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            • 1.
              已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶.脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产.回答有关问题:
              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用 ______ 染色.微生物A产生的油脂不易挥发,可选用 ______ (填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取.
              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以 ______ 为碳源的固体培养基进行培养.从功能上划分该培养基属于 ______ 培养基
              (3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用 ______ 直接计数;若要测定其活菌数量,可选用 ______ 法进行计数.
              (4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中, ______ ℃条件下该酶活力最小.为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕 ______ ℃设计后续实验.
            • 2.
              如图表示利用“果胶酶-酵母菌联合固定凝胶珠”生产红葡萄酒的部分过程,请问答下列问题.

              (1)海荡酸钠能作为固定裁体的特点是 ______ ,在联合固定果胶酶和酵母菌之前,对海藻酸钠所作的操作是 ______ .
              (2)果胶酶在果汁生产中具有重要的作用,把果胶酶和酵母菌固定在一起生产红葡萄酒的重要意义在于 ______ .
              (3)果胶酶通常先与戊二醛交联,然后与活化的酵母菌一起用海藻酸钠包埋固定,这是因为 ______ .
              (4)在初级发酵时一般温度控制在 ______ ,在发酵过程中,尤其要随时监控和调整发酵罐中的温度和pH,使其在适宜的范围内波动,其主要目的是 ______ .
            • 3.
              嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
              Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
              (1)PCR扩增bglB基因时,选用 ______ 基因组DNA作模板.
              (2)图1为质粒限制酶酶切图谱.bglB基因不含图中限制酶识别序列.为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入 ______ 和 ______ 不同限制酶的识别序列.
              (3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为 ______ .
              Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

              (4)据图2、3可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会 ______ ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在 ______ (单选).
              A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
              Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
              在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率.经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因.
              (5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中 ______ (多选).
              A.仅针对bglB基因进行诱变     B.bglB基因产生了定向突变
              C.bglB基因可快速累积突变    D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变.
            • 4.
              某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究.原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变,反复筛选,得到的突变株Z6和Z8.在40℃、pH 7.5条件下测定所产脂肪酶活性,分别比原始菌株提高了l26%、150%.回答下列问题:
              (1)由于突变是不定向,突变导致脂肪酶活性变化的可能结果有 ______ .
              (2)科研人员对上述三个菌株所产生的脂肪酶特性进行研究,获如下结果

              实验一:为测定脂肪酶在不同pH值条件下的稳定性,科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20mL,分别与等体积的pH5~9的缓冲液混匀,置于4℃冰箱保存24小时后,将pH调至7.5,再加入等量的底物溶液,测定酶的相对活性.结果如图,与原始菌株1 444相比,z6和z8的酶在不同pH条件下的 ______ .测定酶的活性的实验温度为 ______ ℃.
              (3)实验二:分别取上述三种菌株的酶液各20ml,置于50℃恒温水浴处理60min,每隔10min取样一次,测定酶活性,同时测定三个对照组的酶活性并进行比较.本实验目的是 ______ ,对照组所用的酶液应如何处理? ______ .
            • 5.
              为了比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性,某生物兴趣小组以三种微生物提取液(提取液中淀粉酶浓度相同)为材料进行了如下实验:
              试管1 试管2 试管3 试管4
              实验操作 蒸馏水(mL 2 2 2 A
              pH=8缓冲液 0.5 0.5 0.5 0.5
              淀粉溶液(mL) 1 1 B 1
              甲生物提取液(mL) C
              乙生物提取液(mL) D
              丙生物提取液(mL) E
              37℃的水浴,保温1小时
              总体积(mL) 3.8 3.8 3.8 3.8
              滴加等量的碘液
              实验结果 颜色深浅程度 ++ - + F
              注:“+”显色,“+”越多显色越深;“-”不显色
              (1)F的颜色深浅程度为 ______ (用“+”或“-”表示).
              (2)该实验的自变量是 ______ ;温度属于无关变量,保持相同即可,该说法是 ______ (填“对”、“错”)的.
              (3)生物体内酶的化学本质是 ______ ,其特性有 ______ 、 ______ .
            • 6.

              乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为:

                玉米秸秆糖液酒精

               (1)玉米秸秆经预处理后,应该选用        酶进行水解,使之转化为发酵所需的葡萄糖。

               (2)(多选)从以下哪些微生物中可以提取上述酶?            

                 A.酿制果醋的醋酸菌   B.生长在腐木上的霉菌   C.制作酸奶的乳酸菌   

                 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌                        E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物

               (3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物,所需要的培养基为         (按功能分),培养基中的碳源为            

               (4)从生物体提取出的酶首先要检测           ,以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中,为了使酶能够被反复利用,可采用固定化酶技术。

              (5)发酵阶段需要的菌种是           ,在产生酒精时要控制的必要条件是           

            • 7.
              下列关于纤维素酶的说法,错误的是(  )
              A.纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种
              B.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖
              C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁
              D.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖
            • 8. 分析有关微生物的资料,回答问题并完善实验设计方案.
              脂肪酶具有广泛的应用前景.为获得高产脂肪酶的菌株,并将之用于产业化,进行如下的系列实验.
              (1)欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌,应选择下列固体培养基(仅列出了碳氮源)中的______.
              A.蛋白胨、柠檬酸铁铵    B.橄榄油、硫酸铵    C.乳糖、酵母膏       D.葡萄糖、蛋白胨
              (2)进一步调查适合于产脂肪酶菌株生长的碳氮源.根据表1的实验数据,选择理想的碳源为______.
              (4)利用相似方法探得理想氮源的最佳浓度,再进一步确定碳氮源浓度的最佳组合.以a和b分别代表碳源和氮源的浓度,假设酶活a1>a2>a3;b2>b3>b4,据此形成下列四种方案,其中最佳的是______.
              方案一:a1和b2组合.
              方案二:将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合,根据酶活取其中的最佳组合.
              方案三:a1和b2组合,a2和b3组合,根据酶活取其中的最佳组合.
              方案四:a1分别与每种氮源浓度组合,b2分别与每种碳源浓度组合,根据酶活取其中的最佳组合.
              (5)如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活,则应选择图中的______固定化工艺.
            • 9. 某同学利用可溶性淀粉溶液、玉米种子提取液(含有α-淀粉酶)及相关试剂进行的实验如表所示,请回答下列问题:
              试管编号 A B C D E F
              质量分数为1%的可溶性淀粉溶液(mL) 2 2 2 2 2 2
              恒温水浴10min(℃) 0 20 40 60 80 100
              玉米种子提取液(mL) 1 1 1 1 1 1
              恒温水浴10min(℃) 0 20 40 60 80 100
              溶液混合,振荡后恒温水浴10min(℃) 0 20 40 60 80 100
              冷却后加入碘液 振荡后观察颜色变化
              观察并记录各试管内颜色的变化 +++ ++ - ++ +++
              (注:“+”表示碘液变蓝色,“-”表示碘液不变色)
              (1)上述实验的实验原理是 ______
              (2)请填写表中C试管中液体颜色变化情况 ______ .D试管中滴加碘液后不变蓝色,不变蓝色的原因是 ______
              (3)A、F试管中蓝色最深的原因分别是 ______ ______
              (4)该实验能否选用斐林试剂检测实验结果? ______ ,理由是 ______
              (5)据表能否推断α-淀粉酶的最适温度一定是60℃? ______ ,理由是 ______
            • 10. 为获得果胶酶高产菌株,科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作.
              (1)为分离果胶酶产生菌,科研人员配制了下表所示成分的培养基,该表空白处的两种成分是 ______ .制备的培养基常用 ______ 法进行灭菌.
              K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂
              0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              (2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中,震荡混匀,制成悬液.为获得较均匀分布的单菌落,还需要将悬液进行 ______ ,用 ______ 法接种于固体培养基上.接种后的培养基 ______ 状态放人培养箱.
              (3)选择单菌落数目适宜的培养基,加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色),一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液,观察并比较菌落 ______ 直径的比值,筛选果胶酶高产菌株.
              (4)将获得的菌株进行液体培养后,从培养液的 ______ (填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶.将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合,一定时间后测定吸光值来测定酶活性.进行吸光值测定时,需将 ______ 与等量果胶溶液混合,作为实验的对照.
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