（一）【生物——选修1：生物技术实践】

特定微生物产生的纤维素酶能将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，经发酵后形成乙醇，再加工即可制成生物燃料。图甲为纤维单胞菌（能产纤维索酶）的获取过程。图乙为生物燃料的制备过程，请回答以下问题。

（1）过程②分离获取纤维单胞菌的接种方法为________法。过程①选择培养出纤维单胞菌的原理是________。

（2）图乙中的微生物X是________，其发酵的化学反应式为________。

（3）某研究人员经图甲培养获得了三种微生物（甲、乙、丙），如何简要判断三种微生物所产生的纤维素酶活性大小？________。

（4）利用纤维素酶制取生物燃料的生态学意义为________。

（5）要统计每克土壤样品中的活菌数目，宜采用________法接种。通过统计平板上的________就能推算出样品中的大约活菌数。

（二）【生物——选修3：现代生物科技专题】

我国已实现部分“胚胎工程产业化”，如肉牛、奶牛胚胎工程产业化。如图所示是科学家采用不同方法产业化培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请回答下列问题：

（1）h操作的核心是________，一般其运载体上含有荧光蛋白基因，用于是否导入目的基因的检测，那荧光蛋白基因称为________。

（2）若A、B牛的核遗传物质相同，其产生通过________技术，它们性状________（填“是”“否”）完全相同，原因是________。

（3）图中用到的激素是________，其作用是________，胚胎工程中还有________过程需要用激素处理。

（4）d和f过程是________，是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”，胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________。

[生物——选修1生物技术实践]

   乳酸菌是人和动物体胃肠道中的有益菌，能助消化，利于肠道健康，但是消化道中胆汁所含的胆盐会对乳酸菌的生理活动有抑制作用，为此，研究人员通过辐射处理野生型乳酸菌，得到耐高浓度胆盐的乳酸菌。

（1）与腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是________。

（2）实验步骤：

①育种与培养：辐射处理后可得到多种类型的乳酸菌，置于经过________法灭菌处理的________（固体／液体）培养基中，37℃振荡培养。

②接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于含0.3％胆盐和不含胆盐的固体培养基上，配置时为了使培养基凝固，应向培养基中加入________；置于37℃条件下________（密闭／充气）培养；设置不含胆盐的培养基培养的目的是________。

③筛选与纯化：从平板中提取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进一步纯化。

[生物——选修l：生物技术实践]：

请回答下列与微生物的分离、培养等有关的问题：

（1）某培养基的配方：KH₂PO₄、NaNO₃、MgSO₄·7H₂O、KCl、葡萄糖、H₂O。如果使用该培养基来筛选土壤中分解尿素的细菌，则应去除的成分是________．同时需要添加的成分是________。

（2）琼脂是从海藻中分离获得的多糖物质，在培养基中常常需要加入琼脂，其作用是________．

（3）如图表示的微生物接种方法称为________，图示接种需要对接种环采用________灭菌，先后灭菌________次．

（4）已知稀释倍数为10⁶（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL），平板上分解尿素的细菌菌落数的平均值为233，则每毫升样品中的菌落数是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，可以作为食用色素。最近还发现天然胡萝卜素具有使癌变细胞恢复为正常细胞的作用。请回答下列问题；

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，在温度及气体环境分别为________条件下最适合其生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，可选用________法接种。接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的是________。

（4）酵母菌菌体裂解后经离心、萃取、浓缩可获得胡萝卜素，可通过________比较不同种类酵母菌的产胡萝卜素能力。所获得胡萝卜素纯度可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照为________。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列与微生物有关的问题。

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生脲酶，该酶能将尿素分解成________。

（2）为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解茵的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

（注：“＋”表示有，“－”表示无）

培养基甲________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________；培养基乙________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________。

（3）如分别取0.1mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中该细菌数为________个。

（4）纯化细菌时使用的培养基一般用________法灭菌，________（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

（5）某小组采用平板划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________。

（6）尿素分解菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________（填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”）。

[生物——选修1：生物技术实践]

   某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按下表处理：

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是________。若E组的培养基表面有菌落生长，说明了________。

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供________和________。

（3）实验过程中“待培养基冷却至室温”的目的有________。

（4）实验结束后，对使用过的培养基应进行________灭菌处理。

[生物—选修1：生物技术实践]

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入________制成选择培养基进行分离。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________，常用________法统计样品中活菌的数量，统计结果一般用培养基中出现的菌落数表示。统计培养液中微生物（如酵母菌）的数量还可采用________的方法，用血细胞计数板计数。

（3）橘皮压榨后得到的糊状液体除去其中的固体物后获得乳状液，从乳状液中分离得到芳香油，要加入无水硫酸钠，其作用是________。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是________。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的蛋白酶分解。最终使________含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

[生物——选修1：生物技术实践]

焚烧秸秆是导致雾霾的原因之一。下图是工业上利用秸秆中的纤维素发酵生产酒精的基本工艺流程：

回答下列问题：

（1）步骤①需要的微生物大多分布在       的环境中。②中获得的酶是一种复合酶，其中       能将纤维二糖分解成发酵所需的葡萄糖。

（2）为了获得酵母菌，可取土样将其稀释，用涂布器涂布到多个琼脂固体培养基的表面，这种方法称为       。下图所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是       。

用这种方法统计样本菌落数时，需要设置空白对照组，原因是       。

（3）步骤③要注意对接种器材进行       ；步骤④一般需将温度控制在       。