[生物——选修1：生物技术实践]

生活中，部分食品或饮料与微生物的发酵密不可分。回答下列关于微生物的培养及其运用的问题：

（1）不同微生物对营养的需求存在一定差异，但都能归纳为4类营养，即水、________、氮源和________。

（2）为增加分泌高效果胶酶的微生物的浓度，应该用________（填写物理状态）培养基。探究不同微生物分泌的果胶酶的活性实验，所用材料是果汁，那么该实验的自变量是________。

（3）制备果酒时，发酵菌为________，该发酵菌能将葡萄糖转化成酒精和CO₂，如图是某同学设计的发酵装置，该装置的优点有________。

（4）制备果醋时，发酵菌在________（填“有氧、无糖”“无氧、有糖”或“有氧、有糖”）条件下，能将乙醇转化成________，进而转化成乙酸。

【选修1—生物技术实践】

   在橘子成熟的季节，人们通常用它制作精油、果汁、果酒、果醋，简要流程如下：

（1）图中步骤③利用橘皮提取精油过程中，为了提高出油率需要将橘皮干燥去水后，用________浸泡处理，精油提取时一般采用________（填“蒸馏法”“萃取法”或“压榨法”）。

（2）图中步骤②制备果汁时为了提高橘子出汁率，常用________酶处理果汁，并且采用________技术来提高酶的使用效率、节约生产成本。

（3）图中步骤④酿制果酒过程中，图中步骤④酿制果酒过程中，即使有少量醋酸菌混入也因生活环境不适而不能存活，请说明理由________。

（4）工业上在进行图中步骤⑥酿制果醋时，为了提高果醋产量，需要得到纯化的醋酸菌菌种，在菌种纯化过程中使用________接种方法可以同时进行计数，获得的纯化菌种可以用________的方法进行长期保存。

[生物——选修1：生物技术实践]

下图是苹果醋制作的流程简图，请分析回答下列问题：

（1）图中显示苹果醋的制作是经过微生物两次发酵所获得的，两次发酵所利用的微生物分别是________和________。

（2）过程①和过程②所需要环境条件的最大不同点是________。

（3）过程②所需要的微生物可以从食醋中分离获得。下图是分离获得苹果醋制作所需微生物的流程图：配置培养基→培养基灭菌→接种→培养→选择所需菌落

①培养基的灭菌常用________。

②接种常用的方法有________和________，其中可以用于微生物计数的方法是________。此方法在进行时，一般每种稀释倍数的溶液至少涂布________个平板，选择菌落数在________的平板进行计数。除了这种活菌计数法外，________也是测定微生物数量的常用方法。

蔬菜在经过腌制及调味之后可制成泡菜，有特殊的风味。现代人在食材取得无虞的生活环境中，还是会制作泡菜。请回答下列问题：

(1)制作泡菜时，为消灭杂菌，所用盐水需先       。泡菜制作过程中，乳酸发酵发生在乳酸菌细胞的        中，该过程中亚硝酸盐含量的变化为        。

(2)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是                   ，主要原因是                     。

(3)为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快的乳酸菌，科研人员做了如下实验。

①在无菌操作下，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO₃的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后，挑选出菌落后，继续在MRS平板上用          法分离，得到单菌落。

②将分离得到的乳酸菌分别接入多个MRS液体培养基中，相同时间内间隔取样测定pH，挑选出在培养基中            的乳酸菌为最佳。

  (1)当酵母细胞处于5％的蔗糖溶液中时，可构成一个渗透系统。由图中的______(填序号)将该渗透系统分隔为外界溶液(5％的蔗糖溶液)与______(填序号)二个区域。

(2)探究“培养液中酵母菌细胞呼吸方式”的实验中，若在氧气不充足条件下，丙酮酸氧化分解的场所有____         __(填序号)。

(3)家庭“制作葡萄果酒”中，发酵所需的菌种主要来自于__            ____。

(4)制备固定化酵母细胞时，若操作的其他过程符合规范，但观察制作的凝胶珠颜色过浅，最可能的原因是___             ___。

(5)在探究“培养液中酵母菌种群的数量变化”的实验中，某学生的部分实验操作过程如下：A．将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的锥形瓶中，把酵母菌培养液放置在冰箱中培养；B．静置一段时间后，用吸管从锥形瓶中吸取培养液；C．在血球计数板中央滴一滴培养液，盖上盖玻片；D．用滤纸吸除血球计数板边缘多余培养液；E．将血球计数板放在载物台中央，待酵母菌沉降到计数室底部，在显微镜下观察、计数；F．若出现气泡，则应重新滴加样液。该同学实验操作中错误的步骤有____                __(填字母)。

请回答下列现代生物技术中实验操作及目的等有关的问题：

（1）果酒制作过程中，需要先通气后密封，通气的目的是               ；密封的目的是                    。

（2）微生物接种方法很多，常用于统计菌落数目的接种方法是                   ；在

接种操作中，需要在酒精灯的火焰旁进行，其原因是                     。

（3）在植物组织培养过程中，需要对外植体进行         （填“消毒”、“灭菌”），常用体积分数为          的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞。

（4）根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，可用      的方法获得胡萝卜素；提取的胡萝卜素粗产品可通过       方法进行鉴定和分离。

    苹果醋具有营养丰富，增强机体免疫力，护肤养肝等多种功效，以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如下图1，请分析回答：

(1)图1甲过程中使用的微生物是________，它是的代谢类型属于________。发酵温度控制在18℃～25℃，经过10—12天后，若检测样液中是否产生酒精，可以用________来检验。请写出该过程的化学反应式________。

(2)图1乙过程需在________(填“有氧”或“无氧”)条件下进行，请写出该过程的化学反应式________。使用的醋酸菌可以从食醋中分离纯化获得，如图3操作是分离纯化过程中的利用________法进行接种。

(3)为了保持菌种的纯净，对于长期需要保存的菌种，可以采用________的方法。

(4)某同学尝试自己利用图2装置制果酒，制作过程中进气口应________，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是________。

苹果酒、苹果醋、苹果汁等是人们餐桌上的常见食品。请结合相关知识回答以下问题： 

（1）如图所示是在苹果酒的基础上制作苹果醋的流程图。

过程②常用的发酵菌是               ，可以在食醋中获得，分离和纯化该微生物的方法如下：第一步：配制培养基。根据物理性质，培养微生物常用的培养基为                     。 

第二步：采用                  法对培养基进行灭菌处理。

第三步：                              。

第四步：培养温度控制在                。

第五步：挑选符合要求的菌落。

（2）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10^－4、10^－5、10^－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是              ，此对照实验的目的是证明              过程中是否被杂菌污染。

（3）苹果泥与果胶酶混合能提高苹果的出汁率并使浑浊的果汁变澄清，其原因是                                   。

蔬菜在经过腌制及调味之后可制成泡菜，有特殊的风味。现代人在食材取得无虞的生活环境中，还是会制作泡菜。请回答下列问题：

(1)制作泡菜时，为消灭杂菌，所用盐水需先       。泡菜制作过程中，乳酸发酵发生在乳酸菌细胞的        中，该过程中亚硝酸盐含量的变化为        。

(2)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是                   ，主要原因是                     。

(3)为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快的乳酸菌，科研人员做了如下实验。

①在无菌操作下，将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO₃的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后，挑选出菌落后，继续在MRS平板上用          法分离，得到单菌落。

②将分离得到的乳酸菌分别接入多个MRS液体培养基中，相同时间内间隔取样测定pH，挑选出在培养基中            的乳酸菌为最佳。