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            • 1． 回答下列有关的实验问题：
              （1）屠呦呦在青蒿素的研发上做出了重大贡献．如要在短期内获得大量青蒿植株幼苗，可以采用    技术．实验室中青蒿素与胡萝卜素的提取方法相同，决定萃取效率的主要因素是萃取剂的性质和    ．
              （2）在生活中制作酸奶就要获得优良乳酸菌菌种，应选用培养基培养．培养基中应含有碳源、氮源、水和无机盐，同时需要在培养基中添加    ，培养时还需提供    条件．
              （3）为了分离果胶酶产生菌，科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．
              ①为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行    ，用    法接种于固体培养基上．接种后的培养基    状态放入培养箱．
              ②选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较    和透明圈直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
              ③将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的    （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将    与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
              难度：中等
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            • 2． 通过花药离体培养技术培育高产柑橘品种，用柑橘果肉生产果汁，柑橘皮生产微生物蛋白（即微生物菌体）．
              回答下列问題：
              （1）通过花药培养产生单倍体植株一般有两条途经：一种是花粉经过    阶段发育为植株；另一种是花粉在诱导培养基上形成    ，经诱导分化成植株．
              （2）微生物蛋可作为动物的蛋白质饲料，因为微生物的生长繁殖速率快，不受地区、季节和气候的限制，而且蛋白质是细胞    （填“干重”或“鲜重”）中含量最高的物质．实验室里检测蛋白质的试剂是    ．
              （3）用柑橘皮生产微生物蛋白时，柑橘皮中的纤维素可以为微生物的生长提供    ，为了高效生产微生物蛋白，柑橘皮中还要添加一定量的    作为氮源，因为合成的微生物蛋白的主要组成元素是    ．
              （4）从土壤中分离纯化纤维素分解菌，应选择    的环境采集土样，鉴别纤维素分解菌常用    法．
              难度：中等
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            • 3． 利用农作物秸秆生产乙醇的流程为：秸秆→纤维素菌酶解→葡萄糖→酵母菌发酵→乙醇，减少了人类生活对石油资源的依赖．请回答相关问题：
              （1）分离纤维素分解菌应使用纤维素作为唯一碳源的    （填“选择”或“鉴别”）培养基．
              （2）为了进一步纯化纤维素分解菌，可在培养基中加入    染液，用    （方法）接种，然后挑选周围产 生的菌落作为菌种进行扩大培养．
              （3）在酸性条件下，可用    （试剂）来检测发酵产物中有无酒精产生．为了使酵母菌菌种能够反复利用，可采用    法固定化．
              （4）发酵时乙醇浓度升高会对酵母菌产生毒性，从而影响进一步的发酵．科学家利用转基因技术创造出耐乙醇的酵母菌新菌种，该过程需采用PCR技术扩增目的基因．在PCR扩增反应中需加入    酶和2种引物，其中引物的作用是    ．
              难度：中等
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            • 4． 玉米是重要的粮食作物，除传统的应用外，可将玉米秸秆中含有的纤维素水解成葡萄糖后，再利用酵母菌生产酒精；玉米胚可提取玉米胚芽油．请回答下列问题：
              （1）玉米秸秆中的纤维素水解成葡萄糖，是在    的作用下实现的，该酶是由    三种组分组成的复合酶，分解纤维素的细菌能合成这种酶．
              （2）分解纤维素的细菌通常从土壤中分离，分离时所用的培养基需添加    ，常利用    法将得到的培养液接种到培养基上，经培养后挑选出现    的菌落，即为分解纤维素的细菌．
              （3）将得到的葡萄糖溶液中加入酵母菌进行发酵，该过程    （填“需”或“不需”）进行灭菌处理，理由是    ．
              （4）玉米胚芽油不易挥发，从玉米胚芽中提取胚芽油可选用的方法有    ．
              难度：中等
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            • 5． 某研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到以葡萄糖为碳源的培养基中，在适宜条件下连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株．请回答下列问题：
              （1）用于培养JA122大肠杆菌的培养基中除了葡萄糖作为碳源外，还应该含有    ，要观察JA122大肠杆菌的菌落特征，则需在以上培养基中加入    ．
              （2）若要对JA122大肠杆菌计数，接种方法为    ，接种时接种工具要    后再使用．
              （3）样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株，均能在以葡萄糖为碳源的培养基上生长．
              ①鉴定CV101、CV103、CV116是新菌株的依据是菌落    ．
              ②对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐．进一步研究表明，CV101可以在经灭菌处理后的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：    ．
              ③某同学设计了以下实验来验证以上推测．
              第1步：配制以    为唯一碳源的培养基；
              第2步：将CV101和CV103菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况．
              预期实验结果及可得出的结论：    ．
              难度：中等
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            • 6． 在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养．请回答：
              （1）可以通过提高培养基中    的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为    培养基．
              （2）要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是    ．为检验（1）中筛选方法的效果，可以设置的对照组是    ．
              （3）在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是    ．为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿    培养．在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为    ．
              （4）根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是    ．
              难度：中等
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            • 7． 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．
              （1）酿酒酵母代谢类型是    无氧呼吸的反应式为    
              （2）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用    法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落．在葡萄酒酿造过程中，葡萄也需要冲洗，其主要目的是    ．
              （3）将培养基上的酵母菌菌株转接到    的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵．从存活的酵母菌中提取DNA，经PCR技术获得目的基因，PCR技术获得同一种目的基因的原理是    ．
              （4）将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因．将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏    能力的酿酒酵母作为受体菌．
              （5）将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能    ，即说明所需菌株培育成功．
              难度：中等
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            • 8． 回答有关微生物的问题．
              Ⅰ、凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶．培育产高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向．图1为产高酶活力凝乳酶的枯草芽孢杆菌培育过程．

              （1）枯草芽孢杆菌的芽孢是    ．
              A．休眠体    B．营养繁殖体    C．孢子        D．营养体
              （2）图1所示的b过程的目的是为    ，接种用的平板培养基在制备时需注意的是    （多选）．
              A．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
              B．倒好的培养基和培养皿要进行高压灭菌处理
              C．等到平板培养基冷却凝固后才可以盖上培养皿的皿盖
              D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置
              Ⅱ、在35℃、40分钟内能凝固1mL10%奶粉所需的酶量为一个酶活力单位（U）．图2表示图1中提取得到的各种凝乳酶活力检测结果．
              （3）据图2所示，酶催化能力最强的是    组，而各组酶催化能力存在差异的原因是    ．
              （4）A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：
              ①同学甲：A2、A5组芽孢杆菌可能未发生基因突变，用    技术检测即可证实．
              ②同学乙：A2、A5组与A0组酶活力虽然相同，但也可能存在不同的基因突变，理论上的解释是    ．
              难度：较难
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            • 9． （2016•奉贤区一模）I．培养基的配制与培养是微生物实验中的一个重要环节．
              （1）图1所示的是制备固体培养基时的实验操作步
              骤之一，一般称为    ．配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行    ，培养基在接种前要进行    灭菌，灭菌是否彻底或是否被污染需要检测，方法是    ．
              Ⅱ．从自然菌样中筛选理想菌种的步骤是：采集菌样    富集培养    纯种分离．
              （2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从    环境采集．
              （3）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择    的培养基，并在    条件下培养．
              （4）图2和图3是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，获得图2效果的接种方法是    ，获得图3效果的接种方法是    ．
              难度：较难
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            • 10． 某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（“目的菌”）．实验的主要步骤如下．请分析回答问题：
              （1）培养基中加入化合物A的目的是筛选    ，这种培养基属于    培养基．
              （2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的    ，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是    ．
              （3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量    的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量    ．
              （4）转为固体培养时，常采用    的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
              （5）实验结束时，使用过的培养基应该进行    处理后，才能倒掉．
              难度：中等
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