某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

(1)根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________(填“能”或“不能”)，原因是__________________。

(2)分装培养基的培养皿常用___________方法灭菌，待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时，在____________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止____________________________________________，以免造成污染。

(3)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用_______________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的____________就能大约推测出样品中活菌数。

(4)培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________________。

(5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

（一）下列问题是有关大肠杆菌的培养实验，请回答：

(1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和__________作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的_______。

(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在____________中进行扩大培养，培养液经________后，在LB固体培养基上进行_______，并将培养皿_______放在恒温培养箱中培养，可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及________________，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。

（二）现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。请回答：

(1)果汁中的果胶不仅影响______率，还使果汁浑浊，制备时常加入来自________等微生物的果胶酶。为便于工业化使用，常对酶采用___________技术，常用方法有吸附法、包埋法等。

(2)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其②生产过程中利用了__________的发酵作用，①过程需将温度控制在__________。

(3)若要提高果醋的产量，发酵过程中关键要提供___________、_________等条件。

土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶，从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下

(1)纤维素酶包括_____________________。

(2)题干中第二个步骤是______________，目的是_______________。该步骤要使用液体培养基进行振荡培养, 振荡培养的作用是            （答出1点）

(3)第三步骤梯度稀释后，用________________（接种工具）将菌种接种到培养基的表面。

(4)将适量的_________染料滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围出现__________则说明此种菌能够分解纤维素，从平板中挑取实验效果明显的目的菌株。

(5)如果我们要长期保存纤维素分解菌，可以采用____________方法保存。

（1）筛选产生胡萝卜素的酵母菌R时，可选用_______或平板划线法接种；采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环，其目的是____________。

（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖可为酵母菌R提供_____________；作为无机盐的硝酸盐还可提供_____________。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________，以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是_______________。

（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为_________。

胡萝卜素是一种常用的食用色素，在保护视力方面具有重要功效．从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取胡萝卜素的流程图如下，请据图回答：

(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可用________________法接种菌种；从功能上看，所用培养基为___________培养基。

(2)在培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可提供_____________等营养。

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素，干燥时应控制好_______________，以防止胡萝卜素分解；萃取时一般不直接用酒精灯加热而用水浴加热，因为____________           __。在萃取液浓缩前需要进行__________。

(4)用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素时需用_______________作为对照。

(5)某同学通过植物组织培养获得无病毒高产胡萝卜植株，在操作时不慎污染了培养基。欲确定培养基上的微生物中是否含有纤维素分解菌，可将它们放在__________________________________________________的培养基中培养鉴别。

[生物选修1：生物技术实践]

β－胡萝卜素可用来治疗夜盲症等疾病，也是常用的食用色素。下图为从产胡萝卜素的酵母菌中提取胡萝卜素的基本过程：

（1）培养酵母菌的培养基中一般含有______________等营养成分。要获得大量的酵母菌用于胡萝卜素的提取，应选择__________（填“液体”或“固体”）培养基培养酵母菌。

（2）胡萝卜素萃取过程中，萃取的效率主要取决于_________________________；萃取过程宜采用___________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是____________________________________；提取的胡萝卜素粗品可通过_________________________进行鉴定。

（3）果酒的制作也离不开酵母菌，酒精发酵时一般要将温度控制在___________℃，可用__________________________________检测酒精的产生与否。

（1）微生物的消毒和灭菌：在微生物培养中，对培养基常用          法进行灭菌；如果要检测培养基灭菌是否彻底，可以采用的方法是           观察培养基上是否有菌落产生。

（2）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精；在果醋制作时，运用醋酸菌在         和糖源充足时，将葡萄糖分解成醋酸。

（3）微生物的接种：最常见的可以用于微生物计数的接种方法是         。

酸奶是以牛奶为原料，经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌，经发酵制成。家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题，为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行如图所示操作。回答下列问题。

(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基，当温度大约为       时适合倒平板。

(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布，涂布前要将涂布器         才能涂布。如果培养基上出现不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。区分不同菌落种类的依据是          。

(3)在恒温培养箱中培养一段时间后，3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个，则可以推测酸奶中每毫升含菌数为        个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是        。

(4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，进一步分离纯化乳酸菌用平板划线法，该操作中常使用的接种工具是         。若培养后获得的某个平板，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，则造成第一条线上无菌落的可能操作失误有        、        。

【生物——选修1：生物技术实践】

从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

（1）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_____________，获得图B效果的接种方法是_____________。在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现_____________，表明菌已分离。

（2）对培养基进行灭菌的常用方法是_____________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板_____________。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养(成分见下表）:

注：“+”表示有，“-”表示无，CR溶液（刚果红）。据图判断:

培养基甲____________(填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________________；

培养基乙不能用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是培养基中没有纤维素，不会形成CR纤维素___________颜色复合物。

[生物——选修1：生物技术实践]

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用_________法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是________________________________。

（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是___________；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是________________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________________________________。

（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为________________。

（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使____________________________________，提高营养物质利用率。

（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是______________________________________________________。