皮肤作为人体最大的器官，拥有达1.8m²的表面积，其主要功能是作为物理屏障，保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时，皮肤也是人体与外界环境接触的部位，因此常驻有各类微生物，包括细菌、真菌和病毒等。通过微生物培养技术能了解我们皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题：

(1)微生物生长繁殖所需要的营养物质有碳源、水、_________、_________四大类。由于不同种类微生物的菌落特征表现不同，因此可以利用_________（填“固体”或“液体”）培养基来培养，通过观察菌落特征对微生物进行初步的鉴定和分类。

(2)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。在溶化之后、灭菌之前需要调节______；灭菌后，待培养基冷却至______℃左右时，在酒精灯火焰旁倒平板；待平板冷却凝固后，需要将平板____________。

(3)利用平板划线法分离纯化某细菌的操作中，使用________法对接种环进行灭菌。第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，目的是____________。

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养主要提供了 ________ 和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_____和水。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）在接种操作过程中，为防止杂菌污染，需对接种空间和操作者的衣着和手等进行________（消毒、灭菌）；该小组可采用 ________ 或 ________ (接种方法)检测水样中的细菌含量。在接种前，随机取若干灭菌后的空平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是检测平板培养基_________是否合格；

（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，温度设定在37℃。为明确培养基的灭菌效果和接种中无菌操作的是否规范，使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。

（5）培养20小时后，观察到平板上有5种形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（6）该小组将得到的某菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的_______的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高培养液中__________的利用率。

（7）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌。

（8）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

酸奶是以牛奶为原料，经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌，经发酵制成的。家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题，为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行如图所示操作。回答下列问题：

（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板待其冷却后将平板倒置的主要原因是________。

（2）取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布，涂布前要将涂布器_______才能涂布。如果培养基上出现________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。

（3）在恒温培养箱中培养一段时间后，3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个，则可以推测酸奶中每毫升含菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是_______________________。

（4）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，可挑取乳酸菌菌落，无菌条件下培养进一步分离纯化，甲同学按下图④进行操作，据图分析，采用的接种方法称为______，其操作的两处不当之处分别是_________、_________。在老师的指导下，该同学按正确的方法重新操作，则经培养后菌落的分布情况最可能是图中的_______。

泡菜的制作是中国传统发酵技术之一，泡菜的制作离不开乳酸菌，某研究人员用泡菜滤液为材料分离纯化乳酸菌。已知培养基中添加碳酸钙显乳白色而不透明，乳酸能溶解碳酸钙。请回答下列问题：

（1）制作泡菜时，所用盐水煮沸，其目的是___________________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是__________________。

（2）在纯化分离时应该挑选出有____________的菌落为候选菌。

（3）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是________________________，原因是：_______________________。

（4）若要测定滤液中菌体数可在显微镜下用_______________直接计数。若要测定其活菌数量，可选用________________法进行计数，使用该计数方法时研究人员分别在6个培养基平板上接种稀释倍数为10⁴的滤液各0.1ml，培养一段时间后，平板上长出菌落数分别为19、130、166、400、188、116，则该泡菜滤液每1ml样品中活菌数为______________个。但该方法统计的结果往往___________（“多于”或“少于”）稀释液中的活菌数，原因是_____________________________________________________________________。

急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施,请回答下列与检验饮用水有关的问题:

(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为 。下面四种菌落分布图中,不可能是由该方法得到的是            。

(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组? 。为什么? 。

(3)如果各取0.1 mL已稀释10³倍的水样分别涂布到3个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为 。

(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管,应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌?  。

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和____________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________________。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_______和__________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯___________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物 )在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定，该除草剂的培养基不透明)。

(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。

(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：固体培养基, _______________。若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装________(填“前”或“后”)进行。对培养基进行灭菌，常采用的方法是________。

(3)培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

自生固氮菌可不与其他植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：

(1)在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是________(填序号)

①酒精灯 ②接种环 ③高压蒸汽灭菌锅 ④棉塞

(2)下表是某种培养液成分含量表。请据表回答：

①培养过程中需不断振荡的目的是____________________。

②可以采用________方法对固氮菌进行计数，如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应________。

③由上述结果可知，________菌的固氮效率最高。

（4）微生物纯化培养可以通过多种接种方法如               和             等,使大肠杆菌在固体培养基上形成单个            ,从而获得纯菌株。