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            • 1． 回答与果胶和果胶酶有关的问题：
              （1）通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为______。
              （2）为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行______。
              （3）在某种果汁生产中，用果胶醇处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使______。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入______使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
              （4）常用固定化果胶醇处理含果胶的污水，其主要优点有______和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有______和______。
              难度：较易
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            • 2． 下列关于加酶洗涤剂的叙述，错误的是（　　）
              A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶
              B．用加酶洗涤剂能减少洗涤时间并节约用水
              C．含纤维素酶洗涤剂可以洗涤印花棉织物
              D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相对耐高温的
              难度：较易
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            • 3．
              下列关于加酶洗衣粉的叙述，错误的是（　　）
              A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物发酵生产而来
              B．洗衣粉中的蛋白酶通常会将添加的其他酶迅速分解
              C．在50℃热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶会迅速失活
              D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不会影响其中酶的活性
              难度：较易
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            • 4．
              为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备α-淀粉酶，实验流程见右图。请回答下列问题：

              （1）利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先获得细菌的 ______ 。
              （2）为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的 ______ 端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是 ______ 。
              （3）进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中 ______ 的设定引物有关， ______ 的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）
               ①变性温度 ②退火温度  ③延伸温度 ④变性时间 ⑤退火时间  ⑥延伸时间
               （4）下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：

              图中虚线框内mRNA片段包含 ______ 个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有 ______ 种。
              （5）获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：
              缓冲液 50mmol/L Na2HPO4-KH2PO4 50mmol/L Tris-HCl 50mmol/L Gly-NaOH
              pH 6.0 6.5 7.0 7.5 7.5 8.0 8.5 9.0 9.0 9.5 10.0 10.5
              酶相对活性% 25.4 40.2 49.8 63.2 70.1 95.5 99.5 85.3 68.1 63.7 41.5 20.8
              根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为 ______ 。
              难度：较易
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            • 5． 小麦种子萌发时产生淀粉酶，将淀粉水解为麦芽糖、葡萄糖等．小麦种子萌发的最适温度为30℃左右．取适量小麦种子在20℃和30℃培养箱中培养4天后，做如下处理：在3支试管中加入等量斐林试剂并加热至50℃左右，摇匀后观察试管中的颜色．结果是（  ）
              A．甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色
              B．甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色
              C．甲、乙皆呈蓝色，丙呈砖红色
              D．甲呈浅砖红色、乙呈砖红色，丙呈蓝色
              难度：中等
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            • 6．
              为了探究一种新型碱性纤维素酶的去污效能，研究性学习小组进行了相关实验，结果如图．由图中实验结果能直接得出的结论是（　　）
              A．碱性纤维素酶对污布类型2的去污力最强
              B．不同类型洗衣粉影响碱性纤维素酶的去污力
              C．碱性纤维素酶对污布类型2、3的去污力不同
              D．加大酶用量可以显著提高洗衣粉的去污力
              难度：较易
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            • 7． 分析有关微生物的资料，回答问题并完善实验设计方案．
              脂肪酶具有广泛的应用前景．为获得高产脂肪酶的菌株，并将之用于产业化，进行如下的系列实验．
              （1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择下列固体培养基（仅列出了碳氮源）中的______．
              A．蛋白胨、柠檬酸铁铵    B．橄榄油、硫酸铵    C．乳糖、酵母膏       D．葡萄糖、蛋白胨
              （2）进一步调查适合于产脂肪酶菌株生长的碳氮源．根据表1的实验数据，选择理想的碳源为______．
              （4）利用相似方法探得理想氮源的最佳浓度，再进一步确定碳氮源浓度的最佳组合．以a和b分别代表碳源和氮源的浓度，假设酶活a1＞a2＞a3；b2＞b3＞b4，据此形成下列四种方案，其中最佳的是______．
              方案一：a1和b2组合．
              方案二：将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合，根据酶活取其中的最佳组合．
              方案三：a1和b2组合，a2和b3组合，根据酶活取其中的最佳组合．
              方案四：a1分别与每种氮源浓度组合，b2分别与每种碳源浓度组合，根据酶活取其中的最佳组合．
              （5）如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活，则应选择图中的______固定化工艺．
              难度：较易
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            • 8． (12分)[生物――生物技术实践]


              乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

              产乳糖酶微生物L的筛选 产乳糖酶微生物L的培养 乳糖酶的提取纯化 乳糖酶的固定化

              (1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用          作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是            。从功能上讲,这种培养基属于              。 

              (2)培养微生物L前,宜采用            方法对接种环进行灭菌。 

              (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越              。 

              (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的            确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括              、               、离子吸附法及交联法等。

              难度：中等
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            • 9． 回答下列有关微生物和酶工程的问题．
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．
              （1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和______（用序号组合回答）．
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1．

              （2）大规模产业化首选的菌株是______；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是______．
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂．
              （3）在60～70℃保温一定时间的作用是______．
              A．诱导蛋白酶的热稳定性
              B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C．裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              （4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为______（选择正确的序号并排序）．
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩．
              难度：较易
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