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            • 1. 人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源.现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答下列问题:
              (1)分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有 ______ ______ ______
              (2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养.在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在 ______ 旁进行操作.接种后的培养皿倒置于37℃的 ______ 中培养.
              (3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分该培养基属于 ______ 培养基.若培养基中存在有分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的 ______ 使pH升高,酚红指示剂产生的颜色变化,从而证明这一菌株可以尿素为氮源.变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力 ______
            • 2. 有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株.回答问题:
              (1)无菌操作是微生物实验中重要的一项技术,下列常用的无菌操作中错误的是 ______
              A.用酒精擦拭双手
              B.用氯气消毒水源
              C.实验操作应在酒精灯火焰附近进行
              D.玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭
              (2)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 ______ 为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于 ______ 培养基.
              (3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ ______
              (4)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 ______
            • 3. 某化工厂的染水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌).实验的主要步骤如图所示.请分析回答问题:
              (1)培养基中加入化合物的目的是筛选 ______ ,这种培养基属于 ______ 培养基.
              (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ______ ,实验需
              要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是 ______
              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量 ______ 的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量 ______
              (4)转为固体培养时,常采用 ______ 的方法接种,获得单菌落后继续筛选.
              (5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用 ______ 的方法进行计数,以时间为横坐标,以 ______ 为纵坐标,绘制生长曲线.
              (6)实验结束后,使用过的培养基应该进行 ______ 处理后,才能倒掉.
            • 4. 在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中,先将10升湖水水样浓缩至10毫升,然后各取浓缩水样1毫升,涂布到多个培养皿中培养.请回答:
              (1)可以通过提高培养基中    的浓度,筛选被调查细菌,这种培养基被称为    培养基.
              (2)要提高实验结果的可靠性,排除培养基未彻底灭菌的可能性,应该设置的对照组是    .为检验(1)中筛选方法的效果,可以设置的对照组是    
              (3)在微生物的培养过程中,实验室对培养基灭菌常用的方法是    .为防止冷凝水影响细菌的生长,需将培养皿    培养.在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为    
              (4)根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,原因是    
            • 5. 已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶,脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产.回答有关问题:
              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用    染色.微生物A产生的油脂不易挥发,可选用    (填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取.
              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以    为碳源的固体培养基进行培养.
              (3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用    直接计数,若要测定其活菌数量,可选用    法进行计数.
              (4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,    ℃条件下该酶活力最小,为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕    ℃设计后续实验.
            • 6. 为了检测饮用水中是否含有某种细菌,配制了如表培养基配方:
              蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水pH
              10g5g5g2g0.4g0.065g100mL7.2
              (1)该培养基所含的碳源有    ,其功能是    
              (2)该培养基所含的氮源有    ,其功能是    
              (3)该培养基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质是    
              (4)该细菌的同化作用类型是    
              (5)该培养基可用来鉴别哪种细菌?    
              A.霉菌        B.大肠杆菌        C.酵母菌        D.乳酸菌.
            • 7. 细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如下:在固体培养基中培养着状况相同的某种细菌,将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在不同固体培养基的表面,抗生素向周围扩散,如果抑制生长,则在滤纸片周围出现抑菌圈(图中里面的圈),结果如图所示.

              (1)衡量本实验结果的指标是    
              (2)上述图中最有效的是    培养皿中的抗生素.
              (3)用上述最有效的抗生素对细菌进行处理,并测定细菌数量变化,如图所示:
              ①向培养基中加抗生素的时刻为    点.
              ②细菌种群进化是定向的,而变异是    ,细菌的抗药性产生于环境变化之    (填“前”“中”或“后”),抗生素对细菌变异的作用不是“诱导”,而是    
              ③尽管有抗药性基因存在,但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染,原因在于细菌种群中    
            • 8. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行    处理.
              (2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中的培养基应具有的特点是:在     的培养基中加入    
              (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是    ,有透明带菌落利用的氮源主要是    ,据此可筛选出目的菌.
              (5)若实验接种时用的是稀释涂布平板法,在统计菌落数目时得到4个平板,统计的数目分别为21、213、257、278,则对数据处理后取平均值计数为    ,该方法往往比活菌的实际数目偏    (高/低).
            • 9. 根据所学知识,回答下列有关生物技术实践的问题:
              (1)葡萄酒的自然发酵过程中,菌种主要来自附着在 ______ 的野生酵母菌.如果要从中分离纯化酵母菌,最常用的接种方法是 ______ ______ .葡萄酒制作成功与否,经发酵后需用 ______ 来检测.若要制作葡萄醋,则需要在 ______ 条件下.
              (2)提取玫瑰花精油常采用 ______ 法,原理是利用 ______ 将其携带出来.
              (3)要鉴定分离得到的微生物,常需要借助生物化学的方法.如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ,可用来鉴定分解尿素的细菌;在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ,可用来鉴定纤维素分解菌.
            • 10. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)

              (1)用于生产物柴油的植物没不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
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