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            • 1． 白僵菌是一种真菌，其分生孢子寄生在林不害虫表皮，气孔或消化道上，使害虫死亡．回答下面问题：
              （1）微生物培养技术可以从自然菌群中筛选较理想的生产菌种．一般步骤为：采集菌样→冨集培养→
                  →性能测定．培养的白僵菌的菌样最好从    中采集．
              （2）用于分离白僵菌菌种的培养基应选用    培养基（液体、固体）．配置的白僵菌培养基一定含有水、无机盐及    和    ．
              （3）分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行    处理．
              （4）白僵菌培养时常用的接种方法是    和    ．
              难度：中等
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            • 2． 如图所示是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列．

              （1）图中选择培养基应以    为唯一，鉴别培养基还需添加    作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成    色；
              （2）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191．该过程采取的接种方法是    ，每克土壤样品中的细菌数量为    ×108个，与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较    ；
              （3）现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码，终止密码有UAG、UGA和UAA，突变基因转录的mRNA中，终止密码为    ，突变基因表达的蛋白含    个氨基酸．
              难度：中等
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            • 3． 根据实验原理和材料用具，设计实验选择运载体质粒，明确质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素类别．
              ①实验原理：作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因．故只有具有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可用做运载体．
              ②材料用具：青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱．
              ③方法步骤：
              第一步：取3个含细菌培养基的培养皿并标为1、2、3号，在酒精灯旁，用3支注射器，分别注入1mL蒸馏水、青霉素、四环素液，并使之分布在整个培养基表面．
              第二步：    ．
              第三步：    ．
              ④预期结果：
              A．    ．
              B．    ．
              C．    ．
              难度：中等
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            • 4． （2016•吉林四模）进入冬季，部分城市出现严重雾霾，与秸秆野外焚烧有一定关系．为破解秸秆处理瓶颈，微生物专家力图通过微生物降解技术使秸秆能尽快腐烂掉，增加土壤肥力．缓解环境污染．试分析并回答有关问题：
              （1）专家研制的降解秸秆的催腐剂是十余种能分解纤维素的霉菌、细菌和酵母菌的组合．其中    在细胞结构上与其他两者不同．
              （2）纤维素酶是一种复合酶，其中的葡萄糖苷酶可以将    分解为    ．
              （3）微生物专家为从发黑的树干上分离出有分解纤维素能力的高产菌株，制备了选择培养基，将菌液进行
              一系列    ，从而得到单个菌落，再采用    方法进行鉴定，得到右图的菌落．那么，图中降解
              纤维素能力最强的菌株是    （填图中序号）．
              组别催腐剂温度/℃实验现象
              甲无25第25天落叶还没变化
              乙有25第25天落叶完全腐烂
              丙有35第18天落叶完全腐烂
              （4）图中所示培养基从物理状态上看，属于    培养基．
              （5）为探究催腐剂在不同条件下对玉米秸秆的分解作用，将经过灭菌处理的秸秆平分成下表的甲、乙、丙三组，均放在无菌环境条件下进行培养，得到如下实验现象：该实验还存在不完善之处，请你说出其中一点    ．
              难度：中等
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            • 5． 下表是某种培养基的成分，据表回答：
              葡萄糖 NH4NO3 K2HPO4 KH2PO4 NaCl MgSO4 Fe2SO4 CaCl2 H2O
               10g 5g 30g 10g 0.01g0.5g  03g 5g 1000ml
              （1）该培养基用于培养微生物，营养物质可分    类．培养的微生物．其同化作用类型是    ．
              （2）如果用于培养乳酸杆菌，还需要添加    ．
              （3）如果用于培养霉菌，需将培养基的PH调至    性，培养细菌需将pH调至    性．
              （4）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是    ．如果要观察菌落，需要添加    ．
              （5）若培养基中加人伊红美蓝，可以用于检测    细菌，这种培养基被称为    培养基．
              （6）植物组织培养基时，常用的培养基是    培养基．这时，需要将上述培养基中的葡萄糖换成    ，另外添加其他有机物等，还常常需要添加    ．
              难度：中等
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            • 6． 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的培养基．回答下列问题：
              （1）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行    （选填“消毒”或“灭菌”），操作者的双手需要进行    和    ．空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤    的结构．
              （2）植物组织培养常用    培养基，其主要成分包括大量元素、微量元素和    ．在配制好的培养基中，常常需要添加    ，而且要注意添加的比例．如果愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是    ．
              难度：中等
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            • 7． 生物技术的广泛应用给社会带来了较大的经济效益，受到了社会的广泛重视．请回答下列有关问题：
              （1）制作泡菜时需要测定亚硝酸盐的含量，其方法是    ．亚硝酸盐在特定的条件下会转变为    ，引起生物致癌．引起细胞癌变的原因是环境中的致癌因子使细胞中的    发生    ．
              （2）1993年，美国科学家因发明了PCR技术面获得了诺贝尔化学奖．PCR技术和生物体内DNA的复制都必须的条件包括    、模板DNA、能量、游离的脱氧核苷酸和引物；在生物体内DNA复制所必需的，而在PCR技术中不需要的成分是    ．
              （3）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是    ；实验结束后，使用过的培养基应该处理后再倒掉，这样做是为了    ．
              难度：中等
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            • 8． 请回答下列问题：
              （1）从土壤中筛选纤维素分解菌时，需要在培养基中加入的特殊染料是    ．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基的菌落连成一片，最可能的原因是    ．
              （2）制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是    ．从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是    ．
              （3）腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是    ．豆腐发酵主要利用了微生物产生的    ，通过发酵，豆腐中营养物质的种类增多，且更易于消化和吸收．
              （4）有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是    法，为了提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用    浸泡，浸泡时间为10h以上，这样压榨时不会滑脱．
              （5）某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用花药离体培养技术大量繁殖，则应选择花粉发育至    期的花药培养成功率最高．
              难度：中等
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            • 9． 土壤微生物分离培养技术在微生物环境功能研究、代谢途径的阐明、特定功能的验证等方面发挥着重要作用．研究者可以通过培养基的优化和重新设计来达到分离土壤微生物的目的．以土壤中分解尿素的细菌的分离与计数为例，回答下列问题：
              （1）为达到分离的目的，培养基的成分必须以尿素为    ．制作固体培养基时需加入    作为凝固剂．为方便计数，可用    法接种．
              （2）在使用同一土壤样品和培养基已灭菌的情况下，甲同学从对应104倍稀释的培养基中筛选出约200个菌落，而其他同学筛选出约50个菌落，请分析甲同学筛选出菌落较多的原因：    ．（写出两个原因）．
              （3）在细菌分解尿素的反应中，细菌产生的    酶可将尿素分解成为氨．为进一步分离得到的细菌是否可以分解尿素，可在培养基中加入    指示剂，若该指示剂    ，则可初步鉴定该细菌可以分解尿素．
              难度：中等
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            • 10． 柴油是重要的燃料油之一，也因泄露与不当排放等造成了严重的环境污染．科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5g，加入含100mL培养基M的锥形瓶中，在30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤连续培养5次，分离获得醋酸钙不动杆菌DB（一中柴油降解菌）．利用该菌，科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件，获得实验结果如图．请回答下列问题：

              （1）为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以    为唯一碳源，还要考虑无机盐的    和比例．
              （2）在实验过程中，科研人员“30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次”的主要目的是    ．
              （3）在分裂醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用    （填接种方法）在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种，接种完，对接种环进行    灭菌处理．培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的    进行重复培养，直到分离出单一菌株．
              （4）据图分析，若某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将    ，并添加浓度为    的表面活性剂，以有利于提高对柴油的降解效果．
              难度：中等
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