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            • 1.

              营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后,微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏,使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物,为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题:

              (1)过程①的接种方法为__________,与基本培养基(只含碳源、无机盐、水)相比,待测培养皿中的特有的成分有__________。

              (2)进行②过程培养时,应先将丝绒布转印至基本培养基上,原因是__________。从__________培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。釆用影印法培养的优点是__________。

              (3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定,实验人员进行了如下操作:

              ①用接种针挑取__________(选填“菌落A”或“菌落B”)接种于盛有完全培养液的离心管中,28℃振荡培养1〜2天后,离心,取沉淀物用__________洗涤3次,并制成菌悬液。

              ②吸取lmL菌悬液加入无菌培养皿中,倾注15mL融化并冷却至___________℃的基本培养基,待其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域,标记为A、B、C、D、E。

              ③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末(如下表所示),经培养后,观察生长圈出现的区域,从而确定属于何种氨基酸缺陷型。   

              组别

              所含氨基酸

              A

              组氨酸

              苏氨酸

              谷氨酸

              天冬氨酸

              亮氨酸

              B

              精氨酸

              苏氨酸

              赖氨酸

              甲硫氨酸

              苯丙氨酸

              C

              酪氨酸

              谷氨酸

              赖氨酸

              色氨酸

              丙氨酸

              D

              甘氨酸

              天冬氨酸

              甲硫氨酸

              色氨酸

              丝氨酸

              E

              半胱氨酸

              亮氨酸

              苯丙氨酸

              丙氨酸

              丝氨酸

              在上述鉴定实验中,发现在培养基A、D区域出现生长圈,说明该营养缺陷型菌株属于___________。

            • 2. 某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养.下列说法正确的是()

                   

              A.  蛋白胨可为大肠杆菌生长提供氮源和维生素等营养

                   

              B.  牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pH

                   

              C.  倒平板操作中,待平板冷却凝固后将平板倒过来放置

                   

              D.  大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法
            • 3.

              苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1)苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有_____________。

              (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_____________,以达到富集苯酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步_____________,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加_____________。

              (3)下图为连续划线法示意图,在图中_____________ (填图中序号)区域更易获得单菌落。


              (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为________________(单位省略)。

              管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度(mg/ L)

               

               

               

               

               

              1

              如果废水为50 mg/ L 苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释____________(填序号:①5   ②10   ③20)倍后,再进行比色。

            • 4. 下列有关生物技术实践操作的叙述,错误的是(  )
              A.倒平板操作中,待平板冷却凝固后将平板倒过来放置
              B.利用平板划线法分离纯化大肠杆菌时,只能分离大肠杆菌但不能对其进行计数
              C.在腐乳制作过程中,向腐乳表面喷水有利于毛霉菌丝的生长
              D.配制植物组培的培养基时,用等量葡萄糖代替蔗糖不会影响细胞的分裂分化
            • 5. 多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用,是土壤、河水中常见的污染物之一.如图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤.请回答:

              (1)步骤①~③的培养过程中,培养液中加入多环芳烃菲作为唯一碳源,目的是______.
              (2)步骤①~③的培养过程中,需将锥形瓶放在摇床上振荡,一方面使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率,另一方面能______.
              (3)步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是______.
              采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是______.
              (4)接种环通过灼烧来灭菌,完成步骤④中划线操作,共需灼烧接种环______次.
              (5)为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株,研究人员又对菌种Q进行了诱变处理,得到突变株K,为了比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力,设计了下列实验,请补全实验步骤:
              ①取9个锥形瓶均分成三组,编号为A、B、C.
              ②______.
              ③______.
              ④28℃恒温培养3天后,测定锥形瓶中多环芳烃菲的降解率.
            • 6.

              利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌(单细胞真菌),未突变菌不能在含有浓度为10﹣5M的β━紫罗酮的培养基上生长.菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色.图甲为选育及提取获得β━胡萝卜素流程. 

              (1)三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是________.   

              (2)为选出高产突变菌种,还应在培养基中添加________.   

              (3)进行③过程时,应选取________色的菌落接种至液体培养基.为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种,采取重复________(填图甲中数字)过程.   

              (4)固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示.该同学的接种方法是____。 

              (5)过程⑥是________,用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品,结果发现颜色较浅,导致该现象的原因可能是萃取时,_______________________________.(写出两点)

            • 7.

              养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸,这两种物质可由硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验中()

              A.需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基,以筛选硝化细菌
              B.应将培养基置于30℃恒温无菌环境下培养12h后,统计培养基中全部菌落数
              C.可以采用平板划线法进行接种,还需与未接种的空白培养基同时培养
              D.因底泥中微生物种类很多,故采集底泥使用的工具不需灭菌,但全部接种过程均需在火焰旁进行
            • 8. 有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境,研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解、分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是______.
              (2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和______,这些植物激素一般需要事先单独配制成______保存备用.
              (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是______,划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误有______.
              (4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液作图乙所示实验,该实验的假设是______,该实验设计是否合理?为什么?______.
            • 9. [选修1:生物技术实践](15分)

              生产实践中应用的菌种主要来土壤,从土壤中分离微生物的一般实验流程是:土壤収样—选择培养—梯度稀释—鉴別培养。请回答:

              (1)欲从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择在      环境中采集土样,所选择的培养基应以       作为唯一碳源。

              (2)Taq耐热菌的发现和分离为基因工程的发展作出了突出贡献。分离Taq耐热菌所需要的特殊培养条件是             ,在生物休内进行DNA复制所必需而PCR技术中不需要的酶是            

              (3)下图是纯化微生物培养的效果图。请冋答:

              ①先配制好的培养基在接种前都要进行             灭菌,在整个微生物的分离和培养过程中,一定要注意在            条件下进行。

              ②获得图A效果的接种方法是            ,获得图B效果的接种方法是           

            • 10.
              现有某微生物的5 种突变体(1~5),它们都不能合成生长所需的物质G,但是该微生物在合成途径中,物质A、B、C、D、E 都是必需的,但不知它们的合成顺序;于是分析了这几种物质对各种突变体生长的影响.结果如下:(“+”表示加入相应物质微生物能正常生长,“-”则不能正常生长).
              请分析突变体4在哪两种物质之间合成被阻断(  )
              加入的物质
              A B C D E G
              突变体 1 - - + - - +
              2 - - + - + +
              3 - - - - - +
              4 + - + - + +
              5 + - + + + +
              A.B和D
              B.D和A
              C.A和E
              D.E和C
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