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            • 1． 已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
              （1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用 ______ 染色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 ______ （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
              （2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 ______ 为碳源的固体培养基进行培养．从功能上划分该培养基属于 ______ 培养基
              （3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 ______ 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 ______ 法进行计数．
              （4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ______ ℃条件下该酶活力最小．为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ______ ℃设计后续实验．
              难度：较易
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            • 2． 谷物中淀粉酶活性是影响啤酒发酵产酒的重要因素．某科研小组为寻找啤酒发酵的优良原料，比较了小麦、谷子、绿豆萌发前后淀粉酶活性，其实验过程及结果如下．分析回答：
              ①谷物的萌发：称取等量小麦、谷子、绿豆三种谷物的干种子，都均分为两份，其中一份浸泡2.5h，放入25℃恒温培养箱，至长出芽体为止．
              ②酶提取液的制备：将三种谷物的干种子和萌发种子分别里于研钵中，加入石英砂和等量蒸馏水研磨、离心，制备酶提取液．
              ③反应进程的控制：分别取②制备的酶提取液1mL置于不同的试管中，加入lmL1%的淀粉溶液，25℃保温5min后，立即将试管放入沸水浴中保温5min．
              ④吸光度的测定：在试管中加入 ______ 、摇匀、加热，当溶液由蓝色变为砖红色后，用分光光度计依次测定各试管的吸光度．
              ⑤酶活性的计算：将测定值与标准麦芽糖溶液吸光度比对，计算出淀粉酶活性，结果如表：
              名称 小麦 谷子 绿豆
              未萌发谷物的淀粉活性/U•g-1 0.0289 0.0094 0.0074
              萌发谷物的淀粉酶活性/U•g-1 5 1.7645 0.0395
              （1）本研究的自变量是 ______ 、 ______ ．
              （2）步骤②中加入“石英砂”的目的是 ______ ；步骤③中立即将试管在沸水浴中保温5min的作用是 ______ ．避免因吸光度测定先后对实验结果的影响：歩骤④“？”加入的试剂是 ______ ．
              （3）实验结果表明，谷物萌发过程中淀粉酶活性 ______ ，其意义是 ______ ．
              （4）本实验对生产实践的指导意义是应优先选择 ______ 作为啤酒发酵的原料．
              难度：较易
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            • 3． 回答下列有关微生物和酶工程的问题．
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用．
              （1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和 ______ （用序号组合回答）．
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f） 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1．

              （2）大规模产业化首选的菌株是 ______ ；菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是 ______ ．
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性．在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂．
              （3）在60～70℃保温一定时间的作用是 ______ ．
              A．诱导蛋白酶的热稳定性
              B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C．裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              （4）枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为 ______ （选择正确的序号并排序）．
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩．
              难度：较易
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            • 4． 某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究．原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变，反复筛选，得到的突变株Z6和Z8．在40℃、pH 7.5条件下测定所产脂肪酶活性，分别比原始菌株提高了l26%、150%．回答下列问题：
              （1）由于突变是不定向，突变导致脂肪酶活性变化的可能结果有 ______ ．
              （2）科研人员对上述三个菌株所产生的脂肪酶特性进行研究，获如下结果

              实验一：为测定脂肪酶在不同pH值条件下的稳定性，科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20mL，分别与等体积的pH5～9的缓冲液混匀，置于4℃冰箱保存24小时后，将pH调至7.5，再加入等量的底物溶液，测定酶的相对活性．结果如图，与原始菌株1 444相比，z6和z8的酶在不同pH条件下的 ______ ．测定酶的活性的实验温度为 ______ ℃．
              （3）实验二：分别取上述三种菌株的酶液各20ml，置于50℃恒温水浴处理60min，每隔10min取样一次，测定酶活性，同时测定三个对照组的酶活性并进行比较．本实验目的是 ______ ，对照组所用的酶液应如何处理？ ______ ．
              难度：较易
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            • 5． 1963年诺和诺德公司向洗涤剂中加入碱性蛋白酶，推出了第一款加酶洗衣粉．碱性蛋白酶一般利用枯草芽孢杆菌生产．图甲、乙为某科研小组对碱性蛋白酶相关性质进行测试的结果．图丙、丁为两种常见的平板划线法；连续划线法和四区划线法，前者适用于纯化菌种较少的样品，后者适用于纯化菌种较多的样品．请回答下列问题：

              （1）由图甲、乙可知，碱性蛋白酶发挥作用的适宜条件为 ______ ．
              （2）图丁中依次进行四区划线，四区的面积要求为C＜D＜E＜F，F区面积最大的原因是 ______ ．每次划线后都要 ______ 接种环，注意F区划线不要与 ______ （填字母）区相连．
              （3）某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜选择图 ______ 所示的方法划线培养，分离得到的纯化单菌落属于 ______ （填“种群”或“群落”）．
              （4）碱性蛋白酶是枯草芽孢杆菌生长后期向细胞外分泌的一种酶，与该酶合成有关的细胞器是 ______ ．若欲应用固定化技术提高该酶的利用率，减少产物中的杂质，则应采用 ______ 方法．
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            • 6． 某物质常温下能分解果肉细胞壁中的果胶，提高果汁产出量，使果汁变得清亮．下列对该物质的叙述正确的是（　　）
              A．该物质由氨基酸和核苷酸组成
              B．该物质能分解果肉细胞壁中的纤维素
              C．该物质在低温条件下会失去活性
              D．该物质在蛋白酶作用下可能会被降解
              难度：较易
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            • 7． 柑橘是重要的经济作物，经深加工可生产果汁、酒精、含胡萝卜素的食品添加剂．请回答下列相关问题：
              （1）在生产酒精的过程中，发酵温度控制在 ______ ℃．发酵过程中定期打开排气装置，目的是 ______ ．
              （2）可用 ______ 的方法提取柑橘中的胡萝卜素，将提取的胡萝卜素粗品通过 ______ 法进行签定．
              （3）柑橘加工产生大量皮渣，严重污染环境．研究发现，皮渣能被枯草杆菌分解，但发酵过程中产生的有机酸，导致pH下降，影响其分解效果．通过辐射处理枯草杆菌，筛选获得耐酸菌株 A、B．
              ①筛选菌株时，枯草杆菌生长繁殖所需要的主要营养物质有碳源、氮源、 ______ 四类，该培养基中果胶为唯一碳源，只有能将果胶分解成 ______ 的微生物才能生长．
              ②纯化菌株时，使用的涂布工具是 ______ ．取某一稀释液涂布了三个平板，其中一个平板无菌落，另外两个有菌落．造成无菌落的操作失误最可能是 ______ ．
              ③用分离得到的果胶酶进行了相关实验，结果如图．
              请据图分析：处理柑橘皮渣时，选用菌株 ______ ，理由是 ______ ．
              难度：较易
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            • 8． 探究温度对果胶酶活性的影响、pH对酶活性的影响、果胶酶的用量三个实验中，实验自变量依次是（    ）
              A．温度、pH、果胶酶用量
              B．温度、酶活性、酶用量
              C．苹果泥用量、pH、果汁量
              D．反应时间、酶活性、酶用量
              难度：较易
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            • 9． 为了探究从甲、乙、丙三种微生物获取的碱性淀粉酶的活性，兴趣小组的同学在科研人员的帮助下，从上述三种微生物提取了淀粉酶提取液（提取液中酶浓度相同），进行了如下实验．
              第一步：取四支试管，分别编号．
              第二步：按下表要求完成操作．并在表中各列的字母位置，填写相应试剂的体积量（mL）．
              试管1 试管2 试管3 试管4
              蒸馏水 2 2 2 A
              pH=8缓冲液 0.5 0.5 0.5 0.5
              淀粉溶液 1 1 1 1
              甲生物提取液 0.3
              乙生物提取液 0.3
              丙生物提取液 0.3
              总体积 3.8 3.8 3.8 3.8
              第三步：将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时．
              第四步：取出上述四支试管，冷却后滴入碘液．
              第五步：观察比较各支试管溶液颜色及其深浅．
              实验结果如下：（“+”表示颜色变化的深浅，“-”表示不变色）：
              试管1 试管2 试管3 试管4
              颜色深浅程度 ++ - + C
              请回答下列问题：
              （1）填写表中的数值：A为 ______ ，C的颜色深浅程度为 ______ （用“+++”或“--”表示）．该实验作为实验组的试管是 ______ ，设置对照实验的目的是排除 ______ 变量对实验结果的干扰．
              （2）该实验的自变量是 ______ ，无关变量有 ______ （至少写出2种）．
              （3）除了用碘液检验淀粉的剩余量来判断实验结果外，还可以用 ______ 试剂来检测生成物．若用该试剂检验，还需要对试管 ______ 处理，才能据颜色变化深浅判断出实验结果．
              （4）根据上述结果得出的实验结论是：不同来源的淀粉酶，虽然酶浓度相同，但 ______ 不同．
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            • 10． 下列有关实验的描述中，正确的有（　　）
              ①．稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目；
              ②．在高倍显微镜观察线粒体实验中用健那绿染色后细胞死亡；
              ③．橙色的重铬酸钾溶液在碱性条件下可与酒精发生反应，变成灰绿色；
              ④．观察洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂的实验中可用碱性染料吡罗红染色；
              ⑤．用果胶酶处理苹果泥时，大幅度提高反应温度能使果胶酶更充分地催化反应；
              ⑥．用萃取方法提取胡萝卜素的过程使用水浴加热，其目的是防止有机溶剂燃烧、爆炸．
              A．2项
              B．3项
              C．4项
              D．5项
              难度：较易
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