[生物——选修 1：生物技术实践]

下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：

（1）该种培养基可用来培养 ________的细菌。从用途看，这种培养基称为_______培养基。

（2）如果要通过统计培养基中的菌落数来估算样品中的细菌数，则在上述培养基中还需要添加作为凝固剂，接种时应采用法才能达到目的。这种方法统计到的是样品中_______的数目，除了这种方法，还有也是测定微生物数量的常用方法。在用不同浓度的稀释液培养得到的平板中，为保证统计的数目结果较为准确，一般选择菌落数在_______的平板进行计数。

（3）某同学从土壤中分离出目的细菌以后，若要对其作进一步的鉴定，可在上述的培养基中加入_______指示剂，培养该菌后，如果指示剂变_______，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

请回答下列与微生物有关的问题：

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生脲酶，该酶能将尿素分解成                  。

（2）为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表）：

注：“+”表示有，“-”表示无

培养基甲       (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是                        ；培养基乙           (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是                    。

（3）如分别取0.1mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、

155、158、370，则每升原水样中该细菌数为                 。

（4）纯化细菌时使用的培养基一般用         法灭菌，               (填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

（5）某小组采用平板划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是                      

（6）尿素分解菌在-20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的            (填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”）。

23.如图表示月季的花药离体培养过程，请回答：

（1）选择花药时，一般要通过_________来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，一般来说，在_________期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，通常选择_______________的花蕾，花药培养成功率最高。

（2）在花粉的培养基中要加入一定的植物激素，常用的植物激素有____________________。

（3）从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过_______阶段发育而来。

（4）图中的B过程需要_____，因为愈伤组织形成幼小植物后，植物需要叶绿素进行光合作用。

（5）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________指示剂培养几种细菌后，指示剂变红就可以判断其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______________染料，培养几种细菌后，培养基中出现透明圈，就可以判断其中含有纤维素分解菌。

(1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，细菌合成的________将尿素分解为________，pH升高，使指示剂变为红色。

(2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌， 这种培养基属于_____培养基。

(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验中需要振荡培养，原因是______________________。

(4)下图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

(5)关于下图的操作方法和结果，叙述正确的是    __。

A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

B．划线操作须在火焰上进行

C．在5区域中才可以提到所需菌落

D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

(1) 下图是利用              法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步       分散到培养基的表面。

(2) 分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述        成分，并加入       物质，以补充       源。若用于培养纤维素分解菌，应加入            物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入          染料，将呈            反应。

(3) 三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，得到以下统计结果：

甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；

乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；

丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；

 在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确？

                                                                                                                                         。