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            • 1.
              为生产具有特定性能的α-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656个碱基对),利用基因工程大量制备α-淀粉酶,实验流程见右图。请回答下列问题:

              (1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的 ______ 。
              (2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的 ______ 端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是 ______ 。
              (3)进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中 ______ 的设定引物有关, ______ 的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)
               ①变性温度 ②退火温度  ③延伸温度 ④变性时间 ⑤退火时间  ⑥延伸时间
               (4)下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列:

              图中虚线框内mRNA片段包含 ______ 个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有 ______ 种。
              (5)获得工程菌表达的α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如下:
              缓冲液 50mmol/L Na2HPO4-KH2PO4 50mmol/L Tris-HCl 50mmol/L Gly-NaOH
              pH 6.0 6.5 7.0 7.5 7.5 8.0 8.5 9.0 9.0 9.5 10.0 10.5
              酶相对活性% 25.4 40.2 49.8 63.2 70.1 95.5 99.5 85.3 68.1 63.7 41.5 20.8
              根据上述实验结果,初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为 ______ 。
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