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            • 1． 微生物与人类关系密切．虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的．请回答下列问题：
              （1）培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐．从土壤中分离分解尿素的细菌时，培养基中加的唯一氮源为    ，这种培养基称为    培养基．
              （2）在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，为什么要将平板倒置？    ．
              （3）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和    法．在用平板划线法接种时，为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环    ．
              在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？    ．
              难度：中等
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            • 2． 幽门螺杆菌病是一种螺旋形、微厌氧、对生长条件要求十分苛刻的细菌．1983年首次从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜活检组织中分离成功，是目前所知能够在人胃中生存的惟一微生物种类，常通过食物等媒介物传播，易引起多种胃部疾病．下图为幽门螺杆菌显微图象．

              （1）图甲中A指的是    ，幽门螺杆菌所含有的细胞器是    ．
              （2）从物理状态分，表格所示培养基属于    培养基，该培养基配置时，应将pH值调整后，再进行    ，最后倒平板备用．
              成分含量（g/L）
              蛋白胨10
              牛脑浸出粉10
              牛心浸出粉9
              氯化钠5
              葡萄糖2
              磷酸氢二钠2.5
              水1L
              （3）如要进行幽门螺杆菌的分离，下列条件或操作适宜的组合是    
              A．pH=2   B．pH=7    C．pH=9     D．28℃E．37℃F．高氧    G．低氧    H．无氧
              I．正置培养   J．倒置培养    K．加青霉素    L．不加青霉素
              （4）请在图乙中画出在培养皿中进行幽门螺杆菌单菌落分离时所用方法的操作轨迹．
                  
              （5）若某人被检测出携带有幽门螺杆菌，则下列做法不合适是    ．
              A．及时使用抗生素等药物对患者进行治疗
              B．避免与患者共餐以免传染
              C．日常接触中佩戴口罩
              D．加强自身锻炼，增强自身免疫力．
              难度：中等
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            • 3． 微生物与生物工程
              Ⅰ、研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示．

              （1）①过程称为    ，②过程是为了    ．在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的    ．
              （2）按功能分Ⅰ号培养基称为    ；该培养基中必须添加的成分有    （多选）等．
              A．琼脂B．葡萄糖C．硝酸铵D．淀粉
              （3）一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了    ．
              Ⅱ、图2为单克隆抗体制备过程的示意图
              （4）若只考虑细胞的两两融合，试管中有    种融合细胞，筛选后进一步培养的是    细胞，此细胞的特点是    ．
              （5）相对细菌而言，动物细胞离体培养更需关注培养基的渗透压，这是因为动物细胞    ．
              A．渗透压远高于细菌或植物细胞的渗透压
              B．没有成熟大液泡，渗透压调节能力差
              C．没有细胞壁，对培养基的渗透压更敏感
              D．生长缓慢，各生长阶段对环境的渗透压要求不同
              （6）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断．人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖；鼠骨髓瘤细胞中没有S途径，但能不断分裂增殖．写出过程I分离筛选出杂种细胞的方法    ．
              难度：中等
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            • 4． 回答下列关于微生物的问题．
              1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌．幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的螺旋状短杆菌，具有强的脲酶活性，是慢性活动性胃炎、消化性溃疡和胃癌的主要致病原因．
              （1）下列关于幽门螺杆菌的说法中，正确的是    （多选）
              A．为古细菌，因为其能生活在酸性环境下
              B．储存其遗传物质的主要场所是拟核，该菌含有质粒，可以为基因工程提供载体
              C．该菌合成和加工脲酶所涉及的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体等
              D．该菌对青霉素、利福平敏感
              如表是某培养基的配方：
              成分葡萄糖KH2PO4MgSO4NaClCaSO4CaCO3琼脂蒸馏水
              含量10g0.2g0.2g0.2g0.2g5g3.5g1L
              （2）用    法将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，置于37℃下培养一段时间后，在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时    ，主要原因是：    ．
              （3）幽门螺杆菌形态如图1所示，幽门螺杆菌生长的最适pH为6～7，人体胃腔内pH在1～2之间，但胃粘膜的粘液层靠近上皮细胞侧pH为7.4左右．若幽门螺杆菌随食物进入胃腔，结合其结构特点以及能导致胃溃疡的特性，推测该菌在胃内如何存活？    

              （4）幽门螺杆菌的传染力很强，可通过手、不洁食物、不洁餐具、粪便等途径传染，涉及传染病传播途径中的    （多选）
              A．空气传播      B．接触传播      C．媒介物传播      D．病媒传播
              （5）2015年，首例口服抗幽门螺杆菌疫苗在我国研制成功，图2中，能准确反映幽门螺杆菌疫苗接种者血清中抗幽门螺杆菌抗体的浓度随时间变化趋势的是    ．
              难度：中等
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            • 5． （2016•中山市校级模拟）微生物培养技术在医疗、工业生产、食品生产等方面均有应用．如表是一种培养基的配方，请回答：
              牛 肉 膏蛋 白 胨NaCl琼  脂水
              0.5g1g0.5g2g200ml
              （1）此培养基中的蛋白胨主要为微生物提供    ．在各种成分溶化后分装前，必须进行的是    和灭菌．
              （2）临床使用抗生素前，有时需要进行细菌的耐药性试验，其大致过程是：将含有某种细菌的菌液用    法接种在培养基表面并进行培养，最终形成单个的菌落；再分别将含有等剂量不同种抗生素的相同大小的圆形滤纸片置于该平板上有菌落的位置，继续培养一段时间后，若滤纸片下的菌落死亡，说明该细菌对该抗生素    ．（填“敏感”或“不敏感”）
              （3）用上述方法统计菌落数目时，一般选择菌落在    的平板进行计数，在某一稀释度下平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2ml，稀释倍数为105时，则每毫升样品中的菌落数为    ．在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有    （填序号）．
              ①由于土样不同　②由于培养基污染　③由于操作失误　④没有设置对照
              （4）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用    法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选．甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于    ．
              A．③B．①②C．②③D．①②③
              难度：中等
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            • 6． 人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源．现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
              （1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有    ．
              （2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程 每一步都要在    旁进行操作．接种后的培养皿    于37℃的    中培养．
              （3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于      培养基．若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的    使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力    ．
              （4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数    ．
              A．多        B．少        C．相等        D．几乎为零．
              难度：中等
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            • 7． 工厂废水的妥善处理是减轻现代化工业水污染的重要举措．如图所示为筛选某种高效分解某化工厂的污水中有机化合物A的菌种的实验流程．请分析回答下列问题：
              （1）图中所配制的培养基应以    为唯一碳源，该培养基在功能上属于    培养基．
              （2）实验过程中，“振荡”的目的是    ，由此推断该目的菌的呼吸类型与乳酸菌的呼吸类型    （填“不同”或“相同”）．
              （3）转为固体培养基时，常采用平板划线法或    进行接种，两种方法在此过程中所用的接种工具分别是    和    ，操作时对接种工具采用的灭菌方法是    灭菌．
              难度：中等
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            • 8． 请回答“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”有关问题
              （1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、     和无机盐．
              （2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是    和    两种．在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是    ．
              （3）可以通过    来判断细菌是否分解尿素．土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们能合成    ．
              （4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则大肠杆菌的增长呈现    型曲线增长．
              难度：中等
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            • 9． 纤维素分子不能进入酵母细胞．为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒．下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图1．

              据图回答：
              （1）本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如图2．为防止酶切片段的自身连接，可选用的限制酶组合是    或    ．

              A．①②B．①③C．②④D．③④
              （2）设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证    不携带纤维素酶基因．
              （3）纤维素酶基因的表达包括    和    过程．与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有    ．
              （4）在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株    不能存活，原因是    ．
              （5）酵母菌生成酒精的细胞部位是    ，产生酒精时细胞的呼吸方式是    ．在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具优势，因为导入的重组质粒含有    ，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率．
              难度：中等
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            • 10． （2016•荆门模拟）为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌，研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌（目的菌）．下图是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图，下表是分离纯化的结果．请回答下列问题：
              记录项目：透明圈直径/菌落直径
              菌落编号123
              48小时1.62.83.0
              72小时2.21.25.0
              96小时2.31.24.2
              （1）培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供    等营养要素．从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时，应选用    （填“固体”或“液体”）培养基．
              （2）配制成10-1浓度稀释液时，用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL，移人盛有     mL无菌水的试管中，并依次配制10 -2～10 -10的梯度稀释液．
              （3）在分离、纯化过程中，图中②、③过程接种的方法分别为    在倒平板前，应对玻璃器皿和培养基灭菌，灭菌方法是    ．
              （4）分析菌种的分离纯化结果，应选择为    号菌落进行扩大生产，原因是    ．
              （5）实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是    ．
              难度：中等
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