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          50条信息

            • 1.

              获得目的基因之后,利用PCR技术可在短时间内大量扩增目的基因。请回答:

              (1)PCR技术是利用____________________的原理,需要目的基因、引物、四种脱氧核糖核苷酸、__________________________和一定的缓冲溶液等。

              (2)PCR与细胞内相应过程的不同之处主要表现在温度控制方面,在PCR中先用90-95℃左右高温处理的目的是_____________________________,而这一过程在细胞内是通过_____________________酶的催化作用实现的。

              (3)在PCR技术中扩增目的基因的前提,是要有一段已知_____________________序列,以便根据这一序列合成引物。

            • 2.

              研究人员将人工丝蛋白基因导入蚕卵内,对蚕卵的基因改造获得成功。含有人工丝蛋白的蚕茧发出绿色荧光,比正常的蚕茧更加轻薄,请回答下列问题:

              (1)将人工丝蛋白基因导入蚕卵体内常用的方法是_______________________。

              (2) 绿色荧光蛋白基因可作为标记基因,用于鉴别和筛选蚕卵中是否含有人工丝蛋白基因。

              (3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR技术的原理是_____,该PCR反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液(含Mg2+)、水、____、  _____、___________Taq酶和引物。

              (4)生物反应器培养家蚕细胞时会产生接触抑制,所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以通过________来增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。

            • 3. 基因工程自20世纪70年代兴起后,发展迅猛,成果显著。
              Ⅰ利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是          。在用表达载体转化大肠杆菌时,常用   处理大肠杆菌,以利于表达载体进入;为了检测胰岛素基因是否转录出了 mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与 mRNA杂交,该杂交技术称为        。为了检测胰岛素基因转录的 mRNA是否翻译成蛋白质,常用_______________技术。
              Ⅱ近10年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,下图为PCR原理示意图,据图回答问题。
              (1)基因工程中,利用PCR技术来__________,PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制,生物体内也能完成DNA的复制,但有所不同,图中A过程称为____________,在生物体内需要___________才能完成。图中B过程的完成需要_____________________________等条件。
              (2)若DNA样品的长度为100个碱基对,且A占15%,则完成三次循环,共需要提供的胞嘧啶脱氧核苷酸___________个。
            • 4.

              下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答:

              (1)在基因工程中,A→B为       技术。利用的原理是_______,其中a为受热变性(解旋)的过程,其中b过程使用的酶是___________ 

              (2)B→C为转基因绵羊的培育过程,c过程用到的生物技术主要有动物细胞培养和__________________技术。在动物细胞培养过程中,需让培养液中含有一定量的CO2,其主要作用是  _________________________     

              (3)B→D为抗虫棉的培育过程,其中d过程常用的方法是  _______        。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作。请写出在个体水平上的鉴定过程       _ _______   _____ _______     

            • 5.

              PCR技术是利用DNA复制的原理,将某一DNA分子片段在实验条件下,合成许多相同片段的一种方法。利用这种技术能快速而特异性的扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段,“人类基因组计划”的研究中常用这种技术。请结合相关知识,回答有关此技术的一些问题:


              (1)PCR技术能将某一DNA分子扩增成许多相同的DNA片段,原因是:①DNA分子的_______________结构为复制提供了精确的模板;②DNA复制时遵循的_______________原则,保证了复制准确无误地进行。

              (2)在实验条件下,DNA分子进行扩增,除了需要扩增的DNA片段外,还需要_________、____________和_____________等条件。

              (3)某一DNA分子片段含有80对碱基,其中腺嘌呤有35个,若让该DNA分子扩增三次(即复制三次)至少需要鸟嘌呤脱氧核苷酸的数目是______________个。

              (4)用32P标记的一个DNA分子的两条链,让该DNA分子在P的培养液中连续扩增三次,所得DNA分子中含31P的脱氧核苷酸链与含32P脱氧核苷酸链数之比是__________。

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