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            • 1． 某些农作物秸秆富含纤维素，纤维素经过水解可以形成葡萄糖，葡萄糖再经过发酵可以生产酒精．如图是利用农作物秸秆生产酒精的大致流程，请回答下列问题：

              （1）农作物秸秆含有丰富的纤维素，纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄糖．人们常常从土壤中分离纤维素分解菌．分离纤维素分解菌常用的方法是 ______ 染色法．其实验流程是：土壤取样→选择培养→ ______ →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生 ______ 的菌落．
              （2）纤维素分解菌能合成纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即 ______ ．前两种酶使纤维素分解成 ______ ，第三种酶将它分解成葡萄糖．
              （3）图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌，若要提高酒精的产量，发酵过程中关键要控制好哪些条件？ ______ ．（至少填写2项）．发酵后是否有酒精产生，可以用 ______ 来检验．
              （4）利用葡萄能生产果酒，进而生产果醋，生产果醋常用的菌种是醋酸杆菌，醋酸杆菌与酵母菌在代谢类型上的区别是 ______ ．
              难度：较易
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            • 2． 某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是(　　)
              A．利用平板划线法对细菌进行计数
              B．用以石油为唯一碳源的培养基筛选
              C．采用稀释涂布平板法分离菌种
              D．称取和稀释土壤样品时应在火焰旁
              难度：易
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            • 3． 下列关于微生物培养和利用的叙述，错误的是
              A．利用稀释涂布平板法既能分离微生物又能对微生物进行计数
              B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落
              C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌
              D．若需长期保存菌种，可将菌种进行斜面接种形成菌落后置于4℃的冰箱中保藏
              难度：易
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            • 4． （一）下图利用土壤中L微生物提取脲酶，并纯化和固定化的实验流程

              （1） 筛选微生物 L时，用            作为培养基中的唯一氮源，加入            凝固剂。接种时应采用           方法

              （2） 下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是           灭菌

                 A高压蒸汽     B 紫外灯照射      C 70%的酒精侵泡液      D过滤

              （3）对微生物L进行扩大培养时宜采用            培养基，接种时采用           方法对接种环进行灭菌

              （4）脲酶宜采用共价偶联法进行固定化，可通过检测固定化脲酶的           确定其应用价值。除此法外，酶的固定化方法还包括           及交联法等。

              （二）下面是关于获得能产生人干扰素大肠杆菌的问题。请回答：

              （5）用限制性核酸内切酶识别人干扰素基因和质粒中一段特定的          并切割，然后用           连接形成重组DNA。该质粒是一种含抗生素抗性基因的          核酸分子

               A.双链环状  B.单链环状  C.双链线状  D.单链线状

              （6）将含有人干扰素基因的重组质粒导人到大肠杆菌，经含有           的培养基筛选等过程，最终获得能产生人干扰素的大肠杆菌。

              难度：中等
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            • 5． 下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是（  ）
              A．在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用平板划线法
              B．在DNA粗提取与鉴定实验中，向溶解DNA的烧杯中加蒸馏水的目的是漂洗DNA
              C．腐乳制作过程中，料酒的用量过多，后期成熟时间将延长
              D．提取植物细胞DNA时需在研钵中加入洗涤剂和食盐
              难度：难
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            • 6． 土壤中微生物种类繁多，功能强大。比如：最显著的作用是分解有机质：把植物的残根败叶和施入土壤中的有机肥料分解，改善土壤的结构和供给植物吸收。若利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化。以下示意图是从土壤中分离出分解尿素的微生物流程图。请分析相关问题：

              (1)②过程所使用的接种方法是________。用该接种方法对微生物进行计数时，通常选用菌落数在________个的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目________，原因是________。

              (2)从用途上来说，1号培养基属于________培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→________→倒平板。

              (3)该实验中酶活性鉴定是鉴定________酶的活性，可以加入________指示剂，如果指示剂变为________色，说明该酶的检测为阳性。

              难度：难
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            • 7． 通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是(　　)
              A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
              B．取10－4、10－5的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上
              C．将培养皿倒置， 37 ℃恒温培养24～48小时
              D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
              难度：较易
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            • 8． 有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等．研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物．分析回答问题：
              （1）培养基中加入的化合物A是 ______ ，为微生物的生长提供 ______ ，这种培养基属于 ______ 培养基．
              （2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入 ______ ．
              （3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度．若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是 ______ ，操作时采用 ______ 灭菌的方法；还可用 ______ 方法操作．
              （4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是 ______ ．
              难度：较易
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            • 9． 纤维素酶是一种复合酶，能将纤维素分解为葡萄糖．采用从土壤中分离微生物的方法，可分离纤维素分解菌．请回答下列相关问题．
              （1）土壤中有多类菌种，从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在 ______ 的环境中采集土壤．纤维素酶是一种 ______ 酶，一般认为其至少包括3种成分，即C1酶、Cx酶和 ______ ．
              （2）用刚果红染色法对分离出的微生物进行筛选，刚果红可与纤维素形成 ______ ，当纤维素被纤维素酶分解后，培养基上会出现以 ______ 为中心的透明圈．从培养基的用途分类，刚果红培养基属于 ______ 培养基．
              （3）若菜集土壤的环境中生长有胡萝卜，则从萝卜中可提取胡萝卜素，提取胡萝卜素常用的方法是 ______ ．纸层析法可用于鉴定提取的胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为 ______ ．
              难度：较易
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