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            • 1． 微生物的分离、培养及检测与人类的生产、生活关系密切．请回答下列问题：
              （1）纤维素分解菌在生态系统中属于    （成分）．从土壤中分离纤维素分解菌，所选用的培养基从功能上分属于    （填“鉴别”或“选择”）培养基．
              （2）在筛选纤维素分解菌的过程中，人们发明了    染色法，能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选．若需要菌种进行短期保存，可将长有菌种菌落的试管放入    的冰箱中保藏．
              （3）若要分离水体中的溶藻细菌（可裂解蓝藻细胞），应在    的水体采集水样．将采集的水样滴在布满蓝藻（蓝绿色）的培养基上，若观察到    ，表明分离培养成功．
              （4）为了计数微生物的数量，接种时应采用    法，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为    ．
              难度：中等
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            • 2． （2016•菏泽校级模拟）为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
              （1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是    和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是    ．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是    
              （2）该小组可采用图②所示的    （方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是    ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为    ．
              （3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是    ．
              （4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是    
              A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次
              B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
              C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
              D．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风．
              难度：中等
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            • 3． 请回答下列有关生物技术实践方面的问题：
              （1）传统发酵技术应用十分广泛，果酒和果醋就是常见例子．当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿造时，首先要提高    ，其次要注意通入    ．
              （2）微生物培养基通常在压力为lOOkPa，温度为    ℃条件下，灭菌15至30min，然后待培养基冷却至    ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板．
              （3）菊花的组织培养，一般选择    的茎上部新萌生的侧枝；进行菊花组织培养时，一般将pH控制在    左右，温度控制在18℃至22℃并每天光照12h．
              （4）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，柑橘芳香油的制备通常使用    法为提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用    浸泡．
              难度：中等
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            • 4． 炭疽杆菌是一类需氧芽胞杆菌，其代谢过程会将大量的代谢产物排出胞外．由炭疽杆菌引起的炭疽病是一种人畜共患、死亡率较高的急性传染病．对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过如图所示的实验确诊．请据图回答下列问题：

              （1）噬菌体的主要化学成分是    ，上述实验中噬菌体与炭疽杆菌的种间关系属于    ．
              （2）微生物接种的方法很多，最常用的是    ，经上述方法获得的纯种微生物如需长期保存，可采用    的方法．
              （3）②是将分离培养获得的可疑菌挑选出来进行接种，此过程中对配制的液体培养基等需采取的灭菌方法是    ，该培养基所用的碳源为    （无机碳/有机碳）．
              （4）在过程⑧中细菌大量繁殖，并因为    的积累而使液体培养基变浑浊．取培养后的等量菌液加入A、B试管，再将如图处理后的两试管放在35℃环境下培养6小时后观察，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组    （高或低），则证明疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．
              难度：中等
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            • 5． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行    处理．
              （2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是    ．
              （3）在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    或有氧条件抑制了这些细菌的生长．
              （4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是    ，有透明带菌落利用的氮源主要是    ，据此可筛选出目的菌．
              （5）科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：
              接种的菌种一般培养基实验处理及结果
              A不生长添加营养物质甲，能生长
              B不生长添加营养物质乙，能生长
              A+B能生长不添加营养物质甲、乙就能生长
              突变株A不能在一般培养基上生长的原因是    ．突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是    ．
              难度：中等
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            • 6． 土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应．科研人员进行如下实验：

              菌株透明圈直径（D）菌落直径（d）D/d
              M-3-0118.812.31.5
              B3-5-620.78.02.6
              T1-4-019.16.51.4
              实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图1），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小．
              实验步骤：
              步骤1  取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h．
              步骤2  在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如表）．
              分析回答：
              （1）从物理形态看，培养基A属于    培养基．培养基中磷源应该是    ．
              （2）步骤1中接种方法是    ，步骤2中接种环的灭菌方法是    ．
              （3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是    ．
              （4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200r•min-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到图2所示曲线．
              ①用摇床进行培养的好处是    ．
              ②结果表明最优良的解磷菌株是    ．
              难度：中等
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            • 7． 微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请回答下列问题：
              （1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自    的土壤．
              （2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用    培养基．常用的接种方法是    或    ．
              （3）接种后，应密封培养的原因是    ，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取    就可获得高效菌株．
              （4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数．取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为    个/mL．该统计结果    （低于、高于）实际值．
              难度：中等
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            • 8． 大肠杆菌有许多菌株，野生型菌株在普通培养基中就能成活，菌株A：met- bio-thr+ leu+thi+需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素，菌株B：met+bio+ thr-leu- thi-需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫胺．科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验．回答下列问题：

              （1）如图1所示，菌株 A 和 B混合培养几小时后，把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上，发现长出了若干野生型菌落，对此实验现象可作出如下假设：
              ①不同大肠杆菌间遗传物质发生重组．
              ②    ．
              （2）为了探究上述假设①，有人设计了一种U型管（如图2），中间用过滤器隔开，大肠杆菌不能通过，但培养液和营养物质可通过，实验如下．请补充相关实验内容：
              实验步骤：
              ①在U型管中加入    ；
              ②U型管两端各加入菌株A、菌株B，培养几小时；
              ③将U 型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在    上，观察有无菌落．
              实验结果：    ．
              实验结论：菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组．
              （3）现有1升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至103倍．各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为31、34、37，则每升原水样中大肠杆菌数为    ．该数据理论上比细菌实际数目    ．
              （4）该实验中需要灭菌的是    ．（至少写3个）
              难度：中等
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            • 9． 牛肉膏蛋白胨培养基是微生物培养中常用的培养基，其中的蛋白胨为微生物的生长提供了    等营养物质，制备的培养基一般用    方法进行灭菌．人类饮用水的安全与人体健康关系密切，欲将所取的金沙江水样品进行大肠杆菌的分离与计数，可用    法来完成．
              难度：中等
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            • 10． 根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：
              （1）当糖源充足或缺少糖源时，醋酸菌分別能将    物质最终转变成醋酸．
              （2）为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验：
              KH2PO4Na2HPO4MgS04•7H2O葡萄糖尿素琼脂H2O
              1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0glOOOmL
              若在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培养的细菌起到    的作用．若取土样4g，应加入     ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将104-107倍的稀释液分别吸取0.2mL加人到固体培养基上，在对位稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为：219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为    （小数点后保留一位小数）．
              （3）若为了获得更多青蒿素，霱将青蒿离体的细胞或组织培养成愈伤组织．青蒿的细胞分裂、组织分化能力比菊花困难一些，需要借助外源激素才能更好的分裂和分化．若上述培养基用来进行青蒿细胞、组织的组织培养，还应加入的具体植物激素是    ．
              （4）若在青蒿素的提取过程中需用果胶酶，探究果胶酶最适用量时的自变量是    ．
              （5）若用凝胶色谱柱分离果胶酶大分子蛋白质时，果胶酶在色谱柱中移动的速度是    ．
              （6）胡萝卜素粗品用    法进行鉴定，鉴定过程中需用    作为对照．
              难度：中等
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