

              (1)果酒的制作过程中,常用的菌种是________。果醋制作过程中持续通入氧气的原因是________。

              (2)检测酒精常用的试剂是重铬酸钾,其原理是在酸性条件下酒精能够使重铬酸钾呈________色。

              (3)腐乳的制作过程中发挥作用的酶主要是________。豆腐块要加盐腌制,因为加盐可以抑制微生物的生长,原因是________。

              腐乳制作完成后再封装时要将瓶口通过酒精灯的火焰,目的是________。

              B.[生物——选修3:现代生物科技专题]

              1998年我国培育出首只转基因羊,该转基因羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白,人凝血因子IX蛋白是治疗血友病的药物。请回答下列问题:

              (1)生产转基因羊的过程中,最核心的步骤是________,为了在羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白,应将人凝血因子IX蛋白基因和________连接在一起。和目的基因紧邻的另一端还应含有________。

              (2)重组DNA分子上标记基因的作用是________。要检测目的基因是否插入动物细胞的DNA上,常用的方法是________,原理是________。

              (3)可利用胚胎分割技术获得多只转基因羊,当对囊胚期的胚胎分割时应注意________,目的是________。

            • 4.

              [生物——选修3:现代生物科技专题]

              目前我国的第三代试管婴儿技术已获得突破,不但能解决部分不孕不育问题,还能在胚胎移植前对部分遗传性疾病进行筛查,从而实现优生优育。请回答下列问题:

              (1)第三代试管婴儿利用了下列________(填字母)手段。

              A.体外受精技术

              B.胚胎移植技术

              C.植入前胚胎遗传学诊断技术

              D.克隆技术

              (2)胚胎发育的卵裂期在________(填“透明带”或“放射冠”)内进行。受精卵经72小时体外培养发育成有32个细胞左右的________胚,可用于胚胎移植。要得到“同卵双胞胎”,理论上需要采用________技术。

              (3)为了避免某些遗传病的发生,需对胚胎的性别进行鉴定。目前最准确的方法是从被测的囊胚中取出几个________(填“滋养层”或“内细胞团”)细胞,提取DNA;然后用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)的一段碱基作________,以________为模板进行PCR扩增;最后与SRY特异性探针出现阳性反应者,胚胎为________性。

            • 5. 毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

              (1)过程①中最常用的运载工具是 ______ ,所需要的酶是限制酶和 ______
              (2)在过程②中,用 ______ 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是 ______
              (3)在过成③中,用 ______ 处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 ______ 处理.
              (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
            • 6. 人的血清白蛋白(HSA)有许多作用,如对血液中的免疫球蛋白(抗体)有保护和稳定的作用.如果免疫球蛋白缺少了这种保护,免疫力就会变得不稳定,容易引起各种疾病,所以在临床上需求量很大.白蛋白通常从人血中提取,产量受到限制.如果应用基因工程、克隆等技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能.如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解,请根据图解回答下列问题:
              (1)图中①一般经 ______ 处理可以得到③.将②导入③最为有效的方法是 ______
              导入前,需要将②与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤是基因工程的核心,称为 ______
              (2)通过核移植技术能够得到胚胎④,精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎.在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括 ______ 反应和 ______ 作用.
              (3)若需要迅速得到大量转基因奶牛,可采用下列处理方法:将早期胚胎④处理后形成若干个胚胎⑤,此种方法称 ______ .进行上述操作时,应选择发育至 ______ 或囊胚阶段的胚胎进行操作,对后者操作时必须注意将 ______
            • 7. 如图是科学家采用不同方法培育良种牛的过程,a~h为操作过程,请据图回答有关问题:

              (1)“试管牛”技术的操作流程是 ______ (填字母).
              (2)胚胎性别鉴定取 ______ (填①、②、‚或ƒ③)细胞做DNA分析,胚胎干细胞可从 ______ 填(①、②‚或③ƒ)获取.
              (3)f操作的名称是 ______ ,受体子宫内胚胎发育的过程中,细胞不断分裂,其分裂方式为 ______
              (4)图中用到的激素是 ______ ,其目的是获得更多的卵母细胞,经受精后可得到早期胚胎.用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是活细胞膜 ______
              (5)过程h常用的方法是 ______ .为了能确定目的基因已经导入到受精卵,相应的载体需要有 ______ 以便于进行筛选检测.
              (6)若要获得遗传物质完全相同的两个新个体,可对发育到 ______ 阶段的早期胚胎进行处理,再植入到受体内.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意 ______
            • 8. 如图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图同答:

              (1)分析可知,科学家获取绿色荧光蛋白基因所运用的限制酶是图中所示的 ______ ,最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于 ______
              (2)图示工程中,将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的过程③称为 ______ ,常用的方法是 ______
              (3)图示中,作为受体细胞的去核卵母细胞一般处在 ______ 期,常通过 ______ (物理方法)进行激活,使其完成减数分裂和发育进程.
              (4)培养图示重组细胞时,将细胞所需的营养物质按其种类、数量严格配制而成的培养基称为 ______ 培养基.通常在培养基中还需要加入适量的 ______ 等天然成分.
              (5)图示重组细胞培养至一定阶段可通过 ______ 方法,从而一次获得多个转基因猪.过程⑧的实质是 ______
            • 9. 如图是利用奶牛乳汁生产人的血清白蛋白的图解,根据下图回答:

              (1)上述过程中涉及到的现代生物技术主要有: ______
              (2)在形成图中③的过程中,实现②进入③的方法目前最常用的是 ______
              (3)图中①一般经 ______ 酶处理可以得到③.
              (4)基因工程的核心步骤是 ______
              (5)重组细胞④发育至胚胎⑤的过程中,细胞分裂方式是 ______ .在胚胎移植前,通过 ______ 技术可获得较多胚胎.
              (6)小牛⑦的性别是 ______ .⑦是⑥的后代,那么⑦与⑥的遗传性状一样吗? ______ .利用核移植的方法得到的动物叫做 ______
              (7)为保证被培养的动物细胞处于无菌无毒的环境,通常要在培养液中添加一定量的 ______ ,此外应定期更换 ______
              (8)⑤能在⑥子宫中存活的生理基础是 ______
            • 10. (14分)

              Ⅰ.转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞,进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内,最终获得转基因克隆猪。请回答:

              (1) 在对猪纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的           ,以防止培养过程的污染。此外,应定期更换培养液,防止              对细胞自身造成危害。

              (2) 筛选转基因细胞时,需要用到基因表达载体中的               

              (3) 在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集             ,并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入           中,再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

              (4) 为了提高重组胚胎的利用率,可对处于           阶段的胚胎进行均等分割,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地,代孕母猪需要用激素处理,促使其           以利于受孕。

              Ⅱ.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答:

              (1) 分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有              (至少答2种)。

              (2) 可用                法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中,要在          旁进行操作,接种后的培养皿            于37℃的            中培养。

              (3) 用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的            使PH升高,使酚红指示剂产生颜色变化,从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力                

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