[生物——选修1：生物技术实践]

根据所学知识，回答下列问题

（1）用萃取法提取胡萝卜素的原因是________。萃取的效率主要取决于萃取剂的________，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对新鲜胡萝卜进行干燥时，要注意控制________，否则会引起胡萝卜素的分解。

（2）从橘皮中能提取出橘皮油，为提高出油率，需要将橘皮干燥，并用________浸泡。为探究浸泡时间对出油率的影响，应设置________作为对照。

（3）酒精发酵时，当酒精含量达到12～16％时，发酵就停止了。为获得耐酒精的酵母菌，用涂布器在含高浓度酒精的培养基上进行________操作。这种培养基只允许耐酒精的微生物生长，该培养基称作________培养基。再根据菌落的________、隆起程度和颜色等菌落特征获得酵母菌。

将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：

（1）M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素一抑制__________的生长，加入了链霉素的培养基属于__________培养基。

（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有____________________（答出两点即可）。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有____________________（答出两点即可）。

（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是__________，该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理___________________________________。

（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：

甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。

乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。

有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是：_______________________________________。

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以       为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于       培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即       和       。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力       。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、        和         。无菌技术要求试验操作应在酒精灯       附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

如表所示为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：

请根据以上配方，回答下列问题。

（1）该培养基按物理性质划分是________培养基；按培养基的作用划分是____________培养基。该培养基含有微生物所需要的________类营养物质。其中最主要的碳源是葡萄糖，氮源是尿素。

（2）该培养基具有选择作用的原因是______________________________________________。

（3）在该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是_____________。

（4）若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入________指示剂，尿素被分解后指示剂变________色。

（5）某同学尝试使用罐头瓶在常温下制作果酒，开始时向消过毒的罐头瓶中加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的原因是________，添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供_________________________。

为了获得纯度高的大肠杆菌,需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

(1)培养大肠杆菌,配制固体培养基的基本步骤:计算→称量→________→_________→倒平板。 

(2)称量时,由于牛肉膏比较黏稠,可以用______挑取,放在____上称量。由于牛肉膏和蛋白胨______,称量时动作要迅速,称量后要及时盖上瓶盖。 

(3)在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长,说明培养基含有_________等大肠杆菌生长所需的营养要素。 

(4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法_________和_________等,使大肠杆菌在固体培养基上形成单个_________,从而获得纯菌株

蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值．某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配置了下列培养基，在适宜条件下培养）：

（1）为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除______并加入高浓度的______．

（2）对培养基进行灭菌，通常采用的方法是______，为更好实现目的菌的分离和计数，采用的接种方法是______，该方法的操作是先将菌液进行一系列的______，然后再分别______到琼脂固体培养基的表面，实验结果如图．

​​
（3）步骤Ⅲ应挑取图中______处的菌落，本步骤的目的是______．

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品,但易变质,保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离,并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果,为生产豆浆时,优化保质方法提供依据。主要研究过程如下:

①豆浆变质处理:将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250 mL三角瓶中,密封、37 ℃条件下,放置7 d后,豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数:取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上,培养一段时间后,统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表:

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果:以自制的新鲜豆浆为材料,经相应处理后,在37 ℃下放置35 d后,统计豆浆中腐败细菌数量,结果如图。

请回答下列问题:

(1) 步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是________,步骤②中培养基的常用灭菌方法是____________。 

(2) 步骤②中适宜采用的接种方法是________。区分菌落种类的依据是________________。统计菌落种类和数量时要每隔24 h观察统计一次,直到各类菌落数目稳定,以防止____________________。 

(3) 乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂,它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明,最能耐受乳酸链球菌素的细菌是____;为有效防止豆浆腐败,在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在____左右。 

(4) 与用抗生素防腐相比,使用乳酸链球菌素防腐的优点是_。