知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．有些细菌可分解原油，从而消除有原油泄露造成的土壤污染．某同学欲从污染的土壤中采用富集培养的方法筛选出高效降解原油的细菌、经过的一般步骤是采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定，实验过程如图1所示，请分析回答：

（1）如图A、B是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法．
图A所示的接种方法是 ______ ，图B所示的接种方法是 ______ ．
（2）在筛选过程中，应将 ______ 接种于以 ______ 为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养培养基属于 ______ 培养基．
（3）在操作④时，为避免培养液中菌体浓度过高，对培养液进行稀释处理．各取0.1mL 已稀释10³倍的菌液分别接种到图A 的三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则原始培养液③中每毫升菌体数为 ______ ．
（4）①→③重复培养的目的是 ______ ．在培养过程中，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液中 ______ 的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 ______ ．
（5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过 ______ 处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散．

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2．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先箝要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释．梯度稀释的目的是 ______ ．
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用除了可以中和产生的乳酸以外，还可以 ______ ．分离纯化时应挑选出 ______ 的菌落作为候选菌．
（3）若该同学采用稀释涂布平板法来检测泡菜滤液中乳酸菌的含量，先将lmL泡菜滤液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每毫升滤液中的活菌数为 ______ 个．
（4）若对筛选得到的乳酸菌进一步纯化，宜采用的纯化方法是 ______ ．乳酸菌在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的 ______ ．

难度：较易

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3． “煤城”淮北的煤矸石堆积如山．腐殖酸（大分子有机物）是煤矸石的主要成分之一，直接应用效果差．研究人员从煤矸石发酵的环境中筛选得到了能降解腐殖酸的细菌H4．回答下列问题：
（1）为了从自然界中获得H4单菌落，可从煤矸石发酵的环境中取样，并应选用以 ______ 为唯一碳源的培养基进行培养，除此之外培养基中还应含有 ______ ．
（2）利用平板划线法纯化H4菌株时，划线前需要 ______ 接种环．从第一区域划线的 ______ 开始往笫二区域内划线．
（3）若要测定培养液中H4活菌数量常用 ______ 法进行计数，其统计数据往往比真实值 ______ （高/低），原因是 ______ ．

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4．

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短．科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时，优化保质方法提供依据．主要研究过程如下：
①豆浆变质处理将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中，密封、37℃条件下，放置7d后，豆浆发生变质．
②腐败细菌的初步分离和计数取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后．统计各培养基上菌落种类和数量．结果如表：

细菌序号	菌落特征	菌落直径/mm	菌落数/个
细菌序号	菌落特征	菌落直径/mm	豆浆A	豆浆B	自制豆浆
S1	表面有白色绒毛，圆形边缘不规则	5	5	3	7
S2	白色，表面无绒毛，有白色液滴	1～2	18	11	24
S3	黄色，表面无绒毛，如同黄色液斑	20-30	11	7	15

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图．
请回答下列问题：
（1）步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是 ______ ，步骤②中培养基的常用灭菌方法是 ______ ．
（2）步骤②中适宜采用的接种方法是 ______ ．区分菌落种类的依据是 ______ ．统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防 ______ ．
（3）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽．步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是 ______ 为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在 ______ 左右．
（4）与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是 ______ ．

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5．某研究小组将一组相同圆纸片放入不同浓度的麦迪霉素（一种抗生素）溶液中浸泡后，放在接种有大肠杆菌的培养基上培养，实验结果如图．请分析并回答下列问题：
（1）将装有培养基的灭菌包装入 ______ 中灭菌，加热初期，必须先将锅内的 ______ 彻底排除后，将锅密闭，再继续加热灭菌．
（2）倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，倒置的原因是 ______ ，倒置后用记号笔在培养皿的 ______ （填“皿盖”或“皿底”）上标明培养基的种类、培养日期、平板上样品的稀释度、培养微生物名称及制作者姓名等信息．
（3）该实验中，宜使用 ______ 方法接种大肠杆菌，在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行无菌操作．为了避免无关变量对实验结果的影响，对圆纸片的要求是 ______ ．
（4）实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为 ______ （填图中数字）的麦迪霉素，原因是 ______ ．

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6．研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，进行了如下操作．请回答：
（1）取样与选择培养：在某热电厂烟囱周围区域采集土样，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要 ______ ．选择培养的目的是增加 ______ 浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入SO₂气体，驯化几分钟后接种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，与此同时逐步降低培养基的pH．由此分离得到的脱硫细菌具有 ______ 和 ______ 能力．
（3）培养、观察与应用：为获得大量的目的菌用于生产，在培养过程中技术人员需连续取样进行计数，计数方法一般有稀释涂布平板法和 ______ 法．当用前者进行计数时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的 ______ ，统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目．通常情况下，用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ______ ；当用后者进行计数时，需在 ______ 上的计数室内计数．

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7．回答下列有关微生物培养的问题．
某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．
（1）培养基中加入化合物A的目的是 ______ ，这种培养基属于 ______ 培养基．
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ______ ，同时，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是 ______ ．
（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量 ______ 的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量 ______ ．
（4）转为固体培养基培养时，常采用 ______ 的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
（5）在培养基的配制过程中，操作方法包括以下步骤，其正确顺序为 ______ ．
①溶解 ②调pH值 ③定容 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量 ⑦灭菌
A．①②⑥⑤⑦③④B．⑥①③②⑤④⑦
C．⑥①②⑤④⑦③D．①②⑤④⑥⑦③
（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行 ______ 处理后，才能倒掉，这样处理的目的是 ______ ．

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8．菌落中细菌被噬菌体杀死形成的透明区域称为噬菌斑．大肠杆菌的直径大小通常在0.5〜3μm．如图为分离获得噬菌体的过程，请回答下列问题：

（1）观察噬菌斑的培养基从物理性质上分析是一种 ______ 培养基．浓缩的蛋白胨可为大肠杆菌提供 ______ 、 ______ 等营养物质．
（2）上述步骤中使用污水的目的是 ______ ．步骤B的目的是 ______ ．
（3）检查滤液中是否有噬菌体存在，可诜择 ______ 作为观测指标．写出操作简要步骤： ______ ．

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9．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，井进行了细菌分离等工作．回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ______ ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分射接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为 ______
（2）该小组采用平扳划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过 ______ 灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是 ______ ．
（3）示意图A和B中， ______ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果．
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养．结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快．分析其原因是：振荡培养能提高培养液中 ______ 的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 ______ 的利用率．

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10．微生物与基因工程：
以下是以大肠杆菌为材料的实验．下表是大肠杆菌培养基的配方．
成分蛋白胨牛肉膏 NaCl 蒸馏水 pH
含量 10g 5g 10g 1000ml 7.0
（1）表中各项成分中，能承担生长因子作用的是 ______ 能提供氮源的是 ______
利用转基因技术可以生产出更多廉价的胰岛素．如图为转基因实验过程示意图，其中中数字表示相应过程．
天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因；人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外，还含有含氨苄青霉素抗性基因．

若lacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落圈；若lacZ基因中插入了外源基因，带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，将形成白色菌落．此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功．
（2）目的基因是 ______
（3）过程①②一般需要能产生 ______ 的限制性内切酶；过程③④需要 ______ 酶
（4）用于目的基因受体的大肠杆菌质粒应选择不含氨苄青霉素抗性基因，原因是 ______
（5）图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外，还应加入 ______ 等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌．
（6）将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养皿内培养，为保证获得单个菌落，常用的接种方法是 ______
（7）以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒．培养一段时间后出现三种类型：菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长．
成功导入重组质粒的菌落圈的表现是 ______
那些在培养基中不能生长的原因是 ______ ．

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成分	蛋白胨	牛肉膏	NaCl	蒸馏水	pH
含量	10g	5g	10g	1000ml	7.0