知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．
科学家通过Lazl基因的异位表达，在体内将小鼠胚胎干细胞同时诱导出了游动的精子和卵子．请回答：

（1）胚胎干细胞可来源于囊胚期的______或胎儿的原始性腺．其在体外培养能不断增殖、自我更新，在功能上具有发育的______．

（2）胚胎干细胞的培养和诱导等操作均需在严格的_______环境条件下操作，且配制的合成培养液通常需要加入________等一些天然成分，还要向培养液中通入一定量的氧气和二氧化碳，氧气参与细胞代谢，二氧化碳可以维持培养基的_______．

（3）若将诱导的精子和卵子进行体外受精，对精子进行获能处理的常用方法是________和________．判断哺乳动物的卵子已经受精的重要标志是在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到________．

（4）将早期胚胎分割、移植可获得多个同卵胚胎，这属于动物的_____生殖，胚胎分割时要将_______均等分割．

难度：较易

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2．
科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为_________；培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为_______。

（2）图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为__________；也可从灰鼠体内取出卵子，通过_____________后进行早期胚胎培养获得。

（3）图中重组囊胚通过____________技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用_________方法保存。

（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的______________分离培养获得，iPS与ES细胞同样具有发育的_______性，有望在对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的细胞治疗。

难度：中等

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3．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如下图1：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的______．
（2）将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为______．
（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的______．构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取______作为引物．对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶的组合为______．
（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发______色荧光的细胞进行体外诱导．为检测干扰素基因是否表达，可以采用______的方法．

难度：较难

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4．
“二娃”政策实施后，一些高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎：

（1）要使精子和卵细胞在体外成功融合，首先须采集到成熟的卵细胞，最常用的方法是卵巢经过超数排卵处理后，使用超声监视器确定卵泡的位置，插入穿刺针吸取卵泡液，取出_____，在体外进行人工培养至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和______。为了达到超数排卵目的，常使用的激素是_____。同时对于男方提供的精子，须经系列处理与培养，以达到______状态。受精卵形成后，经人工培养至_____阶段，借助胚胎移植技术回输至女方体内，经过自然孕育，即得试管婴儿。

（2）胚胎干细胞研究发展前景诱人，它具有发育全能性和二倍体核型。培养胚胎干细胞的培养基中，必须加入无机盐、有机盐、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及______等物质。

难度：较易

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5．
Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的 ______ （结构）．
（2）步骤③中，需要构建含有Rag₂基因的表达载体．可以根据Rag₂基因的 ______ 设计引物，利用PCR技术扩增Rag₂基因片段．用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段．为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点．
（3）为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ，用抗Rag₂蛋白的抗体进行杂交实验．

难度：较易

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