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            • 1. 回答下列有关现代生物科技专题的问题:
              (1)基因工程中能连接两种末端的“分子缝合针”是    .基因工程的核心步骤是    
              (2)进行植物体细胞杂交时,化学法一般是用    作为诱导剂来诱导细胞融合.用动物细胞制备的单克隆抗体最主要的优点是    
              (3)胚胎工程中的最后一道“工序”是    
              (4)囊胚时期可发育成胎儿各种组织,个体较大的细胞是    细胞,而    细胞可以用于性别鉴定,该处细胞将来会发育成    
            • 2. 约翰•伯特兰•戈登和山中伸弥因在“体细胞重编程技术”领域做出革命性贡献而获得诺贝尔生理学或医学奖.请回答下列问题:
              (1)1962年约翰•伯特兰•戈登通过实验把蝌蚪肠上皮细胞的细胞核移植进入去核的卵细胞中,成功培育出“克隆青蛙”.因动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐    ,但此实验说明已高度分化的动物体细胞的    仍具有发育全能性.更多的实验证明,到目前还不能用类似    技术(克隆植物的方法)获得克隆动物.
              (2)所谓“体细胞重编程技术”是将体细胞重新诱导回早期干细胞状态,即获得诱导性多能干(iPS)细胞.山中伸弥把4个关键基因转让小鼠的成纤维细胞,并整合到染色体的    上,使其转变成iPS细胞;为确定基因是否进入成纤维细胞可用    技术检测.
              (3)在研究中可通过    技术获取大量iPS细胞,该过程一般需先加入    处理一段时间,分散成单个细胞,然后分瓶继续培养;另外,iPS细胞还需置于二氧化碳培养箱中培养的目的是    
            • 3. 图为人类对克隆羊技术的拓展及应用的设想.请据图回答问题:

              (1)图中所涉及的现代生物技术有    等(至少写三个).
              (2)若利用图中过程最终获得婴儿说明    具有全能性,两个婴儿性状与    基本相同.
              (3)使用培养基进行重组细胞培养时,通常要加入    等天然成分,为防止培养过程中杂菌污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的    .培养过程中通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含    的混合气体的培养箱中进行培养.
              (4)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,必须用    处理内细胞团,使之分散成单个细胞.
              (5)胚胎干细胞在形态上具有的特点是    
            • 4. 胚胎干细胞(ES细胞)在基础生物学、畜牧学和医学上具有十分重要的价值,其应用前景吸引众多科学家投入到这一研究领域中.根据相关知识,回答下列问题:
              (1)哺乳动物的胚胎干细胞(ES细胞)是由    或原始性腺中分离出来的一种细胞,在功能上具有    ,即可以分化出成年动物体内任何一种组织细胞.
              (2)ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料,ES细胞在    细胞上能维持不分化的状态.在培养基中加入    可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化.
              (3)ES细胞的另一个应用前景为体外诱导分化,从而培育出人造组织器官,进而解决临床上存在的供体器官不足和    问题.此外,科学家还试图用基因工程方法对动物器官进行改造:向器官    (填“供体”或“受体”)基因组中导入某种调节因子,以抑制    (抗原或抗体)决定基因的表达,或设法除去该基因,再结合    技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因动物器官.
            • 5. 如图是试管牛及牛胚胎分割示意图,请据图回答问题:

              (1)为了获得足够多的1,需要给供体母牛进行    处理,采集到1后要培养到    期才具备与获能精子受精的能力.
              (2)判断1是否受精的依据    
              (3)进行胚胎分割时,应选择发育到    时期的胚进行操作.在分割得到3、4时,应注意对    均分,以免影响胚胎的恢复和进一步发育.要鉴定分割胚的性别,可取    的细胞进行DNA鉴定.
              (4)获得试管牛的最后一道工序是    
              (5)科学家成功地将人体皮肤细胞改造成可以分化为多种细胞的“ES”经体外诱导分化,可以培育出人造组织器官,这样培育的特殊细胞或器官移回病人体内与异体器官移植相比,最大的优点是    
            • 6. (2016春•唐山校级期中)如图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图.请回答:
              (1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至    期的内细胞团或胎儿的    中分离得到的一类细胞.
              (2)图中分化程度最低的干细胞是    .在体外培养条件下,培养液中加入    因子,可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化.
              (3)在机体内,皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因    的结果.
              (4)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的,骨髓的治疗的实质是将上图的    细胞移植到患者体内.
              (5)若要克隆某种哺乳动物,从理论上分析,上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的    ,其原因是    
              (6)若某药物可抑制肝肿瘤细胞NDA的复制,使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的    期.
              (7)在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段,用    细胞与骨髓细胞融合,经多交筛选最终得到能分泌    的杂交瘤细胞.
            • 7. 日前,英国研究人员利用最新的3D打印技术,“打印”出了活体胚胎干细胞.实验证明,这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力.科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞,在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎,进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞.请回答:
              (1)自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或    中分离出来的一类细胞.
              (2)上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有        .胚胎干细胞在形态上表现为体积小,细胞核大,    明显,在功能上具有    
              (3)将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变,在分子水平上需要采用    技术.
              (4)若选用囊胚进行胚胎分割,要注意对其    做到均等分割.
              (5)胚胎移植是否成功,与供体和受体的生理状况有关.在胚胎移植操作中,应对供体和受体母畜进行    处理才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致.
            • 8. 如图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图.请回答:

              (1)胚胎干细胞可以从动物胚胎发育至 期的内细胞团中分离得到.
              (2)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的.骨髓移植的实质是将图中 细胞移植到患者体内.与异体移植相比,胚胎干细胞培育出的细胞移植最大的优点是 .
              (3)在制备单克隆抗体过程中,用B淋巴细胞与 融合,因为B淋巴细胞可以 ,而与其融合的细胞在体外可以 ,经多次筛选融合后的细胞,最终得到能分泌 的杂交瘤细胞.
              (4)在动物细胞培养时,通常在 条件下保存细胞.
            • 9.

              ( 8 分)下图 1 表示的是科学家把 4 个与胚胎发育相关的特异性基因导入成年小鼠细胞,培养出了诱导多潜能干细胞,称为 iPS 细胞,类似于胚胎干细胞样细胞,再将 iPS 细胞转入小鼠乙体内培养,结果如图所示。图 2 表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的一种方法。请分析并回答下列问题:

              (1)胚胎干细胞在形态上,表现为      ;在功能上,具有      

              (2)克隆培养iPS细胞时,为了防止杂菌感染,需在培养液中加入一定量的      。早期研究发现在 iPS 细胞诱导培养的过程中会出现大量不具备干细胞功能的细胞,若用维生素C处理,能显著提高iPS细胞的诱导成功率,推测其原因可能是      

              (3)研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内,细胞团能继续生长。由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是      

              (4)图2中,研究人员需要对实验小鼠丙注射      使其超数排卵,从而获得更多的卵母细胞,再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞,并在体外培养至[④]      期,再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞。

              (5)研究发现,单倍体胚胎干细胞也能分化,形成不同功能的细胞、组织和器官,该技术培育的单倍体动物可成为研究      (“显性”或“隐性”)基因功能的理想细胞模型。

            • 10. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 ______ (结构).
              (2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的 ______ 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
              (3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
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