【生物——选修1：生物技术实践】

   日常生活中人们常将吃剩的食物盖上保鲜膜后放入冰箱储藏以防止污染。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的食物中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的食物制成液体，研究其中细菌的种类和数量。

（1）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________。常用的对培养基进行灭菌的方法是________。对无菌操作间的灭菌方法一般是________。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了鉴定食物液体中微生物的种类并测定数量，应采用________法接种。用这种方法统计的菌种数往往比活菌的实际数目低，其原因是________。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明食物液体中有________（填“一种”或“多种”）细菌。菌落总数越多，说明食物被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

（1）由果酒制作转为果醋制作，需要改变的条件有哪些？                         。

（2）泡菜制作过程中，盐水要煮沸冷却待用，煮沸的目的是                          。

（3）纯化微生物常用的方法是                                   。

（4）按物理性质划分：没有加入凝固剂琼脂的是      培养基，一般用于微生物的工业生产:；只有在      培养基上才可观察到菌落。培养基中没有加碳源可选出     （自养或异养）微生物。

【生物—选修1：生物技术实践】

苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口。苹果醋还能保健养生、改善疲劳、 美容养颜，是目前大众非常喜爱的饮品。下图是苹果醋的制作简图，据图回答：

（1）过程①中使用到的微生物是         。若要检测是否产生了苹果洒时可用      试剂进行检测。

（2）过程②和过程③中起作用的微生物都是       ，但过程②和过程③该微生物分解的碳源不同，过程②和过程③的碳源分别是             、       ，产生醋时该微生物可以从食醋中分离纯化获得，具体方法是：                   。

（3）第一步：配置培养基，该培养基必须含有微生物生长所需要的基本营养成分。

第二步：对培养基用     方法进行灭菌。

第三步：接种。微生物常用的接种方法有           、            。

第四步：培养。温度控制在30-35℃。培养时需要提供氧气。一般应釆用平板倒置培养，主要原因是              。

第五步：挑选符合要求的菌落

【生物—选修1：生物技术实践】

   为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目是        ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为___________。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，培养基通过___________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是                   。

（3）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

[生物—选修1：生物技术实践]

生物技术与我们的生活息息相关。请根据所学知识，回答下列有关问题：

（1）在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量会发生变化，测定亚硝酸盐含量的方法是________。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为________，进而可能引发人体细胞癌变。

（2）制作葡萄酒的菌种主要来源是________。检验是否产生酒精可在________条件下，用________试剂检测。

（3）若要提高果酒的产量，发酵过程中要控制好哪些条件？________（至少写出两项）。

（4）为获得一种能高效降解有机磷农药的细菌，应使用含有________的选择培养基；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，目的是________。

[生物——生物技术实践]

幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的革兰氏阴性螺旋状杆菌，具有强的脲酶（能降解尿素）活性，其代谢类型属于异养厌氧型（氧气浓度在5％～8％左右适合，完全无氧或空气环境中无法生存），这种细菌是慢性胃炎、甚至胃癌发生的元凶。

（1）为了对胃炎患者的胃粘膜提取物稀释样液中幽门螺杆菌进行分离，应将样品稀释液接种于以________为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在________条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

（2）分离培养幽门螺杆菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有________。

（3）欲检测上述培养基中是否具有幽门螺杆菌这类细菌的存在，向培养基中添加酚红指示剂，培养基中菌落周围显示红色环带，即表明这类细菌的存在，这种检测过程的机理是________。

（4）采用液体培养基培养幽门螺杆菌，为了测定菌液中的菌体数量，一般采用________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计________的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏________（填“大”或“小”），原因是________。

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有                   、                    (至少答2种)。

(2)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于     培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的         使pH升高，使酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力              。

(3)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数           。

A．多        B．少      C．相等      D．几乎为零

(4)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在              旁进行操作。接种后的培养皿            于37℃的                中培养。

[生物——选修1：生物技术实践专题]

乳酸菌是人和动物体胃肠道中的有益菌，能助消化，利于肠道健康，但是消化道中胆汁所含的胆盐会对乳酸菌的生理活动有抑制作用，为此，研究人员通过辐射处理野生型乳酸菌，得到耐高浓度胆盐的乳酸菌。

（1）与腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是________。

（2）实验步骤：

①育种与培养：辐射处理后可得到多种类型的乳酸菌，置于经过________法灭菌处理的________（固体、液体）培养基中，37℃振荡培养。

②接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于含0.3％胆盐和不含胆盐的固体培养基上，配制时为了使培养基凝固，应向培养基中加入________；置于37℃条件下________（密闭、充气）培养。不含胆盐的培养基培养的目的是________。

②筛选与纯化：从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进一步的纯化。

【生物一选修1：生物技术实践】

   柿子经过发酵可制成柿子醋，以下是柿子醋制作的流程:柿果→挑选→清洗→去皮→去核→脱涩处理→切块→压榨→柿汁→灭菌→酒精发酵→醋酸发酵→灭菌→陈酿→淋醋→过滤→成品。请回答下列问题：

（1）脱涩过程可以用成熟的苹果、梨等水果释放的_____气体促进柿子成熟。

（2）将压榨后的柿汁加热到80℃保持10〜20分钟的目的是________。酒精发酵时可添加活性干酵母进行，发酵的原理是____     ____（写出反应式）。

（3）若醋酸发酵时需扩大培养醋酸菌种，实验室常用的接种方法是________________和_____________接种前应对培养皿、接种环和培养基进行灭菌，方法分别是______________。接种时应在火焰附近进行，同时设置空白培养基做对照，原因是_____                          。

【生物一选修1：生物技术实践】

 泡菜是四川人非常喜爱的家常小菜，新鲜的泡菜滤液中含有乳酸菌，可作为实验材料分离纯化乳酸菌。回答下列问题：

 (1)泡菜腌制一段时间后，泡菜坛中的盐水和蔬菜逐渐变酸，原因是                            。腌制过程中，要注意控制腌制的                 等条件，以防止亚硝酸盐的含量过高。

 (2)分离纯化乳酸菌时，需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，这样做的目的是                                          。稀释后的泡菜滤液可用        法使菌液均匀接种在培养基表面，接种的全过程都应在           附近进行。

 (3)固体培养基会因加入适量碳酸钙后而不透明，但乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。纯化乳酸菌时应该挑取生长在平板          （选填表面或中下层）且周围出现                的菌落进一步分离。