[生物——选修3：现代生物科技专题]

   细胞工程与基因工程在生产实践中具有广泛的应用，如图是抗除草剂番茄的培育过程。请回答下列问题：

（1）将抗除草剂基因连接到运载体上需要用________酶，在基因表达载体中除含有抗除草剂基因、标记基因外还必需有________共五部分构成，其中标记基因的作用是________。

（2）农杆菌转化是利用农杆菌中Ti质粒上的T—DNA，使外源基因进入并整合到番茄细胞的________上。

（3）获得抗除草剂基因的番茄细胞经过________过程发育成转基因番茄幼苗。其理论基础是________。

（4）在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加________等物质，作用是________。

[生物——选修3:现代生物科技专题]

请回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：

(1)培育转基因植物过程的核心步骤是            ，其目的是使目的基因在受体细胞中            ，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。

(2)构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的           键。基因表达载体的组成部分包括启动子、终止子、目的基因、            、复制原点等。

(3)组成基因表达载体的单体是             。基因表达载体中的启动子是            识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过            (填过程)合成mRNA。

(4)用两种限制酶XbaⅠ和SacⅠ(两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段。若利用该片段构建基因表达载体，应选用的Ti质粒是如图中的           。

注：图中箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位点

2016年10月，《自然》杂志发表了日本研究人员在实现器官再生中取得的重要进展：利用猕猴（2n＝42）皮肤细胞产生的干细胞让5只患病的猕猴受损的心脏再生。这项研究中使用的干细胞称为诱导性多能干细胞（iPSCs）。请回答：

（1）iPSCs经诱导后形成心肌细胞的分裂方式是________。

（2）下图为猕猴iPSCs分裂过程中每条染色体的DNA含量变化曲线，AB段变化的原因是________，D点时一个细胞中含有________条染色体。

（3）iPSCs可以诱导形成心肌细胞________（能／不能）体现细胞的全能性。iPSCs诱导形成心肌细胞的根本原因是________。

（4）诱导形成心肌细胞过程中存在癌变的风险，癌细胞增殖的显著特点是________。细胞癌变的根本原因是________。

人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

(1)htPA基因与载体用 切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用      技术。 

(2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射 ，使其     。采集的精子需要经过 才具备受精能力。 

(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是     。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎，这体现了早期胚胎细胞的 。 

(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到 ，说明目的基因成功表达。 

下图表示利用某种农作物①和②两个品种分别培育出④、⑤、⑥三个品种的过程，根据图示回答下列问题。

（1）用①和②经Ⅰ、Ⅱ育出⑤的过程称为______育种，所依据的变异原理是_________。

（2）Ⅲ过程常用的方法是______________，获得的④一般称作_____倍体。

（3）Ⅴ过程采用的方法是用______________处理③的幼苗。

（4）能体现细胞具全能性的是方法   （选填Ⅰ～Ⅴ）。与方法Ⅱ相比，方法Ⅳ的优点是                     

下图为转基因抗病香蕉的培育过程流程图，其中质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请据图回答下列问题：

限制酶ApaⅠ      EcoRⅠ            PstⅠ        SmaⅠ识别序列和切割位点

【生物——选修3：现代生物科技专题】

下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。

回答下列问题：

（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_______的方法。②代表的过程是__________。

（2）经过多次传代后，供体细胞中______的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。

（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是______。

（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________。

如图是植物组织培养的简略表示．据此回答：

袁隆平院士因培育出超级杂交水稻而闻名于世。如图是以二倍体水稻(2N＝24)为亲本的几种不同育种方法示意图，请据图回答：

（2）B常用的方法是                  ，其原理是____________________________________。

（3）E表示的育种方法的原理是__________________________。

（4）如果培育一个能够稳定遗传的隐性性状个体，则最简便的育种方法是              ；（用字母和箭头表示）如果培育一个能够稳定遗传的显性性状个体，则最快速的育种方法是_____________。（用字母和箭头表示）

（5）科学家培育出了抗旱的水稻新品种，而海岛水稻从来没有出现过抗旱类型，有人打算也培养出抗旱的海岛水稻新品种，但是用海岛水稻与抗旱的陆地水稻进行了多次杂交，始终得不到子代，原因是________________________________________________。

[选修3：现代生物科技专题]

回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：

（1）培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中         ，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。

（2）构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的           键。

（3）组成基因表达载体的单体是           。基因表达载体中的启动子是       识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过        （填过程）合成mRNA。

（4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒？                 。

（5）将受体细胞培养成植株需要应用             技术，该技术的理论依据是            。