苹果醋具有营养丰富，增强机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下图1，请分析回答：

             图1                                图2

(1)过程甲中发酵温度控制在​                   ，经过10～12天后，样液中是否产生酒精，可以用            来检验。

(2)利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是                          。

(3)过程乙中使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得，操作过程中利用平板划线法进行接种，在操作过程中应注意的事项有下列哪几项____________（填序号）。

①每次划线前和结束时都需要灼烧接种环；②灼烧接种环后，待其冷却后再划线；③第二次及以后的划线，要从上一次划线的末端划线；④最后一次划线不能和首次划的线相接触。

(4)为了保持菌种的纯净，对于长期需要保存的菌种，可以采用            的方法。

(5)某同学尝试自己利用图2装置制果醋，制作过程中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是                           。

经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株，菌体自身不能合成天冬氨酸，必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程（注:基本培养基中不含氨基酸，完全培养基中含所有种类的氨基酸）。回答下列问题：

    （1）过程①接种的方法是________________。待测培养皿中的培养基是___________(答“基本”或“完全”）培养基。

    （2）过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落，先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到_______________(答“基本”或“完全”)培养基上，原因是____________________。

    （3）完成②过程的转印并在28℃的培养箱中培养2天后，两个平板上出现的菌落有的相同，有的不同。完全培养基上出现的菌落A和菌落B中，不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是_________菌落（答“A”或“B”），原因是___________________。

    （4）为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株，科研人员又制备了甲、乙两个平板，这两个平板中营养成分的差异是________________。将待鉴定菌种接种到两个平板中，置于适宜条件下培养一段时间后，若观察到两个平板中菌落的生长情况是__________，则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

    （5）临时保存该菌种时，可将菌种接种到试管的______上，在合适的温度下培养。长期保存时可采用________的方法。

如图是分离、纯化及保存枯草芽孢杆菌菌株的过程示意图：将土壤表层土稀释液煮沸5 min(枯草芽孢杆菌的芽孢不会失去活性)静置5 min后获得样品，进行如下操作：

请回答下列问题：

(1)由题意可知，除用选择培养基外，还有________操作起到筛选作用。

(2)上图的划线操作中，培养基从物理状态分类上属于______________，接种环用__________________法进行灭菌，划线过程中第一区和最后一区的划线________(填“能”或“不能”)相连。

(3)用稀释涂布平板法在5个培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁴的样品液0.1 mL，培养一段时间后，平板长出来的菌落数分别为13,160,532,175和187。每毫升样品中的细菌数量为____________个。

(4)用上述方法统计出的菌落数往往比样品中活菌的实际数目______，原因是____________________________________________________________________。

土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：

固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1  取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如表）。

分析回答：

（1）从物理形态看，培养基A属于_______培养基。培养基中磷源应该是______________。

（2）步骤1中接种方法是__________________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

（3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_____________。

（4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min^-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到下图所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是___________________________________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是_______________。

I.现有五种不同的抗生素（甲、乙、丙、丁、戊），要测它们对金黄色葡萄球菌的作用效果。图1表示在均匀接种了金黄色葡萄球菌的固体培养基上，分别于不同位置加入2mg不同的抗生素的实验结果（图中●为添加点）。图2表示这五种抗生素对成人产生毒副作用的剂量。请回答：

              图1                                                  图2

（1）由图1可知，_______种抗生素的抗菌效果最好。

（2）如果给予剂量为2mg，那么________种抗生素最适宜成人使用，理由是_____________。

（3）已知丁种抗生素作用的原理是抑制金黄色葡萄球菌细胞壁的形成，由此推测该种抗生素对成人的毒副作用较小的可能原因之一是___________________________。

（4）为保证培养基上能均匀地生长出一层金黄色葡萄球菌，将菌液接种到固体培养基上时宜进行____________（填“涂布平板”或“平板划线”）操作。实验过程中，与用于计数的平板接种不同的是本实验要保证滴加到培养基上的菌液_______________，以缩短培养时间。

（5）本实验过程中所使用的无菌技术，除用来防止培养物（金黄色葡萄球菌）被其他外来微生物污染外，还能_______________。

                                            图1

（1）如图1所示，将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中，该技术称为_________技术；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是_________________________。

（2）胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行_______处理。

（3）采用SRY-PCR法进行性别鉴定的基本程序是提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段，然后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有____________；其中，dNTP的作用是____________________________________，引物应选用图2中的________（填图中标号，图2中I、II、III、IV是引物，箭头是延伸方向）。

                              图2

②若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞______（填“能”或“不能”）用作图1所示技术流程中转化过程的受体细胞。

（2）④为对照，微生物在④中不生长、在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于_______________；使用____________法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时进行倒置培养是为了防止                             ．

根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、尿细菌、纤维杆菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容：

首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。

(1)利用无氮培养基可筛选出________________。

(2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_________________.

(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加人_______________。

(4)用含较高浓度NaCl的培养基可选择出________________。

(5)利用伊红一美蓝培养基培养混合菌，菌落呈黑色是____________，挑取该菌落单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红——美蓝鉴别培养基来确定。

(6)在无氧环境下培养混合菌，同时加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出________________。

(7)利用碳源为纤维素的液体培养基可筛选______________________。

(8)若筛选尿细菌，则配制的培养基特点是________________________。初步筛选后为了进一步验证分解尿素的细菌是否存在，常用的方法是        。

(9)在上述实验接种时可采用平板划线法，操作结束为什么仍需要灼烧接种环？                                                           。

金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题：

图A    图B  

（1）从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行______________呼吸。

（2）7.5% NaCl肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括____________________________，用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是____________________________。

（3）若接种后获得的结果为图B所示，则所接种方法如图______________所示。 

（4）按培养基功能分类，血平板属于______________培养基。

（5）经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现______________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是____________________________。

苹果醋是指苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而制成的饮品。如下图是苹果醋的制作流程简图，请据图回答：

（1）过程①、②所用的微生物在结构上最明显的区别是____________。这两个过程所需发酵的条件（环境因素）最明显的区别有_______、______。

（2）过程①、②中产物的检测，除了嗅味和品尝外，还可分别用___________和____________检测。

（3）若要在过程②的发酵产物中分离出所需菌种，需进行纯化培养。纯化培养的原理是：在培养基上得到_____________________________，即可获得较纯的菌种。常用的接种方法有平板划线法和_______________，配制固体培养基所用的凝固剂是___________。