某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

(1)为了缩短泡菜制作时间，可在冷却的盐水中加入少量陈泡菜液，目的是___________________。

(2)泡菜液中的乳酸的产生场所是乳酸菌的___________。在制作泡菜初期，泡菜坛水槽总是有气泡冒出的主要原因是_______________。随着泡制时间的延长，泡菜坛中亚硝酸盐的含量变化趋势为__________

(3)为分离纯化出优质的乳酸菌，应挑选_________________的菌落作为候选菌。

(4)乳酸菌发酵产酸奶，发酵到后期时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是：___________________。

工业生产中，提取天然β一胡萝卜素的方法之一是利用红酵母等微生物进行发酵，经过菌体裂解、离心后进行萃取。请回答以下有关问题：

（1）若要初步确定某一菌株是否为红酵母菌株，相对简便的操作是通过________法将菌种接种于固体培养基上，并在适宜的条件下培养一段时间，观察其形成的菌落的________________（填2个）特征。

（2）碳源的种类对β－胡萝卜素的产量有着一定的影响，有关研究结果如下：

据表分析，最佳碳源是________。若要进一步探究最佳氮源，请简要写出实验设计思路：

_____________________________________________________________________________________________________________。

（3）有科研人员尝试利用紫外线处理红酵母，以获得高产菌株。对处理所得菌株分别进行培养并经裂解、离心后，根据β－胡萝卜素___________的特点，可以采用有机溶剂萃取法萃取产物，并对萃取产物通过________法进行鉴定，鉴定过程需要用________样品进行对比。经定量分析后，若得到高产菌株，要对其进行长期保存，可采用________的方法在－20℃的冷冻箱中保存。

啤酒是我们日常生活中最常见的饮料之一。在啤酒生产过程中，发酵是重要环节。具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意添加_______和调低______，加琼脂后进行________，最后制成固体平板。

步骤3：将紫外照射后的菌液进行接种。

下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是__________，获得图B效果的接种方法是_________。

​

步骤4：根据是否能在选择培养基上生长筛选出突变菌。

利用紫外线诱变可选育高产β－胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），只有发生高产突变的菌体才能在含有浓度为10mol／L的β－紫罗酮的培养基上生长。菌体随β－胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育高产菌株及提取β－胡萝卜素流程，请回答下列问题：

（1）用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是________。

（2）为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加________。

（3）进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。为筛选纯化β－胡萝卜素产量高的菌种，采取重复________（填图甲中数字）过程。

（4）过程⑥是________，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量________，提取的色素少。

（1）用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基从物理性质看属于______培养基，大肠杆菌与酵母菌在结构上的主要区别是大肠杆菌________。

（2）样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株，产生新菌株的原因是由于JA122大肠杆菌发生了_________。

（3）对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测：CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源。请设计并完成下列实验步骤，来验证以上观点。

①配制________的固体培养基（A组)；和不含碳源的固体培养基（B组）；

②将等量的适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在_________条件下进行。

③预期实验结果：_________________________________________________

在白酒发酵的窖池中，培养液的pH≤4.5后，酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制，甚至停止发酵。耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力，适宜作白酒发酵生产用菌种。为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌，研究者进行实验。

（1）酵母菌的呼吸作用类型是________。在发酵过程中，窖池中培养液的pH会逐渐下降，原因是___________________________。

（2）取适量窖底泥、酒糟和黄浆水，分别溶于10 mL________中，再各取1 mL上清液接入10 mL麦芽汁培养基中培养，2天后分别接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上，培养结果见下表。

注：“+”越多表示菌体长得越好，“—”表示几乎不生长。

（3）在pH≤3.5的环境下，仍可检测到少量耐酸性酵母菌生长，这些菌株是________形成的。

（4）从pH为________的培养基中获得菌种，可通过________法接种到培养基上，进行纯化培养。

（5）实验获得了三个耐酸性强的酵母菌菌株，特点如下表。

依据菌株特点，研究者认为C菌株更适合作为白酒发酵菌株，作出这一判断的理由是_____________________________。

[选修1：生物技术实践]

（1）在家庭制作少量葡萄酒时，利用附着在葡萄皮上的野生酵母菌作菌种，但果酒产量不高。为获得高产果酒的酵母菌菌株，研究人员通过辐射处理野生型酵母菌，然后用             法将酵母菌菌种接种到添加了检测试剂       的选择培养基上，置于适宜条件下培养一段时间，选用菌落周围               的即为高产菌株。

（2）根据胡萝卜素               的特点，可以用萃取的方法提取胡萝卜素。我们可以用        (乙醇、乙酸乙酯）做为萃取试剂。

（选修1：生物技术实践）

水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）上表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，从物理性质来看，该培养基为         培养基，表中X物质最可能为_______________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，选择培养基上生长的菌落数目应明显__________（填“多于”或“少于”）对照组培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用___________计数板直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁵倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会_______（填“偏大”、“偏小”或“相等”），原因是                       

                  。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入_________________用于鉴别PVA分解菌。

茶饮料中含较多的天然成分。回答下列问题：

（1）红茶菌液是一种传统的活菌饮料，由酵母菌、醋酸菌等微生物利用蔗糖等营养物质共同发酵产生。在接种活菌前，将红茶糖液煮沸的目的是_______________。在发酵的过程中，发现先出现酒味后出现醋味，从物质代谢的角度分析，原因是________

_____________________________________________。

（2）茶饮料所用的胡萝卜素，通常采用______________法提取，理由是_________________________________________________

_____________________________________________。

（3）茶饮料所用的茉莉芳香油的提取流程如下：茉莉花+水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→过程B+过滤→茉莉油。过程A的方法是_______________，过程B的目的是__________________。