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            • 1．

              下列关于生物学实验的描述，正确的是

              A．温度对酶活性影响的实验一般选用斐林试剂做指示剂
              B．向DNA浓盐溶液中缓慢加入蒸馏水并过滤之后弃去滤液
              C．PCR产物中加入二苯胺试剂后加热变蓝说明有目的DNA产生
              D．在家庭中用鲜葡萄制作果酒时酵母菌装置应放在30℃~35℃处
              难度：较易
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            • 2． 如图为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图．据图分析，下列说法正确的是（　　）
              A．催化①过程的酶是RNA聚合酶
              B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合
              C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温
              D．如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与G之和也占该DNA碱基含量的60%
              难度：较易
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            • 3．

              [生物——选修3：现代生物科技专题]

              基因工程在农业中的应用发展迅速，基因可导入农作物中，用于改良该农作物的性状。通过多重PCR技术可扩增并检测转基因农作物的外源基因成分。多重PCR是在一个PCR反应体系中加入多对引物，针对多个DNA模板或同一模板的不同区域，扩增多个目的基因的PCR技术。请回答：

              （1）我国科学家将Bt毒蛋白基因、鱼的抗冻蛋白基因、控制果实成熟的基因导入农作物，可获得     、     、延熟的转基因作物。

              （2）引物是根据      的一段核苷酸序列合成的，每种基因扩增需要一对引物的原因是                      。下表是A、B、C三种基因的引物，据表分析，引物特异性主要体现在                         。


              A基因

              引物1

              5′GCTCCTACAAATGCCATCATTGC3′

              引物2

              5′GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC3′

              B基因

              引物1

              5′TGAATCCTGTTGCCGGTCTT3′

              引物2

              5′AAATGTATAATTGCGGGACTCTAATC3′

              C基因

              引物1

              5′CCTTCATGTTCGGCGGTCTCG3′

              引物2

              5′GCGTCATGATCGGCTCGATG3′

                 

                （3）PCR过程中温度从90℃降到55-60℃的目的是                  。

              （4）检测人员通过多重PCR技术确定农作物中是否含有A、B、C三种转基因。将A、B、C三种基因和待测的农作物基因样品进行PCR，扩增后的产物再进行电泳，结果如图。据图分析：含有三种转基因的农作物是    ，判断依据是         。


              1为已知A、B、C三种基因对照，2、3、4为待测农作物样品


                （5）与PCR技术相比，多重PCR技术的优势是

              难度：难
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            • 4． 家蚕细胞具有高效表达外源基因能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
              （1）进行转基因操作前，需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞．
              （2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ 和 ______ 之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的分子检测方法有 ______ 、 ______ ．
              （3）通过PCR技术可大量获取目的基因．PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ 和 ______ ．
              （4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以 ______ ，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．
              （5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的 ______ 原理．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的 ______ 原理．
              难度：较易
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            • 5． 一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）男性患儿．在他们欲生育第二胎时，医生为该对夫妇实施了体外受精和产前基因诊断．请回答：
              （1）为了获得更多的卵子用于体外受精时，可考虑注射 ______ ．
              （2）为了使产前基因诊断结果更加明显，要先从胚胎细胞中提取物质 ______ 进行PCR扩增．PCR扩增前需要知道相关基因的核苷酸序列，以便 ______ ．PCR扩增过程需要高温（90℃-95℃）处理，目的是 ______ ；为适应这一处理过程的高温条件，因此需要加入 ______ ．
              （3）PCR扩增后用特定 ______ 对扩增产物进行切割．已知正常基因内有一个该酶的切点，而致病基因没有．若胚胎基因型与父母一样，则切割后进行基因检测时应含有 ______ 种DNA片段．
              （4）若胚胎基因型为显性纯合子且其哥哥配型相合，则可考虑由第二个孩子提供骨髓治疗其哥哥的镰刀型细胞贫血症．骨髓移植能用于治疗该病的原因是 ______ ．
              难度：较易
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            • 6． 如图为真核细胞DNA复制过程示意图．下列有关DNA复制与PCR比较的叙述中，错误的是（　　）
              A．图中酶1的主要作用是断开氢键，PCR也需要酶1
              B．复制完成后子链与母链等长，但PCR子链与母链可能不等长
              C．DNA复制过程需要引物，PCR一般需要两种不同的引物
              D．DNA复制是边解旋边复制，PCR是完全解旋后再进行复制
              难度：较难
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            • 7． 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图．

              请回答：
              （1）①代表的是 ______ 过程．为获得A基因表达载体，需用 ______ 酶对A基因和运载体进行切割．将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是 ______ ．
              （2）利用PCR技术扩增A基因时，设计引物序列的主要依据是 ______ ，加入引物的作用是 ______ ．
              （3）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制 ______ 等条件．
              （4）过程③采用的技术是 ______ ，获得的X叫 ______  细胞．
              难度：较易
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            • 8．

              【生物——选修3：现代生物科技专题】

              下图表示中国科研人员对树鼩精原干细胞进行遗传修饰后，通过自然交配获得世界首只转基因树鼩的过程。请回答下列问题：

              (1)培养精原干细胞时，定期更换培养液的目的是防止_______________对自身细胞代谢造成障碍，通入二氧化碳的作用是___________________________。

              (2)图中涉及的基因工程的核心步骤是____________，通常采用________技术将GFP基因导入树鼩精原干细胞。

              (3)利用PCR技术扩增GFP基因需要_______酶，外源的GFP基因能在树鼩体内表达的原因是______________。

              (4)图示过程与通过体外受精培育转基因动物相比，避免了将受精卵移入______中继续培养的麻烦，同时也克服了胚胎发育到________时期进行胚胎移植的难题。

              难度：中等
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            • 9． （12分） PCR技术有效地 解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种Taq DNA聚合酶。请回答有关问题：

              （1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用__________。

              （2）Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。

              ①Taq DNA聚合酶的功能是催化脱氧核苷酸之间形成____________________。

              ②Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用________法和__________法进行分离。

              （3）相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。

              ①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是____________、_____________。

              ②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？为什么？__________________。

              （4）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在________________中才能进行，并且要严格控制________条件。

              （5）PCR中加入的引物有____________种，加入引物的作用是作为______________________的起点。

              难度：较难
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            • 10． 下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（　　）
              A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
              B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
              C．基因工程的基本工具是：限制性内切酶、DNA连接酶
              D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
              难度：较易
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