ES细胞(胚胎干细胞）在基础生物学、畜牧学和医学上有十分重要的应用价值。请回答下列问题：

（1）ES细胞在体外培养时，可以增殖而不发生分化。在ES细胞培养液中加入分化诱导因子___________(只填一种即可)时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。

（2）将人的ES细胞进行细胞培养时，要用__________酶分散细胞，制成细胞悬液，放入培养瓶中进行培养。使用合成培养基进行细胞培养时，通常需要加入_____________等天然成分。在细胞培养过程中，ES细胞主要通过_______________的方式进行细胞增殖。

（3）将来源于两种不同哺乳动物的两个ES细胞进行细胞融合，常用的生物诱导因素是____________，经融合后所形成的细胞被称为__________。动物细胞融合技术的意义在于__________________。

［生物一选修3：现代生物科技专题］

    现代生物科技不断发展，在治疗人类疾病方面发挥着越来越重要的作用。请回答下列相关问题：

    (1)囊性纤维病是一种遗传病，科学家们设计出基因治疗方法，利用经过修饰的腺病毒作为________，将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者的肺组织中，这种直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法叫作________________。

    (2)胰岛素是治疗糖尿病的有效药，天然胰岛素注射后会堆积在皮下，需较长时问才能进入血液，科学家利用______________技术对胰岛素进行改造使其成为速效药，提高了胰岛素的治疗效果。

    (3)单克隆抗体的出现能有效解决传统抗体产量低、特异性差的问题。在其制备过程中，需要进行两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出________________；如果将抗癌细胞的单克隆抗体与化学药物结合制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的________作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。

    (4)ES细胞的形态特征有_____________________________，功能上具有___________________。ES细胞可以治疗由于细胞坏死、退化和功能异常引起的人类疾病，如帕金森综合征，利用ES细胞可以被____________形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化部位得以修复。

科学家从哺乳动物早期胚胎中分离出一类胚胎干细胞(ES细胞)，并进一步将ES细胞诱导分化为某些组织细胞。回答下列问题：

(1)胚胎干细胞(ES细胞)可由囊胚的__________________________分离培养获得，其可产生多种多样的细胞的根本原因是__________________。

(2)获得的动物细胞进行培养时，一般需控制在10代以内，原因是__________________________。

(3)离体培养胚胎干细胞时，一般需要在合成培养基中加入____________等天然成分，培养时所需的气体主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是______________。

(4)研究发现，细胞因子能够调控某动物干细胞分化。放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的功能进而抑制细胞因子的调控，由此推断该抑制过程发生在____________(填"复制""转录"或"翻译")水平。

(5)研究还发现，胚胎干细胞可以诱导分化为造血干细胞等各种细胞，这体现了胚胎干细胞具有__________________的特点，临床上可用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官，从而解决______________问题。

请回答胚胎工程方面的问题：

（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、___________、__________以及在母体中发育和产出等过程。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行_________处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至_________ 期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和______________。

（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，利用____________________激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，从而获得多枚胚胎。再通过胚胎移植及胚胎分割可大大提升供体的繁育能力。进行胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的_____________。对胚胎进行分割时，要特别注意将________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。

(4) 胚胎干细胞可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，因此具有极高的应用价值。通常胚胎干细胞可以从________________或__________________中分离得到。

I:下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：

（1）玫瑰精油适合用_________________法提取，其理由是玫瑰精油_________________________。蒸馏时收集的蒸馏液__________ （是、不是）纯的玫瑰精油。

（2）蒸馏瓶中的水和原料量比例为_________，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有_________________和____________________。

（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会__________，原因是_____________________。

II:Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：

（1）步骤①中所选的卵母细胞应处于______________期。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其______________分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为____________________的特点。

（3）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的____________________。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成____________________，利用______________技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_______________________酶的酶切位点。

（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________________________________。

I.下图为哺乳动物胚胎分割和性别鉴定示意图。请据图回答：

(1)胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的_____________。对胚胎进行分割时，要特别注意将________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。

(2)通常胚胎干细胞可以从_____________________________________(写出两种方法)中分离得到。

Ⅱ.请回答胚胎工程方面的问题：

（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、___________、__________以及在母体中发育和产出等过程。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其_________。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和______________。

（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是____________________。

克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了疾病克隆性治疗的基础又解决了器官移植中供体不足的问题,同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题．下图为人类对克隆羊技术的拓展图和应用。请据图回答问题。

（1）图中所涉及的现代生物技术有__________________________________                 等。

（2）下列有关胚胎移植的叙述正确的有（多选）（    ）

 A．冲卵指的是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子

 B．只有供、受体生理环境高度一致，移入受体的胚胎才能被接受，并继续发育

 C．供体和受体要进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应

 D．不同动物其胚胎移植的时间不同，人的胚胎移植最好在四细胞阶段进行

（3）图中两个婴儿长大后，外貌、性格和其他特征与原型男人相同，这说明__________具有全能性。

（4）使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入___________________等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需要保证细胞生活所需的____________等 ；早期胚胎发育在___________阶段以前的细胞是全能细胞。

（5）图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，必须用_____________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。干细胞形成组织、器官时必须要进行细胞的分裂和分化。

（6）在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官？为什么？________________________。

【现代生物科技专题】

1978年世界上第一个试管婴儿在英国诞生，被称为人类医学史上的奇迹。试管婴儿的成功和发展，不仅给不孕不育夫妇带来了希望，而且对研究人类的生殖生育和胚胎发生学以及优生学等方面的课题，有不可估量的积极作用。

（1）试管婴儿是通俗名称，在现代生物技术中应用了          、          等技术手段。

（2）精子和卵子是在体外进行结合的，受精前精子需要事先经过        处理，卵子要培养到           （时期）。人的受精卵通过卵裂，逐渐形成大量形态、功能不同的细胞、组织，并进而形成器官和系统，卵裂的分裂方式是                     。

（3）将胚胎移植到子宫腔内时应在胚胎发育的              期。实验室也可从早期胚胎中分离出ES细胞，其形态上的特点是                          。

（4）“试管婴儿”技术诞生后，继而出现了“设计试管婴儿”技术，后者                                                                                。

科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图1：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的                        。

（2）将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为                                              。

（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的                        。构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取                      作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶的组合为                      。

（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发                     色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否导入受体细胞，可以采用                      方法检测。