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            • 1. 固定化的高温淀粉酶被大规模用于工业生产。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选和固定过程如图1所示。菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉,在菌落周围形成透明圈。请分析回答:

              (1)与大肠杆菌相比,嗜热菌DNA碱基组成的特点是                          

              (2)Ⅰ号、Ⅱ号培养基的配制主要包括如下步骤:a.溶化,b.调pH,c.灭菌,d.称量。正确的操作步骤顺序是                 。溶化过程中当琼脂完全熔化后,还需用蒸馏水                 

              (3)将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内,加盖并将排气管插入内层灭菌桶内的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓时,应注意                ,以免漏气。

              (4)1号培养基中以淀粉为唯一碳源,从功能上讲该培养基属于                 。待菌落长出后,应选择                 的菌落接种到Ⅱ号培养基,第二次及以后的划线,总是从                 开始,实验中过程③的目的是                 

              (5)若要保证高温淀粉酶的活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性,则最好选择图2中的                 固定化工艺(填图中字母)。

            • 2.

              为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”,某同学进行了如下实验:

              请分析回答下列问题:

              (1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是________。

              (2)接种微生物的方法有很多,图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是________。用该方法统计样本菌落数后,

              所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml),这里的n=________。

              (3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:

              步骤1:分别取________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间,观察比较培养基中菌落生长情况。

            • 3.

              如下图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题:


               

               

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有无机盐、水、________四类。①是制备培养基时________中的主要操作,该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是通过灼烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基,实验操作中的灭菌方法还有_________。

              (2)该纯化醋酸菌的接种方法是______________;完成步骤④的操作,接种共需要________次灼烧处理。如果需要统计醋酸菌液中活菌的数目可以采用______________法进行接种;培养过程中,常选择菌落数在__________的平板统计计数。

              (3)食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成__________酶的微生物能够降解纤维素,该酶是一种复合酶,它至少包括__________________。为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入__________染料,形成________色复合物,若产生__________,则证明有纤维素分解菌存在。

            • 4. 大肠杆菌有许多菌株,野生型菌株在普通培养基中就能成活,菌株A: met-bio-thr+leu+thi+需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素,菌株B:met+bio+thr-leu-thi-需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫铵。科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验。回答下列问题:

              (1) 如上图所示,菌株A和B混合培养几小时后,把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上,发现长出了若干野生型菌落,对此实验现象可作出如下假设:

              ① 不同大肠杆菌间遗传物质发生重组。

              ② ____________。 


              (2) 为了探究上述假设①,有人设计了一种U型管(如图),中间用过滤器隔开,大肠杆菌不能通过,但培养液和营养物质可通过,实验如下。请补充相关实验内容:


              实验步骤:

              ① 在U型管中加入________; 

              ② U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时;

              ③ 将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在____上,观察有无菌落。 

              实验结果:________。 

              实验结论:菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

              (3) 现有1 L水样,用无菌吸管吸取1 mL转至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释至103倍。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为31、34、37,则每升原水样中大肠杆菌数为____。该数据理论上比细菌实际数目____。 

              (4) 该实验中需要灭菌的是_____________。(至少写3个) 

            • 5. 亚洲人体内普遍缺乏乳糖酶,造成饮用牛奶后出现肠胀、腹胀、腹泻等不良症状。某牛奶制品生产厂家致力开发新产品,生产低乳糖新品,欲筛选出高产乳糖酶的微生物,制备乳糖酶并固定化,具体步骤如下:

              根据相关信息,回答下列问题:

              (1)筛选产乳糖酶的微生物时,宜用___________作为培养基中的唯一碳源。

              (2)固定化酶常用的方法是________________________________________________

              (3)科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定乳糖酶,以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。研究结果如下图所示。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率,包括____________和____________等方面,根据图示信息,在____________的条件固定化酶催化效果较好。

               

              (4)实验者还进行了海藻酸钠固定化乳糖酶及化学结合法固定化乳糖酶的催化效果的比较研究,发现用____________法固定化酶的效果更好,原因可能是_________________________ 

              (5)工业生产中,使用固定化酶和使用游离酶相比,优点是_________________________ 

            • 6.

              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从赤峰市克旗热泉(出口水温达87℃)中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:

              (1)I号培养基中应加入___________,以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从I号培养基中挑选__________菌落接种到II号培养基中。

              (2)②过程所使用的接种方法是___________________。如果不经过①过程,直接将采集的样品进行接种培养,可能出现的结果是________________________________。

              (3)I、II号培养基接种菌种后,应该置于__________的恒温培养箱中培养,培养皿要倒置的原因是_______________________________。

              (4)在高温淀粉酶运用到工业坐产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保持足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,如曲线②。根据实验结果分析:80℃并不是该酶使用的最佳温度,原因是____________________。曲线②35℃数据点是在_____________℃时测得的。

            • 7.

              [生物--选修1:生物技术实践] 

              由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种(过程如图甲所示)。

              (1)图甲中,过程①需要的酶有                                   。为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以                作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是                                        

              (2)某间学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是                ;推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

              (3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种________菌的发酵罐需要先排气,其原因是__________________________。

            • 8. 玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下:                                                                               
              (1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_______法或稀释涂布平板法计数。

              (2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。

              (3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本。

              (4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、_______和_______三步。

            • 9. [生物——选修1:生物技术实践](15分)

              酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答: 

              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物                      。 

              (2)实验室可采用                           法进行菌种纯化,所用培养基需经_________________法进行灭菌。 

              (3)为了保持所获得菌种纯净,需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏,也可以利用____________的方法长期保存。

              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持            ,(1分)理由是                     。 

            • 10. 每年有大量农作物秸秆有待无公害处理.秸秆富含纤维素,可利用下图流程变废为宝.请回答下列问题:

              (1)人们常从土壤中分离纤维素分解菌,对应的实验流程是:土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到________培养基上→挑选产生________的菌落.

              (2)微生物培养时,将微生物接种到固体培养基上的方法有________和________,这两种方法所用的接种工具在使用前应分别进行________处理.

              (3)葡萄糖 酒精,该阶段常用的发酵菌是________.发酵期间,培养液温度应控制在________,发酵装置必须密封的原因是________.

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