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            • 1. 回答与果胶和果胶酶有关的问题:
              (1)通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物,其原因除水果中果胶含量较高外,还因为______。
              (2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落,通常对分离或诱变后的微生物悬液进行______。
              (3)在某种果汁生产中,用果胶醇处理显著增加了产量,其主要原因是果胶酶水解果胶使______。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产,通常将其提取液浓缩后再加入______使之形成絮状物,然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
              (4)常用固定化果胶醇处理含果胶的污水,其主要优点有______和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时,除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外,还需考虑的主要有______和______。
            • 2.
              下列关于酵母细胞固定化实验的叙述,正确的是(  )
              A.用温水使海藻酸钠迅速溶解,待其冷却到室温后用于包埋细胞
              B.进行包埋时,用于悬浮细胞的CaCl2溶液浓度要适宜
              C.注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状
              D.包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状,并具有一定的弹性
            • 3.
              固定化单宁酶应用于茶饮料加工,可消除其中的苦涩味.下列有关叙述正确的是(  )
              A.在单宁酶纯化时可采用透析法去除杂蛋白
              B.化学结合法比吸附法对单宁酶活性影响更小
              C.温度、pH和重金属离子都可能影响固定化单宁酶活性
              D.酶的高效性决定固定化单宁酶不会降解茶饮料中的有益成分
            • 4.
              下列关于“酵母细胞的固定化技术”实验的叙述,正确的是(  )
              A.活化酵母时,将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
              B.配制CaCl2溶液时,需要边小火加热边搅拌
              C.将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2溶液时,凝胶珠成形后应即刻取出
              D.海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色,过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
            • 5. 分析有关微生物的资料,回答问题并完善实验设计方案.
              脂肪酶具有广泛的应用前景.为获得高产脂肪酶的菌株,并将之用于产业化,进行如下的系列实验.
              (1)欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,应选择下列固体培养基(仅列出了碳氮源)中的______.
              A.蛋白胨、柠檬酸铁铵    B.橄榄油、硫酸铵    C.乳糖、酵母膏       D.葡萄糖、蛋白胨
              (2)进一步调查适合于产脂肪酶菌株生长的碳氮源.根据表1的实验数据,选择理想的碳源为______.
              (4)利用相似方法探得理想氮源的最佳浓度,再进一步确定碳氮源浓度的最佳组合.以a和b分别代表碳源和氮源的浓度,假设酶活a1>a2>a3;b2>b3>b4,据此形成下列四种方案,其中最佳的是______.
              方案一:a1和b2组合.
              方案二:将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合,根据酶活取其中的最佳组合.
              方案三:a1和b2组合,a2和b3组合,根据酶活取其中的最佳组合.
              方案四:a1分别与每种氮源浓度组合,b2分别与每种碳源浓度组合,根据酶活取其中的最佳组合.
              (5)如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活,则应选择图中的______固定化工艺.
            • 6. (12分)[生物――生物技术实践]


              乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

              产乳糖酶微生物L的筛选 产乳糖酶微生物L的培养 乳糖酶的提取纯化 乳糖酶的固定化

              (1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用          作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是            。从功能上讲,这种培养基属于              。 

              (2)培养微生物L前,宜采用            方法对接种环进行灭菌。 

              (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越              。 

              (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的            确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括                             、离子吸附法及交联法等。

            • 7. 为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响,以及固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,科研人员用筛选到的一株绿球藻进行试验,流程及结果如下.请回答下列问题:

              (1)实验中的海藻酸钠作用是 ______ ,CaCl2的作用是 ______ .
              (2)为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物,并保持绿球藻活性,宜采用 ______ 洗涤.图1中1.0%海藻酸钠组培养24h后,移去凝胶球,溶液呈绿色,原因是 ______ .
              (3)为探索固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,映选用浓度为 ______ 海藻酸钠制备凝胶球.
              (4)图2中空白凝胶球组Zn2+浓度下降的原因是 ______ .结合图1和图2分析,固定化藻的实验组24~48h间Zn2+浓度下降速度较快的主要原因是 ______ ;72~96h间Zn2+浓度下降速度较慢的原因有 ______ .
            • 8. 回答下列有关微生物和酶工程的问题.
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶,后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值,且已大规模产业化应用.
              (1)在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时,培养基营养成分应包括水和______(用序号组合回答).
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株,将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水(f) 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面;在37℃恒温箱中放置2~3天,结果如图1.

              (2)大规模产业化首选的菌株是______;菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是______.
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据,即酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其酶活性.在该蛋白酶的工业化生产过程中,通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间,再制备酶制剂.
              (3)在60~70℃保温一定时间的作用是______.
              A.诱导蛋白酶的热稳定性
              B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C.裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              (4)枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为______(选择正确的序号并排序).
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩.
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