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            • 1. 某科研机构欲培养出能降解柴油的细菌,做了相关的研究.请回答下列相关问题:
              (1)从土壤中分离能降解柴油的细菌,需从 ______ 的地方取土壤样品5g,加到含100mL,培养液中,30℃条件下震荡培养5天,该培养液中 ______ 作为细菌的唯一碳源.
              (2)考虑到土壤样品中降解柴油的细菌数目较少,可重复第(1)小题中的培养方法,重复培养的目的是 ______ .如果只为分离能降解柴油的细菌而不对细菌进行计数,可采用 ______ 法将培养的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基中;接种时,需要用 ______ 法对接种环进行灭菌.
              (3)利用该菌,科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件,获得实验结果如图.

              ①根据上图可判断,该实验的目的是探究 ______ ______ 对细菌降解柴油的影响.
              ②如果某土壤中遭受柴油的严重污染,则需要将土壤浸出液稀释到柴油含量为 ______ mg.kg-1最有利于该细菌发挥作用.
            • 2. 为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验.

              (1)配制好的培养基通常使用 ______ 法灭菌.步骤③与步骤②中培养基成分相比,最大的区别是 ______
              (2)同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示.该同学的接种方法是 ______ ,出现图B结果可能的操作失误是 ______
              (3)同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作:将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接人0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57.据此可得出每升样品中的活菌数为 ______ 个.
              (4)步骤⑤需要振荡培养,原因是 ______
              (5)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是 ______
            • 3.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,据图回答:

              (1)细菌培养基的成分一般都含有碳源、水、________、________四类,该实验所用的选择培养基只能以________作为唯一氮源,其原因是________。鉴别培养基还需添加________作指示剂,产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后,其菌落周围的指示剂将变成________色。

              (2)统计样品中活菌数目常用的方法是________:在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191,每毫升土壤样品溶液中的细菌数量为________×108个;与血细胞计数板相比,此计数方法测得的细菌数目较________。

              (3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________(需答两条)。

            • 4. 苹果园广泛使用的一种除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,科学工作者按甲图程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理.现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中,再稀释103倍.各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为 ______
              (2)科学工作者为修复被该除草剂污染土壤的目的来选择细菌,所用培养基应该 ______
              (3)接种技术的核心是 ______ .在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步 ______ ,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______ 或有氧条件抑制了这些细菌的生长.
              (4)在培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.实验结果如乙图显示的A~E五种菌株中, ______ 是最理想菌株.
            • 5. 细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如下:在固体培养基中培养着状况相同的某种细菌,将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在不同固体培养基的表面,抗生素向周围扩散,如果抑制生长,则在滤纸片周围出现抑菌圈(图中里面的圈),结果如图所示.

              (1)衡量本实验结果的指标是 ______
              (2)上述图中最有效的是 ______ 培养皿中的抗生素.
              (3)用上述最有效的抗生素对细菌进行处理,并测定细菌数量变化,如图所示:
              ①向培养基中加抗生素的时刻为 ______ 点.
              ②细菌种群进化是定向的,而变异是 ______ ,细菌的抗药性产生于环境变化之 ______ (填“前”“中”或“后”),抗生素对细菌变异的作用不是“诱导”,而是 ______
              ③尽管有抗药性基因存在,但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染,原因在于细菌种群中 ______
            • 6. 苹果醋是以苹果为原料,经酒精发酵,醋酸发酵酿制而成的一种营养丰富,风味优良的酸性饮品,请回答:
              (1)将乙醇转化为醋酸的代谢反应在醋酸杆菌细胞的 ______ 中进行,与酵母菌的果酒发酵相比较,醋酸杆菌需在 ______ 环境条件下完成醋酸发酵过程.
              (2)乙醇脱氢酶在醋酸发酵过程中对产酸的速率和产酸量起重要作用,可根据各种蛋白质分子的 ______ 进行电泳,将乙醇脱氢酶与其他蛋白质分子分离.
              (3)为选育耐较高酒精和醋酸浓度的醋酸杆菌,需先将少量优质果醋样液转移到含较高酒精和醋酸浓度的增殖培养液中进行培养,然后对培养液进行稀释并接种到含有CaCO3不透明的固体培养基上,培养并筛选出符合要求的菌株,从功能上分析,上述增殖培养液是一种 ______ ,培养液中酒精的作用是 ______ ;醋酸能溶解CaCO3,将稀释后的增殖培养液接种到含有CaCO3不透明的固体培养基上,培养后的植株选出 ______ 、菌落丰厚的单菌落做进一步的纯化.
              (4)若要测定培养液中活菌数量,常用 ______ 进行接种并对菌落进行计数;除此之外,测定微生物数量的常用方法还有 ______
            • 7. 尿素是一种重要的农业肥料,但是不经过细菌的分解,就不能更好地被植物利用.生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌),培养基成分如下表所示,实验步骤如图所示,请回答下列问题:

              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.1g
              MgSO4•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10g
              尿素 1g
              琼脂 15g
              将上述物质溶解后,用自来水定容到1000m3
              (1)此培养基能否用于植物组织培养? ______ ,理由是 ______
              (2)培养基中氮源是 ______ ,这种培养基在功能上属于 ______ 培养基,目的是只允许能合成 ______ 的微生物生长,其他微生物均不能生长.
              (3)欲从土壤中分离获取上述特定微生物,可采用 ______ 法进行接种.
              (4)在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ,使指示剂变红色,而筛选纤维素分解菌的方法是 ______ 法.
            • 8. (1)为了检测大肠杆菌对抗生素的敏感性,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板.将分别含有A,B,C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,结果见图根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选择的抗生素是 ______
              (2)治疗肺结核的常用抗生素是利福平,写出其抑菌机理: ______
            • 9. 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗.科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图).

              (1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用 ______ ______ 方法从油料作物中提取.
              (2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ______ ,培养基灭菌采用的最适方法是 ______ 法.
              (3)测定培养液中微生物数量,可选用 ______ 法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测 ______ ,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用 ______ 技术使脂肪酶能够重复使用.
              (4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的 ______ 技术.
            • 10. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤.为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明).

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行 ______ 处理.
              (2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中的培养基应具有的特点是:在 ______  的培养基中加入 ______
              (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 ______
              (4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,有透明带菌落利用的氮源主要是 ______ ,据此可筛选出目的菌.
              (5)若实验接种时用的是稀释涂布平板法,在统计菌落数目时得到4个平板,统计的数目分别为21、213、257、278,则对数据处理后取平均值计数为 ______ ,该方法往往比活菌的实际数目偏 ______ (高/低).
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