[生物——选修1：生物技术实践]

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用__________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用_________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶分微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以___________为碳源的固体培养基进行培养。

（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用__________法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_________℃设计后续实验。

【生物——现代生物科技专题】

人的血清蛋白有广泛的药用价值，科学家通过培育乳腺生物反应器生产人血清白蛋白，流程如下：

(1)在基因工程中，①被称为__________________。若①因数量少而不能满足生产需要，常利用___________________技术进行扩增。

(2)②应该取自__________(雄性或雌性)荷斯坦奶牛，由②到③的过程中，需将②用_____________处理后进行培养。

(3)从③到④的过程中，用于核移植的供体细胞③一般都选用传代10代以内的细胞，原因是______________；作为受体细胞的卵母细胞需培养至____________期；形成④时常通过______________(物理方法)进行激活，使其完成分裂和发育进程。

(4)④培养至⑤后，可通过___________技术获得多个⑥，从而提高胚胎的利用率。胚胎移植的实质是___________________________________________________。

下面是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答:

（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技术有               和                。

（2）用激素处理的目的是使B牛                ，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到        (时期)才能与精子结合。

（3）A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫          。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到          。

（4）生产上常用             期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体，可以使用           技术。

下图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题：

（1）在Ⅰ图制备单克隆抗体的过程，包括__________和动物细胞培养两个过程，在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用___________处理，以使其分散成单个细胞，制备成细胞悬液。

（2）A细胞的特点是__________，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行_________和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养。

（3）单克隆抗体与常规抗体相比，具有___________的特点。

（4）Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是_________。

（5）若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对Ⅱ中囊胚进行__________，操作过程需要特别注意的问题是：_________。否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用                               技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

（2）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ→Ⅲ过程中的筛选常用                         方法来筛选出导入成功的受体细胞，Ⅲ代表的细胞具有                                                                                              的特点。

（3）在抗虫棉培育过程中，为了防止基因污染通常在④过程中将目的基因导入受体细胞的叶绿体中，⑤过程采用的技术是                                        ，在此过程中需通过调控                                                              两种

请回答有关下图的问题：

                                                                        图1                                                                                                      图2

(1)图1中①～⑤所示的生物工程称为蛋白质工程。该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对________的修饰或合成，对现有蛋白质进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。

(2)图1中④所示过程叫作________，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是________(请将模板链上的碱基写在前面)。

(3)如图2所示为一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]________；图中[3]________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图2中序号[1]代表的是乳腺蛋白基因的________；且在图1中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体______的精子。

(5)为获得较多的受精卵进行研究，图1中⑥过程一般用激素对供体做________处理；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对供、受体动物做________处理。若图1中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养，到________期方能进行受精。

(6)用________技术处理发育到________期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，则要注意将________均等分割。

下图是科学家研究良种奶牛快速繁殖的过程示意图。

请据图回答下列问题：

（1）克隆牛G的性别是         。

（2）从良种公牛A采集的精子，需经               处理，才能穿入到卵细胞内部。对良种母牛B进行激素处理的目的是        。

（3）为了获得多个基因型相同的后代，可对早期胚胎进行         。

（4）胚胎移植中，需要对受体D牛进行         处理，以保证胚胎能够在受体的子宫着床、继续生长发育。

（5）克隆牛G的遗传性状与母牛B基本相同，但又不完全相同。下列有关其差异形成原因叙述中不恰当的是           。

A．克隆牛G部分性状遗传自母牛F     B．克隆牛G的细胞质基因来自母牛C

C．发育过程可能发生可遗传变异       D．受环境因素的影响

【生物——选修三】

类风湿性关节炎（RA）是一种自身免疫病，致残性强。研究表明，该病的病理改变与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）密切相关，而一种人鼠嵌合的抗TNF-α单克隆抗体能有效治疗RA。下图为该单克隆抗体制备过程示意图。

（1）单克隆抗体的制备涉及细胞工程中的                           技术。

（2）图中的抗原A是            ，促融剂常用                 ，HAT培养基的作用是                                。

（3）医疗上，把单克隆抗体与化学药物或细胞毒素相结合制成“           ”，借助抗体的定向作用将药物带到病变细胞并将其杀死。

（4）克隆动物是指用            方法得到的动物；为提高胚胎的利用率，可用           技术获得同卵双胎或多胎。

（5）在克隆技术伦理方面，我国政府的态度是禁止生殖性克隆人，不反对 

       克隆。

（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技术有______________和______________。

（2）用激素处理的目的是使B牛______________，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到____________________(时期)才能与精子结合。

（3）A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫______________。卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带的间隙能够观察到______________。

（4）生产上常用______________期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体，可以使用______________技术。

【生物——现代生物科技专题】

人血清白蛋白在临床上需求量很大。将人血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，就可以利用牛的乳腺细胞生产人血清白蛋白。大致过程如下：

(1)要实现②超数排卵，应在性成熟雌牛发情期的某一阶段用____________处理，然后在________中冲取卵子。通过①采集的精子不能直接与成熟的卵子受精，原因是_________。

(2)在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O₂以维持细胞呼吸外，还需要提供________气体以维持________。

(3)图中过程⑤称为________，它在胚胎工程中的意义在于________;此过程要选择“雌性奶牛胚胎”的原因___________________________________。

(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛，过程⑤应采用胚胎分割移植技术。胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型________(相同/不同)，理由是__________________。

【生物－选修3现代生物科技专题】

胚胎工程在生物技术中发展较快，请回答下列问题：

（1）胚胎工程是指对动物早期胚胎或           所进行的多种显微操作和处理技术。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行获能处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至         。

（3）判断卵子是否受精的重要标志是                                   。

（4）精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入                 继续培养。

（5）在胚胎移植的流程中，首先要对供体、受体进行选择，并用激素进行     处理。

（6）冲卵能成功进行的生理学基础是                                   。

（7）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的            进行操作。

（8）要维持ES细胞不分化的状态，可以将ES细胞放在                 细胞上培养。