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            • 1.

              酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:

              (1) 从土壤中筛选酸性脲酶生产菌,其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等,从功能上分析,该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

              (2) 筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时,需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

              (3) 对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液,分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则前者的数量___(多于/等于/小于)后者,其原因是________。

              (4) 若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时,应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况,从表中看出,海藻酸钠的浓度应选用__g/dL。若利用固定化酶技术,它的优点是___________________。

              海藻酸钠质量浓度(g/dL)

              凝胶强度

              凝胶气泡量

              成球难度

              凝珠形状

              1.0

              没有

              较易

              扁圆形

              2.0

              少量

              圆球形

              3.0

              较多

              稍难

              有托尾

              4.0

              大量

              难成球形

            • 2. 木聚糖酶系可以将半纤维素(一种多糖)转化为单细胞蛋白和其他有用物质。有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶,在食品工业上具有较高的潜在应用价值。现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌,并从中筛选木聚糖酶高产菌株,获得耐热木聚糖酶。回答下列问题:
              (1)实验中配制好的培养基灭菌通常使用______________________,牛奶常用巴氏消毒法,该方法的操作是_______________________________。 
              (2)取适量体积的样品涂布在富含__________且其为唯一碳源的固体培养基上,置于恒温培养箱中培养,菌落长出后,挑取单个菌落并进行一系列操作,然后在培养基上用__________法接种培养,进行菌株的__________。最后将得到的菌株接种到__________(填“固体”或“液体”)培养基中富集。 
              (3)将富集后的菌株接种于固体培养基上,待菌落长出后用0.1%的__________染色1h,再用1mol/LNaCl脱色。菌落周围会出现__________,筛选__________的菌落即为木聚糖酶高产菌株。
            • 3.

              请回答下面与微生物的培养与应用有关的问题:

              (1)在微生物培养过程中,获得纯净培养物的关键是_______________________;对玻璃器皿的灭菌方法为________________。 微生物常用的接种方法有2种,但只有______________方法可用于微生物的计数。

              (2)农作物秸秆中含有大量的纤维素,利用微生物可以将纤维素转化为酒精以供人类所需。将纤维素转化为酒精需要先将纤维素转化为葡萄糖,将纤维素转化为葡萄糖的酶是一种复合酶,它包括C1酶、_______ 、_____________,将葡萄糖转化为酒精的微生物是________。

              (3)如表是分离某种微生物的培养基配方: 

              表中X物质最可能为_____________(碳源、氮源、无机盐);培养基中添加琼脂的作用是________________________________________。

            • 4.

              为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:


              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过_________灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是__________。

              (3)示意图A和B中,_________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的__________________的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触。

            • 5. 为了检测抗生素作用,需要做细菌耐药实验。
              (1)为了统计某治病菌活菌数,可用________________法将样本接种于固体培养基表面。该接种方法中的接种工具是________________。
              (2)为了检测致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A  ________________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该病菌对抗生素B________________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________________。
              (3)根据(2),抗生素________________抗菌效果最好。

              (4)人类经常使用抗生素,细菌抗药性不断增强是________________的结果。

            • 6.

              多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质,呈油状液体,污染土壤后,很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用,为消除这种污染,科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

              (1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品溶解后________,接种到以________为唯一碳源的培养基上,从功能上讲,该培养基属于________________。通过人为提供有利于目的菌生长的____________________(至少答三种)等条件,抑制或阻止其他微生物的生长,从而起到筛选微生物作用。

              (2) 该培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、_____、倒平板。等平板冷却凝固后,将平板倒置,原因是____________________。

              (3)对已经接种的菌株要进行_______,如图是____________法。

              (4)若要测定培养液酵母菌的菌体数,可在显微镜下直接计数。若用___________法统计菌落数,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间,这样做的目的是______________。如果接种后,长出菌落的结果如图所示,可能的原因是___________________________________。

              (5)将1 mL酵母菌溶液稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57、58,据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为____________。

              (6)选取菌落数目稳定的记录作为结果,这样可以防止___________________________。

            • 7.

              在日常生活中,一提到细菌、真菌及病毒这些微生物,人们往往首先想到它们的害处,其实,很多微生物对人类是有益的,它们与我们人类的关系非常密切,而且人类巳经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题。

              (1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序:配制培养基→接种→培养→观察记录→纯化培养。

              ①采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是________________________。

              ②若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌能否将酒精转变成醋酸?____________________,原因是____________________。

              (2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是_____________。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的_____________,_________可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

              (3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌,经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到           培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌的常用方法有___________和__________。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、________________。

            • 8.

              自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离出这种酵母菌,操作如下:


              (1)制备酵母菌培养基要进行倒平板操作,待平板冷凝后要将平板倒置的主要原因是___________,获得纯净培养物的关键是________________。


              (2)纯化菌株时,用接种环在第二次及以后划线时,总是从上次的末端开始划线,这样做的目的是__________________________。


              (3)若要检测土样中的酵母菌数量,应采用___________法,该方法测得的细菌数一般比实际结果要低,原因是________________________;统计菌落数目时选取菌落数稳定时的记录作为结果,这样可以防止____________________ ;在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间,这样做的目的是_______________。


              (4)若想获得纤维素分解菌,常用的筛选方法是_______,即通过是否产生_______来筛选,在稀释涂布平板之前常通过选择培养来___________ 。

            • 9.

              根据从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤,回答有关问题:

              (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化.培养噬盐菌的菌样应从       环境采集。

              (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温纤维素酶微生物的富集培养应选择____________的培养基,并在_____________条件下培养。

              (3)接种前要对培养基进行______________________处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在__________________条件下进行。

              (4)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。获得图A效果的接种方法是__________,图B效果的接种方法是___________。一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是____________________________。

              (5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是____________,应该保持___________________等不变(至少答两项)。

            • 10.

              (1)传统腐乳生产中豆腐块上生长的毛霉来自_____________,加盐腌制可以_____________,同时能抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质。


              (2)亚硝酸盐在特定的条件下会转变成致癌物——_________,测定亚硝酸盐的含量时,需要在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐能与___________发生重氮化反应。


              (3)在牛肉膏蛋白胨培养基中,蛋白胨可以为微生物的生长提供______________。倒平板时,要将冷凝后的平板倒置的原因是_______________。


              (4)统计微生物数目常用的两种方法是_________________和__________________。

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