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            • 1.

              .请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

              (2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

              成分

              含量

              蛋白胨

              10.0g

              乳糖

              5.0g

              蔗糖

              5.0g

              K2HPO4

              2.0g

              显色剂

              0.2g

              琼脂

              12.0g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml

              根据用途划分该培养基属于______ (选择、鉴别)培养基。该培养基中的碳源是_____。

              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行____ (消毒、灭菌)操作者的双手需要进行清洗和_______。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_______。培养大肠杆菌时,常用的接种方法是平板划线法和__________________。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是______________ 。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

              (4)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

              A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

              (5)利用培养基不仅可以分离培养微生物,也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作,原因是_________

            • 2.

              将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:

              (1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素一抑制__________的生长,加入了链霉素的培养基属于__________培养基。

              (2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有____________________(答出两点即可)。氮源进入细菌后,可参与合成的生物大分子有____________________(答出两点即可)。

              (3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物,加入的显色剂是__________,该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理___________________________________。

              (4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:

              甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133。

              乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。

              有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是:_______________________________________。

            • 3. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从赤峰市克旗热泉(出口水温达87℃)中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:


              (1)Ⅰ号培养基中应加入     ,以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从Ⅰ号培养基中挑选     菌落接种到Ⅱ号培养基中。

              (2)②过程所使用的接种方法是      。如果不经过①过程,直接将采集的样品进行接种培养,可能出现的结果是      

              (3)Ⅰ、Ⅱ号培养基中接种菌种后,应该置于     的恒温培养箱中培养,培养皿要倒置的原因是     

              (4)在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,如曲线②。根据实验结果分析:80℃并不是该酶使用的最佳温度,原因      。曲线②35℃数据点是在     ℃时测得的。

            • 4. (1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑 ______ 、 ______ 和渗透压等条件.由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、 ______ 、 ______ 等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料.
              (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行 ______ (消毒、灭菌);操作者的双手需要进行清洗和 ______ ;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能 ______ .
              (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的 ______ .
              (4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 ______ .
              (5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染.对于固体培养基应采用的检测方法是 ______ .
              (6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过 ______ 处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散.
            • 5.

              漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述不正确的是( )

              A.生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品
              B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
              C.在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化
              D.斜面培养基中含有大量营养物,可临时保存菌株
            • 6. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中,不正确的是(  )
              A.操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板
              B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸
              C.灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂,并使其溶解
              D.将培养基冷却到约50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板
            • 7.

              回答下题:

              (一) 酿酒、造醋是我国的传统技艺,为了探究与改进制造工艺,进行了相关研究。请回答有关问题:

              (1)目的菌株筛选后应该利用     培养基进行扩大培养,       是消除污染杂菌的通用方法。

               (2)制作葡萄酒过程中,为了酵母菌迅速发生作用,可加少量      混匀。将葡萄浆放入发酵瓶,装量不超过      (A.1/2 B.2/3 C.3/4 D.100%),当发酵瓶       表示发酵完毕。

               (3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至       ,将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒-水混合物中,混匀,并调PH至       后,倒入发酵瓶。

              (二)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。请回答相关问题:



              (1)过程①中构建重组表达载体所需要的酶是限制性核酸内切酶和      。(A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.解旋酶)

              (2)在过程②中,用       处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞,置于    中培养。

              (3)在过程③中,一般用     激素处理供体母牛,使其超数排卵;对供体母牛和代孕母牛进行           处理。

               (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是          。在胚胎移植前,通过                技术可获得较多胚胎。

            • 8.

              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以       为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于       培养基。

              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即              

              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力       

              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、                 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯       附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

            • 9. 在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数.
              (1)如图是利用 ______ 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步 ______ 分散到培养基的表面.
              (2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O.若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述 ______ 成分,并加入 ______ ,以补充 ______ 源.
              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量.在对应稀释倍数为106培养基中,得到以下统计结果:甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,平均值248;乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;在三位同学统计中,只有一位同学的统计是正确的,指出另两位同学的统计为什么不正确 ______ .
              (4)若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233,那么每毫升样中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL) ______ .
            • 10.
              关于生物技术实践中的有关检验,正确的是(  )
              A.在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生,正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液,然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液
              B.在微生物培养中,检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养与接种培养物的培养基一起培养
              C.检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌,方法是在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,则说明分离成功
              D.检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法,原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同,故随层析液在滤纸上扩散的速度不同,若样品中有杂质,则会出现不同的色素点(带)
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