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          50条信息

            • 1. 固定化的高温淀粉酶被大规模用于工业生产。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选和固定过程如图1所示。菌株在含有淀粉的固体培养基上可释放淀粉酶分解淀粉,在菌落周围形成透明圈。请分析回答:

              (1)与大肠杆菌相比,嗜热菌DNA碱基组成的特点是                          

              (2)Ⅰ号、Ⅱ号培养基的配制主要包括如下步骤:a.溶化,b.调pH,c.灭菌,d.称量。正确的操作步骤顺序是                 。溶化过程中当琼脂完全熔化后,还需用蒸馏水                 

              (3)将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内,加盖并将排气管插入内层灭菌桶内的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓时,应注意                ,以免漏气。

              (4)1号培养基中以淀粉为唯一碳源,从功能上讲该培养基属于                 。待菌落长出后,应选择                 的菌落接种到Ⅱ号培养基,第二次及以后的划线,总是从                 开始,实验中过程③的目的是                 

              (5)若要保证高温淀粉酶的活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性,则最好选择图2中的                 固定化工艺(填图中字母)。

            • 2.

              土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其添加到有机肥中,改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验:

              实验原理:

              固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。

              实验步骤:

              步骤1  取某地区土样5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72h。

              步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4d后观察菌落特征和透明圈的大小,初步筛选出三种优良解磷菌株(如表)。

              分析回答:

              (1)从物理形态看,培养基A属于_______培养基。培养基中磷源应该是______________。

              (2)步骤1中接种方法是__________________,步骤2中接种环的灭菌方法是________。

              (3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是_____________。

              (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在37℃、200 r·min-1 摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到下图所示曲线。

              ①用摇床进行培养的好处是___________________________________________。

              ②结果表明最优良的解磷菌株是_______________。

            • 3.

              苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品。请回答下列问题:

              (1)②中培养目的菌株的培养基中应加入_____作为碳源,从功能上讲,该培养基属于

              _________培养基。②中不同浓度碳源的培养基________ (填“影响”或“不影响”)细菌的数量,如果要测定②中活细菌数量,常采用______________法。

              (2)④为对照,微生物在④中不生长,在⑤中生长,④与⑤培养基的主要区别在于____________________________________________________;使用______________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是__________________________________________________________。

              (3)实验过程中如何防止其他微生物的污染?

              _______________________________________________________(至少填两种方法)。

            • 4.

              选修1:生物技术实践]

               临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。                           

              回答下列问题:

              (1) 为了从样本中获取致病菌菌落,可用_______法或_________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。

              (2) 取该单菌落适当稀释,用______法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。

              (3) 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A,B,C,D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A_______(填“敏感”或“不敏感”);含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B_____(填“敏感”或“不敏感”);含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________。

              (4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选择抗生素_______。

            • 5.

              为探究大肠杆菌CV101菌株和CV103菌株的营养需求,某团队在营养成分相同的含醋酸盐的培养液中分别接种CV101菌株和CV103菌株,并置于相同且适宜的环境中培养,每隔一段时间统计两种菌株的生长状况。实验数据如下图所示,回答下列问题:

              (1)醋酸盐培养基从物理性质上来看属于________培养基,该培养基主要应用是________;从功能上来看属于________培养基。

              (2)由图可知:更适应醋酸盐培养基环境的菌株是________,其依据是________。

              (3)若要统计培养30小时后醋酸盐培养基中的CV101活菌数,为保证能在固体培养基上获得单个菌落,接种前,需取1mL该菌液进行________处理。

            • 6.

              根据植物有效成分的提取等相关知识回答下列问题

              Ⅰ:胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:

              (1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用___________或平板划线法接种。所用培养基从功能上分属于____________。

              (2)培养酵母菌R时,在提供四种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物对Ph、________________以及氧气的要求

              (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好____________以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用 _________方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是____________

              (4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素,鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为       。

              Ⅱ:植物芳香油提取的最常用方法是___________ ,向收集到的乳浊液中中加入氯化钠有利于________,分离的油层中还需加入__________吸水

            • 7.

              研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如下图所示。


              (1)柚皮易焦糊,宜采用________法提取柚皮精油,新鲜的柚皮干燥去水,并用________浸泡处理。

              (2)培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供________________________。

              (3)做抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

              (4)柚皮油也可以用萃取法来提取,原因是________________________。从下图分析,提高萃取效果的方法是__________________________、__________________________。

            • 8.

              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性.研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示.

                    (1)②过程所使用的接种方法是 ______ 法.①和②步骤中,下列选项需要用到的是      (填序号,多选)。

                  ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

                    (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于 ______ 培养基,从物理状态上来说,Ⅱ号培养基属于固体培养基,配制时应加入 ______ 作为凝固剂.

                    (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是 ______ ;一般对配制的培养基采用 ______ 法灭菌.

                    (4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈;应挑出透明圈 ______ (大或小)的菌落,接种到Ⅱ号培养基.

                    (5)写出两点避免杂菌污染的措施①                   ②        。 

            • 9.

              下图是生物兴趣小组为研究“XXX牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。请分析回答:

              —→—→

              (1)与酵母菌相比,乳酸菌在结构上的主要区别是________________________,________(填“有”或“无”)染色体。

              (2)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙,乳酸菌在________(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙,从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析,本研究使用的培养基属于________(类型)。

              (3)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,把锅内水加热煮沸,必须将锅内冷空气彻底排除后,将锅密闭,继续加热以保证锅内气压上升,达到121℃。灭菌后的培养基应适当冷却后,在________附近倒平板。

              (4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤:

              步骤1:分别取__________________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到50℃左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个__________都置于适宜温度等条件下培养若干天,观察比较培养基中菌落生长情况。

            • 10.
              (12分)自生固氮菌可不与其它植物共生,能独立完成固氮作用,在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株,并对其固氮能力进行了研究。

              请回答下列问题:

              (1)在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中,下列选项不需要的是      (填序号)

              ①酒精灯   ②接种环   ③高压蒸汽灭菌锅   ④棉塞

              (2)要从土壤样品中分离出自生固氮菌,在获得土壤浸出悬液后,可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于         的选择培养基上进行筛选。

              (3) 在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是                    。

              (4)涂布培养四天后,可通过观察           的形态特征来统计土壤中自身固氮菌的种类。

              (5)为了进一步筛选高效固氮菌,研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后,对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量,结果如下表:

              甲菌

              乙菌

              丙菌

              丁菌

              菌量(个/mL)

              2.1×105

              2.5×105

              1.8×105

              2.0×105

              含氮量(K)

              3.32

              4.38

              5.34

              5.32

              ①培养过程中需不断振荡的目的是                               

              ②可以采用               方法对固氮菌进行计数,假设计数室(共由400个小方格组成)长和宽均为 1 mm,深 0.1 mm,每个小方格中平均有7个固氮菌,则10 mL培养液中有固氮菌的数量为        个;如果小方格中固氮菌的数量太多,无法数清,则应               。

              ③由上述结果可知,       菌的固氮效率最高。

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