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            • 1.

              多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质,呈油状液体,污染土壤后,很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用,为消除这种污染,科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

              (1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品溶解后________,接种到以________为唯一碳源的培养基上,从功能上讲,该培养基属于________________。通过人为提供有利于目的菌生长的____________________(至少答三种)等条件,抑制或阻止其他微生物的生长,从而起到筛选微生物作用。

              (2) 该培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、_____、倒平板。等平板冷却凝固后,将平板倒置,原因是____________________。

              (3)对已经接种的菌株要进行_______,如图是____________法。

              (4)若要测定培养液酵母菌的菌体数,可在显微镜下直接计数。若用___________法统计菌落数,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间,这样做的目的是______________。如果接种后,长出菌落的结果如图所示,可能的原因是___________________________________。

              (5)将1 mL酵母菌溶液稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57、58,据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为____________。

              (6)选取菌落数目稳定的记录作为结果,这样可以防止___________________________。

            • 2.

              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株.回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 _________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于 ________培养基.
              (2)培养基配制好以后在接种前必须进行 ________________,为了检测灭菌效果,应该 ________________________________________________________________________.
              (3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 _________________________________.
              (4)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈越大说明该菌株的降解能力 _______。
            • 3.

              艾弗里等人的肺炎双球菌体外转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,回答下列问题:

              (1)科研人员在实验室验证了艾弗里的实验,为了更直观的观察到培养基内有无转化发生,用于体外培养肺炎双球菌的培养基应选择___________(“固体”或“液体”),如果选用牛肉膏蛋白胨培养基培养,牛肉膏的作用是___________,接种方法为____________。

              (2)为确保操作环境(接种室、接种箱、超净工作台等)无污染,应采用___________消毒,为加强消毒效果还应喷洒适量的______________等化学抑菌剂。

              (3)接种后经过恒温培养24小时后,可通过________________________现象确定发生了肺炎双球菌的“转化”。

            • 4.

              表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方,请结合所学知识,回答下列相关问题。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              伊红美蓝

              琼脂

              含量

              10.0g

              5.0g

              5.0g

              2.0g

              0.2g

              12.0g

               

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL

              (1)根据用途划分,该培养基属于________培养基,若要分离能分解尿素的细菌,需对培养基作出的最关键的调整是_______________,若还需鉴定分解尿素的细菌,需作出的调整是____________。

              (2)从培养基的成分上看,大肠杆菌的同化类型为__________。该培养基中能作为大肠杆菌碳源物质的有________________。

              (3)在实验室培养微生物时,获得纯净培养物的关键是_______________,紫外线可对空气进行灭菌的原因是_____________。

            • 5.

              研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,进行了如下操作。请回答下列问题:

              (1)取样与选择培养:在某热电厂烟囱周围区域采集土样,取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要________。选择培养的目的是增加________的浓度。 

              (2)驯化脱硫细菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中,边搅拌边持续通入SO2气体,驯化几分钟后接种到固体培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO2的时间,与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的脱硫细菌具有____________________和____________________的能力。 

              (3)培养、观察与应用:为获得大量的目的菌以用于生产,在培养过程中技术人员需连续取样进行计数,计数方法一般有稀释涂布平板法和____________法。当用前者进行计数时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的____________,统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目。通常情况下,用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________。

              (4)土壤中分解尿素的微生物的分离与计数中,接种时每个稀释度下至少接种______组用于统计菌落数,一般选择菌落数为________的平板用于计数。

              (5)对分离分解尿素菌进一步鉴定需要在培养基中加入_________。

            • 6.

              (1)传统腐乳生产中豆腐块上生长的毛霉来自_____________,加盐腌制可以_____________,同时能抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质。


              (2)亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物——_________,测定亚硝酸盐的含量时,需要在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐能与___________发生重氮化反应。


              (3)在牛肉膏蛋白胨培养基中,蛋白胨可以为微生物的生长提供______________。倒平板时,要将冷凝后的平板倒置的原因是_______________。


              (4)统计微生物数目常用的两种方法是_________________和__________________。

            • 7.

              I.为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:

              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是____________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为______________。

              (2)在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________________________________________________________。

              II.有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。 


              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、____________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是____________________________________________________________ 。

              (2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有____________________________________________________ 。

              (3)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是____________________________________________,该实验设计是否合理?为什么?__________________________________。

            • 8.

              某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离,并统计每克土壤样品中的活菌数目,确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后,用蒸馏水定容到l 000 mL,再经高温灭菌,制成固体培养基以备用。

              (1)为保持干燥,培养皿用             法灭菌;待培养基冷却到     ℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时,在酒精灯附近倒平板;待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止                     ,防止造成污染。

              (2)根据培养基的成分判断,该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌,原因是                                    

              (3)该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是                         ;然后,将l mL样液稀释l00倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升样液中的活菌数为           

              (4)若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量,左下图是一块血细胞计数板正面示意图,其上有      个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图,该中格内细菌数量应计为     

            • 9.

              1)某市农科院课题研究小组对植物园的胡萝卜新种中的β—­胡萝卜素进行提取和鉴定,所用装置及所得的结果如下图。实验流程为:新鲜胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素粗品→胡萝卜素粗品的鉴定。

                 

              (1)科学研究最近发现天然胡萝卜素具有使          恢复成正常细胞的作用。

              (2)影响萃取效率的主要因素是__________________________,实验流程中的萃取与浓缩所用的操作装置图分别为             

              (3)若粉粹后的胡萝卜干燥所采用的温度太高,干燥时间太长会导致           

              (4)②所指的四个色斑代表           ,①③所指的四个色斑代表           ,结果表明β—­胡萝卜素提取是成功的。  

              (5)图3中的色素(或物质)①②③中,在层析液中溶解度最大的是        

              (6)某茶油股份有限公司用山茶籽提取山茶油,用油菜籽提取菜籽油,用花生提取花生油,这些油均系纯天然无添加,推测提取这些油的最可能方法是          


              2)乙草胺是除草剂中常见的化学成分,在土壤和水体中存在时间长,难以降解。请回答下列问题:

                 (1)实验小组欲从土壤中获取乙草胺降解菌,需将土壤样品置于以乙草胺为唯一碳源的培养基中进行富集培养。

                 (2)该实验小组选取乙草胺浓度为800mg/L的富集液进行系列稀释,分别取10-3、10-4和10-5倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上,每个稀释倍数涂布三个平板,各平板的菌落数分别为(286、298、297),(35、32、31),(36、7、2)。

                 ①不适合用于计数的为_________倍数的稀释液,用另外两组稀释倍数进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是:____________________________________________________。

                 ②某同学认为为了防止杂菌的污染,可在培养基中加入青霉素,你觉得该同学的说法是否确?__________,理由是                          

              (3)为探究乙草胺的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图所示实验。该实验的假设是:目的菌株能分泌降解乙草胺的__________,该实验设计是否合理?为什么?______________。

            • 10. 微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术.以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作.请回答下列问题:
              (1)土壤是微生物的大本营,该类微生物应取自            的土壤。
              (2)为筛选和纯化该类微生物,如何培养基营养成分特点是            
              (3)接种后需密封培养,由此推测该类微生物的异化作用类型是            ,培养一段时间后在培养基上形成降油圈,此时选取            就可获得高效菌株。
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