如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库         基因组文库（选填“大于”或“等于”或“小于”）。

（2）①过程提取的DNA需要         的切割。

（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用的技术是       ，其原理是                。该反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

（4）目的基因获取之后，需要进行基因表达载体的构建，基因表达载体的组成必须有_________             及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。

（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是           ，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是            ，可以用                技术进行检测。

下图表示某科学家利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的相关过程，据图回答下列问题：

（1）步骤①②利用的技术名称分别是                 、                     。图中造血干细胞中的遗传物质至少有         个来源。

（2）若利用PCR技术扩增目的基因并完成图示小鼠的基因治疗，涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和                  等。

（3）下图所示的一个质粒分子经EcoRⅠ切割前后，分别含有      、          个游离的磷酸基团。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，故利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取       作为引物。一个目的基因通过PCR技术扩增第n次时，需要        个引物。

（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发       色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否转录，可以采用                        的技术。

糖原贮积病是由于遗传性糖原代谢障碍，致使糖原在组织内过多沉积而引起的疾病，临床表现为低血糖等症状。下图1为人体糖代谢的部分途径。请分析回答：

（1）据图1可知，抑制葡萄糖激酶不仅制约糖原的合成，还会制约体内细胞的__________，使产能减少。

（2）I型糖原贮积病是6-磷酸葡萄糖酶基因（E）突变所致。血糖浓度低时，正常人体分泌                 （激素）增加，使血糖浓度恢复到正常水平；给I型糖原贮积病患者注射该激素_______（填“能”或“不能”）使血糖浓度恢复到正常水平。

（3）I型糖原贮积病是一种常染色体隐性遗传病，图2为某家族此病遗传情况家系图，在正常人中，杂合子概率为1/150。若Ⅱ-3与表现型正常的男性结婚后生育一个孩子，则患病概率约为____________。

（4）某新型糖原贮积病是由于磷酸酶基因（D）突变引起。经过家系调查绘出的家系遗传图与图2一致。研究者合成了两种探针，能分别与正常基因和突变基因相应的DNA序列互补。此探针在一定的杂交和洗脱条件下，只要有一个碱基不匹配，就不能形成稳定的杂交链而被洗脱。利用探针对该新型糖原贮积病家系进行检测，过程和结果如下图所示。

①体外扩增DNA时，解链的方法是___________________________。

②结合图2和图3分析：该新型糖原贮积病的遗传方式为X染色体隐性遗传病，做出此判断依据是该家系中_______个体DNA杂交检测的结果，其中I-1个体的基因型是                      。

③假如Ⅲ-1和男性患者结婚，生育的孩子患新型糖原贮积病的概率是                    。

重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板，通过多次PCR扩增，从而获得目的基因的方法。利用该技术可以实现基因的定点诱变（如图）。它在需要诱变的位置合成两个带有变异基因碱基的互补引物（如图的引物b和引物c），然后分别与引物a和引物d做PCR，这样得到的两个PCR产物分别带有变异碱基，并且彼此重叠，在重叠部位经重组PCR就能得到诱变的PCR产物（如图的突变产物AD）。请回答下列问题：

（1）PCR与体内DNA复制相比，不需要                酶参与。

（2）引物中（G+C）的含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性                   。

（3）图中获得产物AB和CD，必须将引物a、引物b和引物c、引物d置于不同反应系统中，这是因为                   。除图中所示外，在不同的反应体系中需要共同加入的物质是                 。 

（4）在引物a、引物b组成的反应系统和引物c、引物d组成的系统中均进行一次复制，共产生                 种双链DNA分子。

（5）图中获得产物AB，至少要经过                    轮循环，循环产物中含有引物a的DNA占有的比例为                         。

（1）根据家族病史，该病的遗传方式是                          ；母亲的基因型是         （用A、a表示）；若弟弟与人群中表现型正常的女性结婚，其子女患该病的概率为       （假设人群中致病基因频率为1/10，结果用分数表示）。

（2）检测发现，正常人体中的一种多肽链（由146个氨基酸组成）在患者体内为仅含45个氨基酸的异常多肽链。异常多肽链产生的根本原因是                  ，由此导致正常mRNA第         位密码子变为终止密码子。

（3）分子杂交技术可用于基因诊断，其基本过程是用标记的DNA单链探针与             进行杂交。若一种探针只能直接检测一种基因，对上述疾病进行产前基因诊断时，则需

要     种探针。若改致病基因转录的mRNA分子为“…ACUUAG…”，则基因探针序列为                  ；为制备大量探针，可利用            技术。

据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是           。过程②中PEG还可以用               等物理方法替代，全部过程用到的生物技术的原理是                         。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的                存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。原生质体经过            再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

（3）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和                 植株的根尖，通过解离、漂洗、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

（4）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有              。

(1)基因工程的核心步骤是                          ；构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶                          分别对含Ppc基因的DNA和质粒进行切割，再用             使其连接。构建的表达载体A除含有目的基因、标记基因外，还应有                              。

(2)欲在体外获得大量的Ppc基因，常采用          技术扩增，其中所用的酶的特点是                              。

(3)水稻组织细胞具有                   ，因此，可以利用

                          技术将导入Ppc基因的水稻组织细胞培养成植株。