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            • 1． 普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）．

              （1）图甲中，过程①需要的酶有    ．为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以    作为唯一碳源．②、③过程需重复几次，目的是    ．
              （2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是    ；推测该同学接种时可能的操作失误是    ．
              （3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种菌的发酵罐需要先排气，其原因是    ．
              难度：中等
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            • 2． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO41.4g
              Na2HPO42.1g
              MgSO4•7H2O0.2g
              葡萄糖10g
              尿素1g
              琼脂15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？    ，理由是    ．
              （2）培养基中氮源是    ，这种培养基在功能上属于    培养基，目的是只允许能合成    的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用    法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入    ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是    法．
              难度：较难
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            • 3． 运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题．

              （1）自古酒就与人类生活息息相关．在图甲所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验，若在A装置的通气口补充无菌空气，那么一段时间后，能获得葡萄酒的是    装置，发酵是否成功可用    对发酵产物进行检验确认．
              （2）图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图．点加提取样品的是    点，点加标准样品的是    点，该鉴定实验的方法叫做    ．
              （3）微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，则可用含    的培养基；后期进行菌落统计时，一般选择菌落数在    间的平板进行计数．
              （4）与微生物培养相比，植物组织培养的培养基常需添加的植物激素是    ．
              难度：较难
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            • 4． 利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β━紫罗酮的培养基上生长．菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色．图甲为选育及提取获得β━胡萝卜素流程．

              （1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是    ．
              （2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供    ；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加    ．
              （3）进行③过程时，应选取    色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复    （填图甲中数字）过程．
              （4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是    ；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是    ．
              （5）过程⑥是    ，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量    ，提取的色素少．
              难度：中等
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            • 5． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行    处理．
              （2）要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中的培养基应具有的特点是：在     的培养基中加入    ．
              （3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    ．
              （4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是    ，有透明带菌落利用的氮源主要是    ，据此可筛选出目的菌．
              （5）若实验接种时用的是稀释涂布平板法，在统计菌落数目时得到4个平板，统计的数目分别为21、213、257、278，则对数据处理后取平均值计数为    ，该方法往往比活菌的实际数目偏    （高/低）．
              难度：中等
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            • 6． 胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

              （1）筛选产胡萝卜素的酵母菌菌R时，可选用    或平板划线法接种．采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是    ．
              （2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供    和    ．
              （3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好    和    以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用    方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是    ．
              （4）纸层析法可用于鉴定所提取胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为    ．
              难度：中等
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            • 7． 某小组同学为了调查垃圾处理场附近土壤中细菌污染情况，做了包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数等系列实验操作，请回答与此实验相关的问题．
              （1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了    和    ．
              （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是    ．
              （3）将取自不同区域的土壤浸出液分别稀释涂布到不同的平板上，置于37℃    培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明土壤样品中有    种细菌．一般说来，菌落总数越多，土壤遭受细菌污染的程度越    ．
              （4）如果要分离土壤中的纤维素分解菌，经常用     的选择培养基，若要鉴别是否分离出了纤维素分解菌则应使用加入了    的鉴别培养基．
              难度：较难
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            • 8． 急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素是幽门螺杆菌（Hp）感染．在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养．基本步骤如下：配制培养基→倒平板→X→培养→观察．
              请回答：
              （1）如图表示用    的方法将聚集的菌种分散到培养基的表面．

              （2）在配制培养基时，依据Hp的特殊营养要求要加入尿素，是因为Hp能以尿素作为    ．配制培养基过程包括原料称重溶解、    、灭菌等步骤．
              （3）步骤X表示    ．在培养时，需将培养皿倒置并放在    中．若不倒置培养，将导致    ．
              （4）要分离出Hp产生的某种蛋白或扩增Hp的DNA用于研究，最常用的手段分别是    法和    技术．
              难度：较难
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            • 9． （2016•南昌校级二模）请回答下列有关问题：
              （1）微生物培养中的无菌技术主要包括    ．
              （2）如图为倒平板操作过程，操作时要待培养基    时，在    附近进行．制备固体培养基时，要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要目的是    ．
              （3）生产中通常用葡萄作原材料制作果汁、果酒及果醋．
              ①果醋的制作需要醋酸菌．醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动．当氧气充足、缺少糖源时醋酸菌将乙醇变为    ，再进一步转变为    
              ②果胶酶能够提高葡萄的出汁率并使浑浊的果汁变得澄清，其原因是    ．
              ③从发酵条件看，果酒和果醋的制作过程的不同之处主要是    ．
              难度：较难
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            • 10． 回答下列问题：
              （1）微生物所需的营养成分一般包括    、    、水和无机盐．
              （2）培养微生物时，除考虑微生物生长所需的营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、    以及是否需要O2等．
              （3）对培养基进行灭菌时，多采用    法，而对接种环或涂布器灭菌时则用    法．
              （4）平板划线时，为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始，所以每次划线前都要    ，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线    ．
              （5）脲酶可以将尿素分解为NH3，从而使尿素溶液pH升高，这可用    试剂来检验．
              难度：中等
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