土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

实验原理：

固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

实验步骤：

步骤1  取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72h。

步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3～4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如表）。

分析回答：

（1）从物理形态看，培养基A属于_______培养基。培养基中磷源应该是______________。

（2）步骤1中接种方法是__________________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

（3）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_____________。

（4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37℃、200 r·min^-1 摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到下图所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是___________________________________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是_______________。

下图表示微生物实验室培养中的部分操作。请分析回答：

(3) 甲同学按步骤④进行操作，据图分析，采用的接种方法称为          ，其操作的两处不当之处分别是         、         。在老师的指导下，该同学按正确的方法重新操作，则经培养后菌落的分布情况最可能是下图中的         。

(4) 乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验，其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示，推测该同学接种时可能的操作失误是        。

下表为某微生物培养基的配方，请回答相关问题：

（1）配制培养基流程是_____________________________________并灭菌，常用的灭菌方法是______________。       

（2）根据培养基的成分判断，该培养基能否用于分离土壤中分解尿素的细菌？_______，原因是_________________________________。

（3）为检测尿素分解菌是否存在，在接种之前还应进行的操作是往培养基中加入_________，若有尿素分解菌的存在，则将会出现_____________。

（4）玉米是重要的粮食作物，是很好的生物学实验材料，在副食品生产上有广泛的应用，经深加工后可生产酒精、玉米胚芽油、葡萄糖等产品（流程如下）。请回答相关问题：

①玉米秸杆富含纤维素，水解用的纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即______________________________________。

②玉米胚芽油不易挥发，可选用萃取法提取，萃取的效率主要取决于____________________________。

③提高萃取效果的方法一般是_______________________________________________________________。

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的培养基中应加入_____作为碳源，从功能上讲，该培养基属于

_________培养基。②中不同浓度碳源的培养基________ (填“影响”或“不影响”)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用______________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于____________________________________________________；使用______________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是__________________________________________________________。

(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？

_______________________________________________________（至少填两种方法）。

选修1：生物技术实践]

 临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。                           

回答下列问题：

（1） 为了从样本中获取致病菌菌落，可用_______法或_________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2） 取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3） 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______（填“敏感”或“不敏感”）；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____（填“敏感”或“不敏感”）；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。

为探究大肠杆菌CV101菌株和CV103菌株的营养需求，某团队在营养成分相同的含醋酸盐的培养液中分别接种CV101菌株和CV103菌株，并置于相同且适宜的环境中培养，每隔一段时间统计两种菌株的生长状况。实验数据如下图所示，回答下列问题：

（1）醋酸盐培养基从物理性质上来看属于________培养基，该培养基主要应用是________；从功能上来看属于________培养基。

（2）由图可知：更适应醋酸盐培养基环境的菌株是________，其依据是________。

（3）若要统计培养30小时后醋酸盐培养基中的CV101活菌数，为保证能在固体培养基上获得单个菌落，接种前，需取1mL该菌液进行________处理。

（1）分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基。配制培养基时，在各成分都溶化后和倒平板前，要进行的是_____________、分装和灭菌。对培养基进行灭菌的常用方法是______。倒平板时，一般需冷却至50 ℃左右，在酒精灯火焰附近操作。依功能看，该培养基属于_________培养基。

（2）接种以前进行的一系列稀释操作，目的是在培养基表面形成________________，这种接种方法是_____________________。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数。如果图示过程接种的培养基上平均有40个菌落，则1 g土壤中大致的活菌数量是__________个。该方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目少，其原因是_____

（3）由于植酸钙的不溶解性，可使培养基形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，______是产植酸酶的理想菌株。

回答下题：

(一） 酿酒、造醋是我国的传统技艺，为了探究与改进制造工艺，进行了相关研究。请回答有关问题：

（1）目的菌株筛选后应该利用     培养基进行扩大培养，       是消除污染杂菌的通用方法。

 (2)制作葡萄酒过程中，为了酵母菌迅速发生作用，可加少量      混匀。将葡萄浆放入发酵瓶，装量不超过      （A.1/2 B.2/3 C.3/4 D.100%）,当发酵瓶       表示发酵完毕。

 (3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至       ，将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒-水混合物中，混匀，并调PH至       后，倒入发酵瓶。

（二）毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。请回答相关问题：

(1)过程①中构建重组表达载体所需要的酶是限制性核酸内切酶和      。（A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.解旋酶）

(2)在过程②中，用       处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞，置于    中培养。

(3)在过程③中，一般用     激素处理供体母牛，使其超数排卵；对供体母牛和代孕母牛进行           处理。

 (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是          。在胚胎移植前，通过                技术可获得较多胚胎。

(1)蓝莓富含花青素等营养成分，具有保护视力、软化血管、增强人体免疫力等功能。某同学尝试用蓝莓来制作蓝莓果酒和蓝莓果醋。

①制酒中利用的微生物是________，取样后可用________观察该微生物。发酵时一般要先通气，通气的目的是________________。制酒过程中可用________检验酒精的存在，检验后颜色变成灰绿色。

②酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，分析其原因是________________。醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源________(填“充足”或“缺少”)。

③酿制蓝莓果酒时，并不需要对蓝莓进行严格的消毒处理，这是因为在________的发酵液中，绝大多数微生物因无法适应这一环境而受抑制。

④为鉴定蓝莓果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测和比较________作进一步的鉴定。

(2)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

①根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________(填“能”或“不能”)，原因是__________________________________。

②培养基用________方法灭菌，培养皿用________方法灭菌，等平板冷却凝固后应将平板如何操作以免造成污染？操作是___________________。

③要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中活菌数。

④培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是________________________________________________。

⑤实验中使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

(3)为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响，以及固定化藻对含Zn^2＋污水的净化作用，科研人员用筛选到的一株绿球藻进行试验，流程及结果如下。请回答下列问题：

—→—→

①实验中的海藻酸钠作用是________，CaCl₂的作用是________。

②为洗去凝胶球上残余的CaCl₂和其他污染物，并保持绿球藻活性，宜采用________洗涤。若图1中增加一组1.0%海藻酸钠培养24 h后，移去凝胶球，溶液呈绿色，原因是___________________________________________________________。

③为探索固定化藻对含Zn^2＋污水的净化作用，应选用浓度为_____海藻酸钠制备凝胶球。

④图2中空白凝胶球组Zn^2＋浓度下降的原因是________。结合图1和图2分析，固定化藻的实验组24～48 h间Zn^2＋浓度下降速度较快的主要原因是__________；72～96 h间Zn^2＋浓度下降速度较慢的原因有①_________________________________；②________________________________________。（答两点）