为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素酵母菌的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：

(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是________________________________；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该________________。

(2)为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是________________________________________________________________________。

(3)下图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是________。(填序号)

①安全阀、放气阀、压力表　②放气阀、安全阀、压力表

③安全阀、放气阀、温度表　④放气阀、安全阀、温度表

(4)为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是________________。

(5)为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是___________________________________________________________；研磨时________(填"需要"或"不需要")添加CaCO，理由是______________________________________。

微生物的实验室培养要用到基础培养基，但培养不同的微生物还需满足其生长、繁殖的特殊需求。下列有关说法正确的是

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_________，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

LB液体培养基和LB固体培养基是微生物实验室中较常用的一种培养基，其配方为10 g/L蛋白胨、10 g/L酵母提取物、5 g/L氯化钠等，主要用于培养细菌、扩增菌种数量。某研究组开展了氧气对微生物生长、繁殖的影响实验，请回答下列问题：

(1)要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有______________和无机盐等。有些微生物对某些特殊营养物质及______________等条件有特殊要求。

(2)将各类微生物用______________从斜面培养基接种于灭菌过的LB液体培养基中，进行扩大化培养。

(3)将含有LB固体培养基(LB液体培养基中加15 g琼脂粉，刚配好，尚未凝固)的锥形瓶放入______________中进行灭菌。灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60 ℃(不烫手的温度)时，用______________擦拭桌面和双手，在超净工作台中的______________旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管中，并做标记。

(4)当试管温度下降到40 ℃(培养基还是液态)时，用灭菌过的移液器吸取0.1 mL的各类微生物悬液加入相应试管中并封口，双手快速搓动试管，使菌种均匀分布于培养基内后迅速将封口的试管放置在________条件下使培养基凝固。

(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用______________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是______________________。

(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________和________。

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是__________________。

(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为____________。

(2)在制备杨梅醋过程中，乙罐内填充的木材刨花应先经__________处理，然后加入含___________菌的培养液，使该菌附着在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵，请写出乙罐中生产杨梅醋的化学反应方程式_______________________。

(3)为了提高杨梅酒和杨梅醋的品质，更好地抑制其他微生物的生长，需向相应的发酵罐中加入优良的菌种。从野生菌群中分离纯化优良菌种时，最常用的接种方法有____________和____________。

以下关于实验方法的叙述中正确的是（ ）

(1) 如上图所示,菌株A和B混合培养几小时后,把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上,发现长出了若干野生型菌落,对此实验现象可作出如下假设:

① 不同大肠杆菌间遗传物质发生重组。

② ____________。 

(2) 为了探究上述假设①,有人设计了一种U型管(如图),中间用过滤器隔开,大肠杆菌不能通过,但培养液和营养物质可通过,实验如下。请补充相关实验内容:

实验步骤:

① 在U型管中加入________; 

② U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时;

③ 将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在____上,观察有无菌落。 

实验结果:________。 

实验结论:菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

(3) 现有1 L水样,用无菌吸管吸取1 mL转至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释至10³倍。各取0.1 mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为31、34、37,则每升原水样中大肠杆菌数为____。该数据理论上比细菌实际数目____。 

(4) 该实验中需要灭菌的是_____________。(至少写3个) 

酵母菌是日常生产和生活中应用极其广泛的一种微生物。下图是有关酵母菌的实验操作。以下叙述错误的是

工业生产中，提取天然β—胡萝卜素的方法之一：利用红酵母等微生物进行发酵，经过菌体裂解、离心后进行萃取。回答以下有关问题：

(1)若要初步确定某一菌株是否为红酵母菌株，相对简便的操作是通过_________法将菌种接种于固体培养基上，并在适宜的条件下培养一段时间，观察其形成的菌落的_____________(填2个)特征。

(2)碳源的种类对β胡萝卜素的产量有着一定的影响，有关研究结果如下：

据表分析，最佳碳源是_________。若要进一步探究最佳氮源，请简要写出实验设计思路：____________________________________________________。

(3)有科研人员尝试利用紫外线处理红酵母，以获得高产菌株。对处理所得菌株分别进行培养并经裂解、离心后，根据β—胡萝卜素_____________________的特点，可以采用有机溶剂萃取法萃取产物，并对萃取产物通过_______________法进行鉴定，鉴定过程需要用_____________样品进行对比。经定量分析后，若得到高产菌株，要对其进行长期保存，可采用__________的方法在—20℃的冷冻箱中保存。