[生物——选修1：生物技术实践]

有机农药会污染环境，为了净化被有机农药M污染的土壤，需要分离和提纯能高效分解有机农药M的微生物。下图是分离和纯化微生物的简易流程，回答下列问题：

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有四类，即________。该实验所用的选择培养基只能以________作为唯一碳源，其原因是________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。在第二次及以后划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是________。

（3）若要检测土样中的细菌含量，应采用________法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是________。然后，将1mL土壤溶液稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，将每个平板倒置培养，最后统计菌落数并进行计算。期间将平板倒置培养的作用：

①有利于菌种利用培养基营养，加快生长速度；

②________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

随着“二孩政策”的落实，不少家庭选择生育二胎，但有些夫妇由于身体原因不能自然受孕，试管婴儿技术给他们带来了福音。培育试管婴儿首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养。回答下列问题：

（1）体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。

①对试管婴儿的供体女性注射________激素，使其排出更多的卵子。

②射出的精子表面附着有附睾和精囊腺分泌的一种“去能因子”，而清除“去能因子”即为精子的获能，在女性的宫颈、子宫及输卵管液中的β－淀粉酶、胰蛋白酶、β葡萄糖苷酶及唾液酸酶等酶的作用下可除去“去能因子”，由此推测“去能因子”的本质可能是________。

③获能的精子和培育成熟的卵子，一般情况下都可以在________或________中完成受精作用。

（2）培育早期胚胎时，需用的培养液成分比较复杂，除了一些________外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。人的体外受精胚胎，即试管胚胎，可在________个细胞阶段移植。该早期胚胎被植入女性子宫内，将依次经历的胚胎时期有________，其中细胞分化最先出现在________期。

[生物——选修1：生物技术实践]

下图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，据图回答：

（1）细菌培养基的成分一般都含有碳源、水、________、________四类，该实验所用的选择培养基只能以________作为唯一氮源，其原因是________。鉴别培养基还需添加________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________色。

（2）统计样品中活菌数目常用的方法是________：在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，每毫升土壤样品溶液中的细菌数量为________×10⁸个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较________。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________（需答两条）。

[生物——选修1：生物技术实践]

下表为筛选分解尿素细菌的培养基，据此回答下列问题：

（1）在该培养基中加入尿素的作用是________；琼脂的作用是________。从培养基的物理性质上分属于________培养基。

（2）培养基的配制步骤：计算→称重→溶化→灭菌→倒平板。倒平板为什么将平板倒置？________。

（3）用该培养基筛选出来的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们体内能合成________，在该培养基中加入________指示剂，如变红则说明筛选到了分解尿素的细菌。

（4）统计菌落数目的方法可用间接计数法：土壤取样→________→微生物培养→观察记录结果→细菌计算。如C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数，则每克样品中的菌落数为________。