养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验中

[生物选修1 生物技术实践]

某生物兴趣小组的同学，利用洗衣机内桶背面的污垢进行了相关实验。下图是某同学分离和培养洗衣机中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。

（1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，该操作称为________。

（2）在培养洗衣机中细菌的实验中，应在接种前检测固体培养基是否被污染，具体检测的方法是________。

（3）图2是平板划线法接种操作示意图，操作顺序是A→B→________（用字母和箭头表示）；以上操作中存在错误的步骤是________（用字母表示）。

（4）将以上接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置，原因是________。

（5）在检测洗衣机的污垢中是否含微生物时，也有同学先将污垢制成一定浓度的水样溶液，然后用移液枪取0.1ml菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固体培养基的表面进行培养，这种方法称为________。经一段时间培养后，图3中发现有纤维素分解菌，筛选纤维素分解菌的方法是________。

[生物—选修1：生物技术实践]

生物技术与我们的生活息息相关。请根据所学知识，回答下列有关问题：

（1）在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量会发生变化，测定亚硝酸盐含量的方法是________。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为________，进而可能引发人体细胞癌变。

（2）制作葡萄酒的菌种主要来源是________。检验是否产生酒精可在________条件下，用________试剂检测。

（3）若要提高果酒的产量，发酵过程中要控制好哪些条件？________（至少写出两项）。

（4）为获得一种能高效降解有机磷农药的细菌，应使用含有________的选择培养基；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，目的是________。

“影印培养法”是一种使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的接种培养方法。科学家采用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素突变是自发产生的还是在链霉素的作用下诱发产生的，操作步骤和实验结果如图所示。

请回答下列问题：

（1）为了满足大肠杆菌生长的需求，在制备培养基时需提供水、无机盐和    等营养物质，除考虑营养条件外，还要考虑渗透压、特殊营养物质、氧气的要求和酸碱度等，如在培养大肠杆菌等细菌时需将酸碱度调至    。

（2）在大肠杆菌培养过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌，实验用的培养基常用的灭菌方法是    。为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该    。

（3）3号、7号、11号培养皿中加入链霉素的作用是    ，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明    。

（4）根据实验结果可得出的研究结论是    ，依据是    。

[生物选修模块1：生物技术实践]

请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

（1）从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于       (选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是     。

（3）在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行     (消毒、灭菌）操作者的双手需要进行清洗和       。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能       。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和                  。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的        。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是               。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过            处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（4）以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作,原因是         

回答下列关于微生物的问题。

1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的螺旋状短杆菌，具有强的脲酶活性，是慢性活动性胃炎、消化性溃疡和胃癌的主要致病原因。

  A.为古细菌，因为其能生活在酸性环境下

  B.储存其遗传物质的主要场所是拟核，该菌含有质粒，可以为基因工程提供载体

  C.该菌合成和加工脲酶所涉及的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体等

  D.该菌对青霉素、利福平敏感  

 下表是某培养基的配方：

 A.空气传播     B.接触传播     C.媒介物传播     D.病媒传播

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入      制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是       。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是            。

（3）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在     期，花药培养成功率高。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是                ；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是                 。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的         分解。最终使         含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

（6）血红蛋白的分离一般采用法和电泳法，前一种分离方法是根据来分离蛋白质。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

[生物——生物技术实践]

幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的革兰氏阴性螺旋状杆菌，具有强的脲酶（能降解尿素）活性，其代谢类型属于异养厌氧型（氧气浓度在5％～8％左右适合，完全无氧或空气环境中无法生存），这种细菌是慢性胃炎、甚至胃癌发生的元凶。

（1）为了对胃炎患者的胃粘膜提取物稀释样液中幽门螺杆菌进行分离，应将样品稀释液接种于以________为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在________条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

（2）分离培养幽门螺杆菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有________。

（3）欲检测上述培养基中是否具有幽门螺杆菌这类细菌的存在，向培养基中添加酚红指示剂，培养基中菌落周围显示红色环带，即表明这类细菌的存在，这种检测过程的机理是________。

（4）采用液体培养基培养幽门螺杆菌，为了测定菌液中的菌体数量，一般采用________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计________的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏________（填“大”或“小”），原因是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。请回答下列问题：

（1）该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用________法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有________（填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

多不饱和脂肪酸需要从膳食中摄取，人体不能直接合成。科学家通过转基因手段将ω－6脂肪酸脱氢酶基因（FAT1）整合到肉牛基因组，以期提高肉牛体内的多不饱和脂肪酸含量，促进人体健康。请回答下列问题：

（1）将ω－6脂肪酸脱氧酶基因导入肉牛细胞中常用的方法是________，在用PCR技术扩增目的基因时，需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、4种原料、________和________。

（2）体外受精获得受精卵时，将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是________。

（3）胚胎移植前可选择发育良好、形态正常的________（填胚胎发育时期）进行________，以实现同卵多胎。

（4）该转基因牛还可以用核移植的方法繁殖，用核移植的方法得到的动物称为________，用于核移植的供体细胞一般选择10代以内的细胞，目的是保持细胞正常的________。