[生物——选修1：生物技术实践]

胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，可以作为食用色素。最近还发现天然胡萝卜素具有使癌变细胞恢复为正常细胞的作用。请回答下列问题；

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，在温度及气体环境分别为________条件下最适合其生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，可选用________法接种。接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的是________。

（4）酵母菌菌体裂解后经离心、萃取、浓缩可获得胡萝卜素，可通过________比较不同种类酵母菌的产胡萝卜素能力。所获得胡萝卜素纯度可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照为________。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列与微生物有关的问题。

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生脲酶，该酶能将尿素分解成________。

（2）为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解茵的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

（注：“＋”表示有，“－”表示无）

培养基甲________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________；培养基乙________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________。

（3）如分别取0.1mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中该细菌数为________个。

（4）纯化细菌时使用的培养基一般用________法灭菌，________（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

（5）某小组采用平板划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________。

（6）尿素分解菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________（填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”）。

[生物——选修1：生物技术实践]

   某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按下表处理：

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是________。若E组的培养基表面有菌落生长，说明了________。

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供________和________。

（3）实验过程中“待培养基冷却至室温”的目的有________。

（4）实验结束后，对使用过的培养基应进行________灭菌处理。

[生物—选修1：生物技术实践]

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入________制成选择培养基进行分离。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________，常用________法统计样品中活菌的数量，统计结果一般用培养基中出现的菌落数表示。统计培养液中微生物（如酵母菌）的数量还可采用________的方法，用血细胞计数板计数。

（3）橘皮压榨后得到的糊状液体除去其中的固体物后获得乳状液，从乳状液中分离得到芳香油，要加入无水硫酸钠，其作用是________。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是________。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的蛋白酶分解。最终使________含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

[生物——选修1：生物技术实践]

焚烧秸秆是导致雾霾的原因之一。下图是工业上利用秸秆中的纤维素发酵生产酒精的基本工艺流程：

回答下列问题：

（1）步骤①需要的微生物大多分布在       的环境中。②中获得的酶是一种复合酶，其中       能将纤维二糖分解成发酵所需的葡萄糖。

（2）为了获得酵母菌，可取土样将其稀释，用涂布器涂布到多个琼脂固体培养基的表面，这种方法称为       。下图所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是       。

用这种方法统计样本菌落数时，需要设置空白对照组，原因是       。

（3）步骤③要注意对接种器材进行       ；步骤④一般需将温度控制在       。

牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。回答下列问题：

（1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为________。牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的________能使纤维素分解成纤维二糖。

（2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用________法进行灭菌。

（3）为了从牛胃的食糜中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以________作为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是________。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是________。

自生固氮菌可不与其他植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：

(1)在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是________(填序号)

①酒精灯　②接种环　③高压蒸汽灭菌锅　④棉塞

(2)要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于________培养基上进行筛选。

(3)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是________。

(4)涂布培养四天后，可通过观察________的形态特征来统计土壤中自生固氮菌的种类。

(5)为了进一步筛选高效固氮菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果如下表：

①培养过程中需不断振荡的目的是____________________。

②可以采用________方法对固氮菌进行计数，假设计数室长和宽均为1 mm，深0.1 mm，每个小方格中平均有7个固氮菌，则10 mL培养液中有固氮菌的数量为________个；如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应________。

③由上述结果可知，________菌的固氮效率最高。

请回答下列有关的问题：

（1）鉴定尿素分解菌需在培养基中加入        指示剂。纤维素分解菌的筛选方法                              

（2）制作泡菜时，所用盐水使用前，盐水需要         。为了缩短制作时间，有人还会在盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是         。

（3）在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是                                。

（4）水中蒸馏的方法对于有些原料不适用。这是因为水中蒸馏会导致                   、和                 等问题。

（5）萃取的效率主要取决于                     和                ，同时还要受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。