【生物——选修1：生物技术实践】

请回答下列与苹果酒和苹果醋制作相关的问题：

（1）制作苹果酒过程中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物难以存活，是因为发酵液中的环境条件是________。

（2）图所示装置的充气口在制作苹果酒过程中，应该________，在制作苹果醋的过程中，应该________。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是________。

（3）利用苹果酒制作苹果醋，应如何控制温度：________。

（4）制作苹果醋的过程中，使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得，图所示操作是利用________法进行接种，在操作过程中应注意的事项有下列哪几项________（填序号）。

①每次划线前和结束时都需要灼烧接种环；②灼烧接种环后，待其冷却后再划线；③第二次及以后的划线，要从上一次划线的末端开始划线；④最后一次划线不能和首次划的线相接触。

（5）分离纯化获得菌种后，可采用________的方法长期保存菌种。

苹果醋具有营养丰富，增强机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下图1，请分析回答：

             图1                                图2

(1)过程甲中发酵温度控制在18℃～25℃，经过10～12天后，样液中是否产生酒精，可以用            来检验。

(2)利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是                          。

(3)过程乙中使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得，下图操作是分离纯化过程中利用__________法进行接种，在操作过程中应注意的事项有下列哪几项____________（填序号）。

①每次划线前和结束时都需要灼烧接种环；②灼烧接种环后，待其冷却后再划线；③第二次及以后的划线，要从上一次划线的末端划线；④最后一次划线不能和首次划的线相接触。

(4)为了保持菌种的纯净，对于长期需要保存的菌种，可以采用            的方法。

(5)某同学尝试自己利用图2装置制果醋，制作过程中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是                           。

植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。刚果红（CR溶液）可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用含有CR的培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈 。

为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了如下培养基（成分见下表）：注：“+”表示有，“－”表示无。

[生物一选修1：生物技术实践】

图示为稀释涂布平板法的操作流程。请回答下列问题：

   (1)实验室获得纯净培养物的关键是________________________。

   (2)图示流程的主要操作包括________________和________________。

   (3)一般选择菌落数在__________的平板进行计数，结果比较准确。

   (4)当培养基中纤维素成为唯一碳源时，可筛选出________________。要证明其有选择作用，可以用______________________作对照，比较菌落目：还可以在培养基中加入刚果红染料，如果_____________________，也证明其选择作用。

[生物——选修1：生物技术实践]

（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选________________，这种培养基属于________________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的______________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_____________。

（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________________的培养液，接入新的培养液中连续培养。

（4）转为固体培养时，常采用________________________法接种，获得单菌落后继续筛选。

（5）若研究“目的菌”的生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用________________的方法进行计数，以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，绘制生长曲线。

（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____________________________处理后，才能倒掉。

硅酸盐细菌可以将土壤中不溶性的含钾矿物(如长石、云母)以及磷灰石等分解转化，释放出水溶性的钾、磷，将土壤中的无效磷钾转化为速效养分。现代工业可将硅酸盐细菌制成细菌肥料，达到增产目的。硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基以及硅酸盐细菌培养基上均能生长，下表1是硅酸盐细菌培养基的一种配方。答下列问题：

（1）根据硅酸盐细菌培养基的配方可知，从功能上看，该培养基属于______培养基，原因是____________________________。

（2）培养硅酸盐细菌时必须进行无菌操作。培养基的灭菌一般采用__________法。配制培养基时，灭菌与调节pH的先后顺序是_________________。

（3）表2的名称是____________，在进行接种时，所有的操作都应在_________附近进行。在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是_______________。

（4）在进行表2所示实验的同时也设置了空白对照，空白对照的培养基中__________，说明培养基灭菌合格；根据表2数据可以得出，用__________培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好。

1．生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物（秸秆）生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维索分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。请分析回答下列问题：

（1）最好选择       环境采集土样。

（2）配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行       ，接种前要进行       。

在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板       放置，这样做的目的是       。

（3）以下是A、B两种培养基配方：

A培养基配方：

B培养基配方：

如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌，应选择   （填编号）培养基配方，从功能看该培养基属于___   ____培养基。该培养基能增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是                  。

（4）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入       ，将筛选获得的菌液稀释后用      法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生     的菌落作为菌种进行扩大培养。

（5）乙醇是酵母菌的发酵产物，发酵时酵母菌直接利用的物质是               。

2.科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下列问题：

（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体的过程中，促进动物细胞融合常用的诱导剂是       ，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用           处理。

（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是       ，第2次筛选的目的是           。

（3）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答下列问题：

①．酶A是指       ，酶B是指       。

②．对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是         ；题目中Ⅱ所指的细胞是       ，Ⅲ所9指的细胞具有的特点是           。

（4）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：（图中·和▲代表细胞核，○代表细胞质）

我国家电研究院的洗衣机专家指出，洗衣机内部的环境非常潮湿，洗衣机使用时间越长，内部滋生微生物的机会就越大。看似干净的洗衣机其实内部隐藏着一个健康的隐形杀手。某生物兴趣小组的同学，利用内桶背面的污垢进行了相关实验。下图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。

（1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，该操作称为           ，若用该培养基培养洗衣机中滋生的细菌时，除考虑各种营养条件外，还要考虑          和渗透压等条件（至少写两个）。

（2）图2是平板划线法接种操作示意图，操作顺序是A→B→             （用字母和箭头表示）；以上操作中存在错误的步骤是              （用字母表示）。

（3）在培养洗衣机中细菌的实验中，应在接种前检测固体培养基是否被污染，具体检测的方法是                                       。

（4）将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置,原因是                     。

（5）在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0．lml菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为       。经一段时间培养后，该同学统计发现该培养皿中共有57个菌落（如图3），他得出的结论是0．lml菌液中有57个细菌，你认为他的判断是否正确并说明原因                                                     。              

（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，此目的是             。

【生物------选修1：生物技术实践】

下图表示葡萄酒酿制的简单过程，请据图分析：

（1）从上图可知，甲图是为了使酵母菌进行　　　　，以增加酵母菌的数量，乙图是为了使酵母菌发酵获得葡萄酒。可以用　　　　试剂检验是否有酒精生成。喝剩的葡萄酒放置一段时间后常因混入醋酸菌而变酸，原因是（用化学反应式表示）　　　　　　　　　，但含有抗生素的葡萄酒不变酸，原因是　　 　　　　　　。

（2）从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌时，最常用的接种方法有稀释涂布平板法和_______两种。接种后，培养基上会出现一些分别由一个酵母菌繁殖而成的　　　　（群落、种群）。

（3）为了分离出优良的酵母菌种，需要制备　　　　培养基；若需长期保存菌种，可采取的方法是　　　　。 

图示为稀释涂布平板法的操作流程。请回答下列问题：

(1)实验室获得纯净培养物的关键是________。

(2)图示流程的主要操作包括________和________。

(3)一般选择菌落数在________的平板进行计数，结果比较准确。

(4)当培养基中纤维素成为唯一碳源时，可筛选出________。要证明其有选择作用，可以用________作对照，比较菌落数目；还可以在培养基中加入刚果红染料，如果________，也证明其选择作用。