知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：
Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶
（1）PCR扩增bglB基因时，选用 ______ 基因组DNA作模板．
（2）图1为质粒限制酶酶切图谱．bglB基因不含图中限制酶识别序列．为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 ______ 和 ______ 不同限制酶的识别序列．
（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 ______ ．
Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

（4）据图2、3可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会 ______ ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 ______ （单选）．
A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率．经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因．
（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 ______ （多选）．
A．仅针对bglB基因进行诱变 B．bglB基因产生了定向突变
C．bglB基因可快速累积突变 D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变．

难度：较易

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2．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力．再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图．

据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是 ______ ．
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 ______ 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志．
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 ______ ．原生质体经过 ______ 再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织．
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 ______ 植株的根尖，通过 ______ 、 ______ 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目．
（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定．下图是用该引物对双亲及再生植株1-4进行PCR扩增的结果．据图判断，再生植株1-4中一定是杂种植株的有 ______ ．

（6）对杂种植株进行 ______ 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株．

难度：较易

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3．家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）进行转基因操作前，需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ 和 ______ 之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的分子检测方法有 ______ 、 ______ ．
（3）通过PCR技术可大量获取目的基因．PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ 和 ______ ．
（4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以 ______ ，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的 ______ 原理．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的 ______ 原理．

难度：较易

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4．一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）男性患儿．在他们欲生育第二胎时，医生为该对夫妇实施了体外受精和产前基因诊断．请回答：
（1）为了获得更多的卵子用于体外受精时，可考虑注射 ______ ．
（2）为了使产前基因诊断结果更加明显，要先从胚胎细胞中提取物质 ______ 进行PCR扩增．PCR扩增前需要知道相关基因的核苷酸序列，以便 ______ ．PCR扩增过程需要高温（90℃-95℃）处理，目的是 ______ ；为适应这一处理过程的高温条件，因此需要加入 ______ ．
（3）PCR扩增后用特定 ______ 对扩增产物进行切割．已知正常基因内有一个该酶的切点，而致病基因没有．若胚胎基因型与父母一样，则切割后进行基因检测时应含有 ______ 种DNA片段．
（4）若胚胎基因型为显性纯合子且其哥哥配型相合，则可考虑由第二个孩子提供骨髓治疗其哥哥的镰刀型细胞贫血症．骨髓移植能用于治疗该病的原因是 ______ ．

难度：较易

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5．定点突变技术是指通过聚合酶链式反应（PCR）向目的基因片段中引入所需变化．GFP（绿色荧光蛋白）的发光基团是第65至67位的三个氨基酸（丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸），该发光基团可利用定点突变技术使第66位酪氨酸换成组氨酸，即可发出更明亮的蓝光，成为蓝色荧光蛋白．

（1）定点突变第一步得把突变位点设计在引物上，据图1中信息人工合成短DNA引物应包含的序列是 ______ ，突变位点一般设计在引物中间位置的理由是 ______ ，该定点突变技术是否成功的标志是 ______ ，该技术属于 ______ 工程的范畴．
（2）如下所示，如果要用PCR扩增以下DNA模板中的基因1（左），一位同学设计了一对引物如下（右），该设计不合理的理由是 ______ ．
5′------基因1------3′引物1 5′--AGATCT---3′
3′------基因1------5′引物2　5′--TCTAGA---3′
（3）如图2表示引物修正后PCR扩增目的基因（基因1）的第 ______ 轮循环的示意图．若再进行一轮循环，仅有基因1（含引物）的DNA片段有 ______ 个．

难度：较易

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6．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图．

请回答：
（1）①代表的是 ______ 过程．为获得A基因表达载体，需用 ______ 酶对A基因和运载体进行切割．将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是 ______ ．
（2）利用PCR技术扩增A基因时，设计引物序列的主要依据是 ______ ，加入引物的作用是 ______ ．
（3）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制 ______ 等条件．
（4）过程③采用的技术是 ______ ，获得的X叫 ______ 细胞．

难度：较易

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7．
[生物——选修模块3：现代生物科技专题]

图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活，请回答下列问题。

（1）基因工程中最常用的载体是________，而作为基因表达载体，除图1所示结构外，还需具有________。

（2）根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是________。

（3）如图2，如果要利用PCR扩增出目的基因，应选择引物________。PCR过程中，除了要加入足量的引物外，还需要加入________酶，DNA链的延伸一般需要的温度为________。

（4）如果要目的基因导入大肠杆菌，一般要用Ca²^＋溶液处理细菌，使其达到________，有利于吸收外源DNA。为了筛选含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加________。

难度：中等

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8．中国科学家成功将肝再生增强因子（hALR）的基因导入羊的乳腺上皮细胞中，再利用核移植技术培育出了转基因克隆羊，其乳汁含有hALR．回答下列问题：
（1）在体外，可通过PCR技术扩增hALR基因，该技术依据的原理是 ______ ．为了保证PCR反应的进行，反应体系需要加入耐高温 ______ 酶、模板DNA、dCTP、dATP、dGTP、dTTP、 ______ 等．
（2）将外源hALR基因导入乳腺上皮细胞常用的方法是 ______ ，检测其染色体上是否整合了hALR基因，可采用 ______ 技术；将乳腺上皮细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，对受体卵母细胞的处理是 ______ ．
（3）与转基因工程菌（大肠杆菌）相比，利用羊乳腺生产出的hALR有生物活性，其原因可能是 ______ ．

难度：较易

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9．（1）土壤中富含各种微生物，将其浸出液接种到特定培养基上，可得到酵母菌．这一过程叫做 ______ ；不同培养基的具体配方不同，但一般都含有 ______ 等营养物质．
（2）要统计土壤样品中某活菌的数目，宜采用 ______ 法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 ______ 就能大约推测出样品中的活菌数．
（3）制作果酒时，将酵母菌加入到葡萄汁中，控制好发酵条件，10d后得到散发着酒香的成品．请你指出此过程的原理是 ______ ．
（4）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度 ______ 的薄壁细胞，胚状体与 ______ 发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根．
（5）PCR中加入的引物有 ______ 种，其作用是 ______ ．

难度：中等

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10．生物技术的广泛应用给社会带来了较大的经济效益，受到了社会的广泛重视．请回答下列有关问题：
（1）制作泡菜时需要测定亚硝酸盐的含量，其方法是 ______ ．亚硝酸盐在特定的条件下会转变为 ______ ，引起生物致癌．引起细胞癌变的原因是环境中的致癌因子使细胞中的 ______ 发生 ______ ．
（2）1993年，美国科学家因发明了PCR技术面获得了诺贝尔化学奖．PCR技术和生物体内DNA的复制都必须的条件包括 ______ 、模板DNA、能量、游离的脱氧核苷酸和引物；在生物体内DNA复制所必需的，而在PCR技术中不需要的成分是 ______ ．
（3）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是 ______ ；实验结束后，使用过的培养基应该处理后再倒掉，这样做是为了 ______ ．

难度：较易

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